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Hoechst 33258
Hoechst 33258
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
                                
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Hoechst 33258 是一种亮蓝色荧光核染料,以黄色固体形式提供,可在活细胞或固定细胞中与DNA的AT序列富集区域的小沟处非嵌入性结合,通过352 nm激发/461 nm发射的荧光信号,快速、直观地标记细胞核,广泛用于细胞凋亡、细胞周期及核形态学研究。
Hoechst 33258 属于非嵌入型双苯并咪唑类染料,其分子式为 C25H24N6O•3HCl,分子量 533.88 kDa。该染料可溶于水,在结合 DNA 前后荧光光谱略有差异:未结合 DNA 时 λEx/λEm = 346/460 nm,结合 DNA 后 λEx/λEm = 352/461 nm。由于优先与富含 AT 碱基对的序列结合,染色后细胞核呈现亮蓝色荧光,可通过荧光显微镜或流式细胞仪进行观察与定量分析,是细胞凋亡早期核固缩、碎裂等形态学变化检测的常用工具。
应用领域:细胞核染色、细胞凋亡检测、细胞周期分析、核形态学观察、高通量药物筛选等细胞生物学研究。
                                    | 中文名称 | Hoechst 33258 | 
| 英文名称 | Hoechst 33258 | 
| 产品货号 | BMD0061 | 
| 分子式 | C25H24N6O•3HCl | 
| 产品形式 | 黄色固体 | 
| 分子量 | 533.88 kDa | 
| 注意事项 | • 可溶于水。 | 
| 保存建议 | -20℃,避光保存12个月。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
(1)
向EP管中加入1 mL去离子水配置10 mg/mL Hoechst 33258的储液。
(2)
用PBS按照1:2,000稀释Hoechst 33258储液至终浓度为5 μg/mL的Hoechst 33258工作液。
a.
对于细胞或组织样品,固定后适当洗涤去除固定剂。如需免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。
b.
对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5 min。
c.
吸弃Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5 min。
d.
直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
a.
加入适量Hoechst 33258工作液,充分覆盖待染色的样品,通常对于六孔板每孔需加入1 mL的染色液,对于96孔板每孔需加入100 μL的染色液。
b.
室温避光孵育10-30 min。
c.
弃染色液,用PBS洗涤2-3次后添加50 μL PBS进行荧光显微镜拍照。
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