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Hoechst 33258

Hoechst 33258

产品货号
BMD0061

产品特点:

  • 高亲和力:选择性结合 DNA 的 AT 富集区,信号清晰。
  • 操作简便:水溶性良好,无需有机溶剂,可直接加入培养基或缓冲液。
  • 兼容性强:适用于活细胞、固定细胞及组织切片,兼容荧光显微镜、流式细胞仪等多种检测平台。
  • 稳定性高:-20 ℃避光保存可达 12 个月,冰袋运输确保运输过程低温稳定。
  • 选择规格

    10 mg
    ¥269
    期货(4天内发货)
    100 mg
    ¥1989
    期货(4天内发货)
    🎉 限时优惠

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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    Hoechst 33258 是一种亮蓝色荧光核染料,以黄色固体形式提供,可在活细胞或固定细胞中与DNA的AT序列富集区域的小沟处非嵌入性结合,通过352 nm激发/461 nm发射的荧光信号,快速、直观地标记细胞核,广泛用于细胞凋亡、细胞周期及核形态学研究。

    Hoechst 33258 属于非嵌入型双苯并咪唑类染料,其分子式为 C25H24N6O•3HCl,分子量 533.88 kDa。该染料可溶于水,在结合 DNA 前后荧光光谱略有差异:未结合 DNA 时 λExEm = 346/460 nm,结合 DNA 后 λExEm = 352/461 nm。由于优先与富含 AT 碱基对的序列结合,染色后细胞核呈现亮蓝色荧光,可通过荧光显微镜或流式细胞仪进行观察与定量分析,是细胞凋亡早期核固缩、碎裂等形态学变化检测的常用工具。

    应用领域:细胞核染色、细胞凋亡检测、细胞周期分析、核形态学观察、高通量药物筛选等细胞生物学研究。

    Hoechst 33258

    产品参数

    中文名称 Hoechst 33258
    英文名称 Hoechst 33258
    产品货号 BMD0061
    分子式 C25H24N6O•3HCl
    产品形式 黄色固体
    分子量 533.88 kDa
    注意事项 • 可溶于水。
    保存建议 -20℃,避光保存12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 荧光显微镜
    • 可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水
    • PBS

    实验步骤

    1. Hoechst 33258工作液配制

    (1)

    向EP管中加入1 mL去离子水配置10 mg/mL Hoechst 33258的储液。

    (2)

    用PBS按照1:2,000稀释Hoechst 33258储液至终浓度为5 μg/mL的Hoechst 33258工作液。

    2. 染色

    (1) 对于固定的细胞或组织

    a.

    对于细胞或组织样品,固定后适当洗涤去除固定剂。如需免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。

    b.

    对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5 min。

    c.

    吸弃Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5 min。

    注意:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。

    d.

    直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

    (2) 对于活细胞或组织

    a.

    加入适量Hoechst 33258工作液,充分覆盖待染色的样品,通常对于六孔板每孔需加入1 mL的染色液,对于96孔板每孔需加入100 μL的染色液。

    b.

    室温避光孵育10-30 min。

    c.

    弃染色液,用PBS洗涤2-3次后添加50 μL PBS进行荧光显微镜拍照。

    注意:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。

    注意事项

    1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
    2. Hoechst染料通常用于染色哺乳动物细胞,但是也可以用来染色死活细菌,染色死活细菌时推荐在PBS或150 mM NaCl中溶解为终浓度12-15 μg/mL的染色液室温染色30 min。对酵母的染色较弱。通常对于死细胞的染色要比活细胞染色亮度高。
    3. Hoechst 33258染料溶于水时溶解度可达10 mg/mL,用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10 μg/mL,可根据实际染色情况对染色液浓度及染色时间上下摸索。
    4. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议活细胞或组织染色后立即观察。

    常见问题

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    文献引用

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