×

植物多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Plant Polyphenol Oxidase (PPO) Activity Assay Kit

产品货号
KTB1140

产品特点:

  • 专为植物生物样本设计,可直接测定PPO活性,简化实验流程。
  • 提供完整的Extraction Buffer、Reagent I、Reagent II,并附详细样品制备与结果计算方法。
  • 支持25–37 °C范围内灵活调节反应温度,适应不同样本PPO最适反应条件。
  • 微量法体系节省样本与试剂,适配常规酶标板检测。
  • 冰袋运输(蓝冰),4 °C避光保存,有效期12个月。
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥539
    现货(当天发货)
    96 T/96 S
    ¥816
    现货(当天发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™植物多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Plant Polyphenol Oxidase (PPO) Activity Assay Kit) 是一款基于比色法的微量检测工具,可在细胞代谢氧化应激研究框架内,快速评估植物生物样本中多酚氧化酶(PPO)的活性变化。

    多酚氧化酶(PPO, EC 1.10.3.1)是一类含铜的氧化还原酶,广泛分布于动物、植物、微生物及培养细胞中,能够催化一元酚和二元酚氧化生成醌类物质,进而引发褐变反应。该过程与果蔬加工、茶叶品质形成及植物组织培养等实际应用密切相关。本试剂盒通过比色法监测PPO催化底物氧化所引起的吸光度变化,从而定量反映样本中PPO活性水平。

    应用领域

    本试剂盒适用于细胞代谢氧化应激相关研究,可服务于:

    • 果蔬采后褐变机制与保鲜技术研究
    • 茶叶发酵过程中品质形成评估
    • 植物组织培养及遗传转化体系的氧化应激监测
    • 植物抗逆生理与信号转导研究
    植物多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 植物多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Plant Polyphenol Oxidase (PPO) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB1140
    检测类型 氧化应激
    检测方法 比色法
    试剂盒组分 • Extraction Buffer
    • Reagent I
    • Reagent II
    检测指标 PPO
    注意事项 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。
    • 样品处理等过程均需要在冰上进行,且须在当日测定酶活力,匀浆液避免反复冻融。
    • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    • 不同样本的多酚氧化酶最佳的反应温度略有差别,可在25-37℃之间进行调节。
    保存建议 收到货后,请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件,自发货之日起,按照推荐的保存条件,有效期为12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 410 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 冷冻离心机、制冰机、恒温水浴锅
    • 去离子水
    • 匀浆器

    试剂准备

    Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    试剂盒组分

    试剂盒组分48 T96 T储存条件
    Extraction Buffer60 mL120 mL4℃
    ReagentⅠ24 mL48 mL4℃
    ReagentⅡ6 mL12 mL4℃,避光保存

    ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    注意:ReagentⅡ有毒,使用时注意防护。

    样本制备

    注意:建议使用新鲜样本,如果不立即使用,可将样本在-80℃保存一个月。
    1. 粗酶液的制备:按植物组织质量(g):Extraction Buffer体积(mL)为 1:(5-10)的比例(建议称取 0.1 g 组织,加入 1 mL Extraction Buffer)处理样品,冰浴匀浆,8,000 g,4℃离心 10 min,取上清置于冰上待测。
    2. 煮沸样本:取适量粗酶液沸水浴 5 min(密封以防止水分散失),冷却至室温。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 410 nm,可见分光光度计用去离子水调零。
    2. 样本测定(在 1.5 mL EP管中依次加入下列试剂)。
    试剂对照管(μL)测定管(μL)
    煮沸样本500
    样本050
    ReagentⅠ200200
    ReagentⅡ5050

    3. 充分混匀,25℃水浴 10 min后,迅速进行沸水浴 10 min。混匀后,5,000 g,25℃离心 10 min,收集上清,取 200 μL至微量玻璃比色皿或 96孔板中,于 410 nm处检测测定管和对照管的吸光度,计算ΔA=A 测定-A 对照。

    注意:每个测定管需要设置一个对照管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。不同样本的 PPO最佳的反应温度略有差别,可在 25-37℃之间进行调节。如果样本吸光值小于 0.02可适当加大样本量。如果样本吸光值大于 1建议稀释再进行检测。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    A. 用 96孔板测定的计算公式如下:

    单位定义:每分钟每 g组织在每 mL反应体系中使 410 nm处吸光值变化 0.005为一个酶活力单位。

    PPO (U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷0.005÷T=120×ΔA÷W

    B. 使用微量玻璃比色皿测定的计算公式

    单位定义:每分钟每 g组织在每 mL反应体系中使 410 nm处吸光值变化 0.01为一个酶活力单位。

    PPO (U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷0.01÷T=60×ΔA÷W

    V反总:反应体系总体积,0.3 mL;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入 Extraction Buffer体积,1 mL;T:反应时间,10 min;W:样本质量,g。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

    相关资讯

    专业技术支持

    我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务

    实验方案设计

    根据您的研究目标,提供个性化的实验设计方案

    问题排查

    经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题

    在线技术咨询

    7x24小时在线技术支持,随时为您答疑解惑

    免费样品申请

    提供免费样品试用,让您先试后买更放心

    400电话
    在线咨询
    技术支持
    公众号
    公众号
    返回顶部