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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 羧酸酯酶（CarE）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法设计的微量体系试剂盒，可在 96 孔板中快速测定细胞裂解液、组织匀浆等生物样本中羧酸酯酶（CarE）的活性，为细胞代谢研究提供简便、高通量的分析手段。
哺乳动物羧酸酯酶（CarE，又称脂族酯酶 aliesterase）属于丝氨酸水解酶家族，广泛分布于肝脏、小肠、肺、肾等多种组织及细胞内。CarE 通过催化含酯键、酰胺键或硫酯键的内源/外源化合物水解，参与脂质运输、能量代谢以及多种药物、环境毒物和致癌物的解毒过程。有机磷类农药可与 CarE 活性中心丝氨酸残基共价结合，从而抑制其活性。本试剂盒利用 CarE 催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，萘酯与固蓝 B 盐发生显色反应，在 450 nm 处吸光度随时间线性增加；通过测定 450 nm 吸光度的变化速率即可计算样本中 CarE 的活性。
细胞代谢研究、药物代谢与毒理学评价、环境毒物暴露评估、有机磷农药残留监测、脂质代谢通路分析等。
| 中文名称 | 羧酸酯酶(CarE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Carboxylesterase (CarE) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB2301 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ |
| 分子 | CarE |
| 检测指标 | CarE |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working ReagentⅡ：临用前配制；取一支 ReagentⅡ向其中加入 0.6 mL无水乙醇充分溶解待用；现配现用。
Working Reagent III：临用前配制；取一支 Reagent III 向其中加入少量 ReagentⅠ充分溶解待用；现配现用。
Working Reagent：临用前配制，向一瓶 ReagentⅠ中，加入Working ReagentⅡ和Working Reagent III 各一支，充分溶解，过滤至空瓶中（48T带有 1个空瓶，96T带有 2个空瓶），4℃避光可保存 1周。
1. 动物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，12,000 g，4℃离心 30 min，取上清液，置冰上待测。
2. 血清（浆）等液体样本：直接测定。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min，调节波长到 450 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 根据实验用量，取出部分Working Reagent置于 37℃预热 30 min。
3. 操作表（下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中进行）：
| 试剂 | 空白孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|
| 去离子水 | 5 | 0 |
| 样本上清 | 0 | 5 |
| Working Reagent | 200 | 200 |
迅速混匀，于 450 nm处测定 10 s的吸光值 A1与 190 s的吸光值 A2，计算ΔA=A2-A1。
CarE活性的计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在 37℃反应体系中每分钟催化吸光值增加 1定义为 1个酶活单位。
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g组织在 37℃反应体系中每分钟催化吸光值增加 1定义为 1个酶活单位。
（3）按样本体积计算：
单位的定义：每mL样品在 37℃反应体系中每分钟催化吸光值增加 1定义为 1个酶活单位。
V 反总：反应体系总体积，0.205 mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.005 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；W：样本质量，g；T：反应时间，3min。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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