土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB4036
Price: 698 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Soil Nitrite Reductase (S-NiR) Activity Assay Kit

产品货号

KTB4036

产品特点：

验证样本类型齐全，适配多种土壤基质，操作步骤精简，适合批量检测

微量法设计，节约试剂与样本用量，降低实验成本

全程 4 ℃避光保存即可稳定 6 个月，冰袋运输保障运输途中的活性稳定

选择规格

48 T/48 S

¥698

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥1369

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为土壤样本设计的微量比色检测工具，可在实验室条件下快速评估土壤中亚硝酸还原酶（S-NiR）的活性水平，为研究氮素循环及反硝化过程提供可靠数据。

土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）是反硝化作用的关键限速酶，催化亚硝酸盐（NO₂^-）向一氧化氮（NO）的还原步骤，其活性直接反映土壤氮素转化效率与微生物功能潜力。CheKine™ 土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）活性检测试剂盒（微量法）基于酶促反应-比色联用原理：S-NiR 将 NO₂^- 还原为 NO，导致可与重氮试剂反应生成紫红色化合物的 NO₂^- 减少；通过测定 540 nm 处吸光度的下降幅度，即可定量计算土壤中 S-NiR 的活性。

应用领域

广泛应用于土壤学、环境科学、农业生态及微生物生态学研究，特别适合评估不同土地利用方式、施肥管理或气候变化背景下土壤氮素转化效率与反硝化潜力。

产品参数

中文名称	土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Soil Nitrite Reductase (S-NiR) Activity Assay Kit
产品货号	KTB4036
检测类型	水土检测
样本类型	土壤样本
试剂盒组分	• Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent V •Standard
分子	土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）
检测指标	土壤亚硝酸还原酶（S-NiR）
注意事项	•推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	4℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 540 nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
烘箱、30-50目筛、制冰机、低温离心机、恒温水浴锅、分析天平
去离子水

试剂准备

Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

Working Reagent II：临用前配制；48 T加入 5.5 mL去离子水，96 T加入 11 mL去离子水，充分溶解待用。4℃可保存 2周。

Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温（如出现沉淀可以 70-80℃加热溶解）。4℃保存。

Reagent IV：即用型；使用前，平衡到室温（如出现沉淀可以 70-80℃加热溶解）。4℃避光保存。

Reagent V：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。

注意：Reagent I 有毒，Reagent IV 和 Reagent V 有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。

Working Reagent IV：临用前根据用量将 Reagent IV 和 Reagent V 以 1:1的比例混合，现用现配。

Standard：10 µmol/mL亚硝酸钠标准溶液。4℃保存。

标准品制备：10 µmol/mL亚硝酸钠标准溶液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：

序号	Standard体积	去离子水体积（µL）	浓度（µmol/mL）
Std.1	100 µL 10 µmol/mL Standard	900	1
Std.2	160 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	40	0.8
Std.3	120 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	80	0.6
Std.4	80 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	120	0.4
Std.5	40 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	160	0.2
Std.6	20 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	180	0.1
Std.7	10 µL of Std.1 (1 µmol/mL)	190	0.05
Std.8	0	200	0（空白管）

注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50目筛。

实验步骤

1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 540 nm。可见分光光度计用去离子水调零。

2. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：

试剂	基质管（μL）	对照管（μL）	测定管（μL）	标准管（μL）
风干土样（mg）	0	40	40	0
去离子水	0	40	0	0
ReagentⅠ	40	0	40	0
Working Reagent II	40	40	40	0
混匀后，25℃孵育 3 h	-	-	-	-
Reagent III	40	40	40	0
充分震荡 30 s，10,000 rpm，4℃离心 10 min，取上清至微量玻璃比色皿或 96孔板中	-	-	-	-
上清液	70	70	70	0
Standard	0	0	0	70
Working Reagent IV	140	140	140	140

充分混匀，测定 540 nm各管吸光值，分别记为 A 基质、A 对照、A 测定、A 标准和 A 空白，计算ΔA 测定=A 基质-(A 测定-A 对照)，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：标准曲线、空白管和基质管只需测 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01，可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 2.0，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 标准曲线的绘制

以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定代入方程得到 x (μmol/mL)。

2. S-NiR活性的计算：

单位的定义：每天每 g土样还原 1 μmol NO₂^-的量为一个酶活力单位。

S-NiR(U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=0.96×x÷W

V 反总：反应体系总体积：0.12 mL；W：样本质量，0.04 g；T：反应时间，3 h=1/8 d。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。