脂质过氧化(丙二醛)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 脂质过氧化(丙二醛)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1050
Price: 216 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Lipid Peroxidation (MDA) Assay kit

产品货号

KTB1050

产品特点：

兼容血清、血浆、尿液、动植物组织、细胞、细菌等多种样本类型，覆盖细胞代谢研究全流程。

微量法设计，节省样本与试剂，操作步骤简洁，实验周期短。

提供Extraction Buffer、Cell Extraction Buffer及Reaction Mix，组分清晰，即开即用。

支持-80°C长期保存样本，确保数据稳定性。

选择规格

48 T/48 S

¥216

现货（当天发货）

96 T/96 S

¥316

现货（当天发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 脂质过氧化（丙二醛）含量检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，专为定量分析细胞、组织及多种生物体液中丙二醛（MDA）含量而设计，可快速评估脂质过氧化水平，助力氧化应激研究。

背景与原理

氧自由基攻击脂质中的不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化反应，生成过氧化脂质；后者进一步分解产生丙二醛（MDA）。MDA 作为脂质过氧化的终末产物，其浓度直接反映氧化损伤程度。本试剂盒通过比色法测定 MDA 与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成的红色复合物在 532 nm 处的吸光度，从而准确量化样本中 MDA 含量，适用于动脉粥样硬化、糖尿病、阿尔茨海默症等氧化应激相关疾病的研究。

应用领域

广泛适用于细胞代谢分析、氧化应激机制研究、药物抗氧化评价及疾病模型构建等场景，为探索脂质过氧化在细胞损伤、衰老及病理进程中的作用提供可靠工具。

产品参数

中文名称	脂质过氧化(丙二醛)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Lipid Peroxidation (MDA) Assay kit
产品货号	KTB1050
检测类型	氧化应激
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer • Cell Extraction Buffer • Reaction Mix
分子	MDA
检测指标	MDA
注意事项	•如果未立即检测，样品可以在-80°C下储存。
保存建议	收到货后，请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为6个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 532 nm和 600 nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
水浴锅、离心机
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

Extraction Buffer: 即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Cell Extraction Buffer: 即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reaction Mix: 即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。如果有沉淀形成，70℃水浴至沉淀溶解。

试剂盒组分

试剂盒组分	规格	储存条件
Extraction Buffer	48 T: 60 mL 96 T: 120 mL	4℃
Cell Extraction Buffer	48 T: 60 mL 96 T: 120 mL	4℃
Reaction Mix	48 T: 18 mL 96 T: 36 mL	4℃

样本制备

动植物组织：称取 0.1 g，加入 1 mL预冷的 Extraction Buffer，将样本冰上进行匀浆，然后 13,000 g，4℃离心 10 min，取上清液做进一步分析。
细胞：收集 1×10⁷个细胞，用冷 PBS清洗细胞后，离心后弃上清，加入 0.5 mL预冷的 Cell Extraction Buffer，冰浴裂解细胞 5-10 min，每 3 min混匀一次，然后 13,000 g，4℃离心 10 min，取上清液做进一步分析。
细菌：收集 1×10⁷个细菌，用冷 PBS清洗细菌后，离心后弃上清，加入 0.5 mL预冷的 Extraction Buffer，冰浴超声波破碎细胞 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），然后 13,000 g，4℃离心 10 min，取上清液做进一步分析。
血清、血浆、尿液：可直接用来检测，如果有必要，建议将样本稀释成不同的浓度后，再进行检测。

注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上，可见分光光度计用去离子水调零。
在 EP管中按照如下方式加样：

试剂	空白管（μL）	测定管（μL）
Reaction Mix	300	300
去离子水	100	0
样本	0	100

充分混匀，95℃水浴中孵育 30 min（盖紧，防止水分散失），置于冰浴中冷却，10,000 g，25℃离心 10 min。
吸取 200 µL上清液到 96孔板或微量玻璃比色皿，测定 532 nm和 600 nm处吸光值，计算ΔA=A₅₃₂-A₆₀₀，ΔΔA_测=ΔA_测-ΔA_空（空白管只需做 1管）。

注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验，如果ΔΔA_测大于 1.0，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数；如果ΔΔA_测小于 0.001，可增加样本量进行检测。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

A. 使用 96孔板测定的计算公式

按照蛋白浓度计算
MDA含量(nmol/ mg prot)=[ ΔΔA_测×V_反总÷(ε×d)×10⁹]÷(Cpr×V_样)=51.6×ΔΔA_测÷Cpr
按照样本质量计算
MDA含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔΔA_测×V_反总÷(ε×d)×10⁹]÷(W ×V_样÷V_样总)=51.6×ΔΔA_测÷W
按细胞或细菌数量计算
MDA含量(nmol/10⁴)=[ ΔΔA_测×V_反总÷(ε×d)×10⁹]÷(1,000×V_样÷V_样总)=0.0258×ΔΔA_测
按血清、血浆、尿液等液体体积计算
MDA含量(nmol/ mL)=[ ΔΔA_测×V_反总÷(ε×d)×10⁹]÷V_样=51.6×ΔΔA_测

V_反总：反应体系总体积，4×10^-4L；ε：丙二醛摩尔消光系数，155×10³ L/mol/cm；d：96孔板光径，0.5 cm；10⁹：1 mol=1×10⁹ nmol；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；V_样：加入样本体积，0.1 mL；W：样本质量，g；V_样总：加入组织提取液体积，1 mL，加入细胞/细菌提取液体积，0.5 mL；1,000：细胞或细菌总数，1,000 万。

B. 使用微量比色皿测定的计算公式

将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。

常见问题

Q: 加入工作液后加热后离心，沉淀和上清都是无色，吸光度值也特别低，细胞数量是按照说明书准备，正常裂解离心取上清，可能是哪里出现了问题？

A: 如果ΔΔA 测测小于 0.001，可增加样本量检测。正常细胞最后检测呈现淡黄色。

Q: 请问样本煮完离心后有很多的白色沉淀，而且上清是透明的，是什么原因呢

A: 没有反应完的TBA，在低温会析出。离心取上清检测即可。上清透明可能是样本浓度低

Q: 请问 Extraction Buffer 可以用生理盐水或者PBS ph 7.4 代替吗？

A: 用生理盐水或者PBS ph 7.4也可以提取样本MDA，但与Extraction Buffer相比结果会有差异。

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。