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应用指南 2026-09-11 阅读

ALT/AST检测在肝纤维化保护作用研究中的应用:从荷叶碱联合益生菌干预CCl4模型说起

前一篇讲的是ALT/AST在安全性评价里的作用:作为一个重要的安全性checkpoint,用来判断新型递送系统是否带来明显的肝损伤。这一篇换到它更经典、也更直接的用途——评价保肝干预是否有效。

以《中国微生态学杂志》发表的一项研究为例。研究人员用荷叶碱联合双歧杆菌三联活菌胶囊干预CCl4诱导的小鼠肝纤维化,ALT/AST就是其中用于评价干预效果的一组重要指标。

研究背景:为什么CCl4模型这么常用

四氯化碳(CCl4)诱导肝损伤,是毒理学和药效学研究中使用了几十年的经典造模方法。

CCl4进入体内后,经肝脏细胞色素P450酶系代谢,其中主要涉及CYP2E1,并生成活性很强的三氯甲基自由基。随后发生脂质过氧化连锁反应,肝细胞膜结构受到破坏,进一步造成肝细胞坏死,并推动后续的纤维化进程。

这个模型的损伤机制比较清楚,重复性也较好,因此一直被用于评价各类保肝药物或活性成分的干预效果。

研究设计:荷叶碱联合益生菌干预

这项研究测试的是荷叶碱联合双歧杆菌三联活菌胶囊对CCl4诱导小鼠肝纤维化的干预效果,同时观察了干预前后小鼠肠道菌群结构的变化。

荷叶碱是从荷叶中提取的一种生物碱,在天然产物药理学研究中,其抗炎、抗氧化、调脂等作用受到较多关注。

这项研究还涉及近年来较受关注的肠肝轴(gut-liver axis)。肝脏与肠道之间通过门静脉血流、胆汁酸循环等途径保持密切联系,肠道菌群变化与肝损伤之间也存在相互影响。因此,不少天然产物和益生菌相关研究都会同时观察肝脏指标和肠道菌群变化。

ALT/AST在这里怎么用:评价干预后的肝损伤变化

研究团队检测了模型小鼠血清中的ALP、ALT、AST,并同时检测氧化应激指标MDA以及炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β。

结果显示,荷叶碱联合益生菌干预后,这些指标相比单纯造模组均显著下降。结合肠道菌群16S测序结果,研究结果支持该联合干预对CCl4诱导的肝纤维化具有保护作用。

其中,ALT/AST承担的是很直接的药效评价作用。

研究中的ALT/AST采用微板法检测。方法部分明确使用了CheKine™ ALT/GPT谷丙转氨酶活性检测试剂盒(KTB1410):终点比色法,采用96孔板操作,普通酶标仪即可完成读数。

这和前一篇里的安全性评价场景不太一样。前一篇关注的是实验处理有没有造成额外肝损伤;在这里,ALT/AST则用于观察干预后肝细胞损伤是否减轻。模型组ALT、AST升高,干预后出现下降,这组变化可以直接用于评价保肝干预效果。

CCl4诱导的肝损伤通常比较明显,造模组小鼠血清ALT、AST也可能出现较大幅度升高。因此,如果你在做类似模型,实际检测时遇到样本读数超出标准曲线范围,并不罕见。这时需要对样本进行适当稀释后重新检测。具体怎么判断以及怎么操作,可以参考实验方案那篇里的详细说明。

天然产物+益生菌:肠肝轴研究中的一种常见组合

这项研究把中药活性成分和益生菌放在一起评价肝损伤保护作用,同时观察肠道菌群变化,属于肠肝轴研究中的一种典型思路。

一边是天然产物的药理作用,一边是益生菌和肠道菌群调节,两者最终都落到肝损伤和肝功能相关指标上。对于这类研究,不管评价对象是中药单体、复方还是某个菌株,血清ALT/AST通常都会作为重要的肝损伤评价指标。

写在最后

从安全性评价到药效评价,ALT/AST可以出现在不同的实验设计里。同样一套检测,研究问题不同,它承担的角色也不同:有时是看实验处理有没有造成肝损伤,有时是看干预之后肝损伤有没有减轻。

如果你想继续了解这款试剂盒,可以根据目前所处的实验阶段往下看:


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