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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物研发的ExKine™ Nuclei Extraction Kit (ExKine™ 细胞核分离提取试剂盒) 是一套专为哺乳动物细胞与组织设计的快速核提取系统，可在1小时内获得高纯度的细胞核，为下游染色质、基因组DNA、组蛋白及核RNA/RNP等研究提供可靠起点。
背景延伸
细胞核是遗传信息的储存与调控中心，其提取物是研究体外细胞凋亡、转录活性、表观遗传修饰及核组分分离的关键材料。传统核提取流程耗时长、步骤繁琐，而本试剂盒通过优化的裂解与实验缓冲液组合，在低温条件下即可温和裂解细胞膜与胞质，保留核膜完整性，减少核内容物泄漏，从而快速获得完整、高活性的细胞核，适用于后续染色质免疫沉淀（ChIP）、核蛋白免疫印迹、基因组DNA/RNA提取等多种实验。
细胞器提取与染色、细胞核功能研究、染色质及基因组DNA/RNA制备、核蛋白分析、体外细胞凋亡模型构建、表观遗传学研究。
| 中文名称 | 细胞核分离提取试剂盒-ExKine™ |
| 英文名称 | ExKine™ Nuclei Extraction Kit |
| 产品货号 | KTP4001 |
| 试剂盒组分 | • Lysis Buffer (10×) • Nuclei Storage Buffer |
| 注意事项 | 所有实验步骤请在2-8°C下执行。使用预冷的缓冲液和设备，并确保所有溶液都是解冻和均匀的。 |
| 保存建议 | 请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 规格 | 50 T | 200 T |
|---|---|---|
| Lysis Buffer (10×) | 20 mL | 80 mL |
| 储存条件 | 4 ℃ | 4 ℃ |
| Nuclei Storage Buffer | 10 mL | 40 mL |
| 储存条件 | 4 ℃ | 4 ℃ |
Lysis Buffer (1×)：用无菌去离子水稀释10× Lysis Buffer 4。使用前，置于冰上；4℃保存。
Nuclei Storage Buffer：即用型；使用前，置于冰上；4℃保存。
注意：所有的实验步骤需在2-8℃下进行。使用预冷的缓冲液和设备。确保所有的溶液是解冻和均匀的。
1.
对于贴壁细胞，用细胞刮刀收获7个细胞，然后500 g离心5 min。对于悬浮细胞，500 g离心5 min。
2.
用预冷的PBS重悬细胞沉淀，500 g离心2-3 min，弃上清。
注意：使用移液器小心吸取上清，使细胞沉淀尽可能干燥。
3.
向细胞沉淀中加入3 mL预冷的×1 Lysis Buffer后，以最大速度的一半速度将细胞涡旋10 s。
4.
将裂解的细胞在冰上孵育5 min。继续步骤III。
注意：用显微镜检查几微升细胞裂解液，以确保细胞裂解均匀并且细胞核中没有胞浆物质。
1.
将50-100 mg组织切成小块，放入离心管中。
2.
用预冷的PBS清洗组织，500 g离心5 min，弃上清。
注意：使用移液器小心吸取上清，使细胞组织尽可能干燥。
3.
加入3 mL预冷的×1 Lysis Buffer，轻轻地重悬组织。
4.
使用匀浆器匀浆组织，然后冰上孵育15 min。继续步骤III。
1.
将离心管于4℃下，500 g离心5 min，弃上清；
注意：上清液包含细胞质成分，可以保存以备后用或分析。
2.
用1 mL冰冷的×1 Lysis Buffer重悬沉淀。以最大速度的一半速度涡旋细胞10 s；
3.
在4℃下，500 g离心5 min，弃上清液，将细胞核沉淀物置于冰上；
4.
轻轻涡旋5 s使核沉淀松散开来。加入200 µL冰冷的Nuclei Storage Buffer，并使用移液器通过上下移液重悬细胞核（核酸分子首先会结块，但会因持续移液而分散。移液应稳定以及不产生气泡）；
注意：（1）细胞核应立即使用或在-80℃中冷冻保存。在-80℃ Nuclei storage buffer中冷冻的细胞核可稳定储存至少几个月。
注意：（2）最终核的数量和纯度可通过台盼蓝计数溶液对核染色，进行显微镜检测来快速确定（建议用2× Nuclei Storage Buffer稀释台盼蓝以防止核膨胀）。细胞核被染成蓝色，具有均匀的圆形或香肠形外观，而细胞质残留和细胞碎片将被染成浅蓝色，并且具有不规则的形态，（如果存在则清晰可见）。
A: 建议客户离心分离吸取上清液动作轻柔，仍有杂质可再离心一次。
A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物，建议客户纯化过程低温下进行，同时样本采用新鲜样本，同时纯化过程尽量在4度进行，去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素，如果客户样品对内毒素有要求，建议用曲拉通将内毒素萃取出来，。
A: 如果低分子量条带在原液中不存在，说明是在纯化过程中，靶蛋白出现降解，建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些，但是上样和洗脱的速度尽量不加快。
杂志名称: Advanced Healthcare Materials | 作者: Zhan, Jiawen, et al.
IF: 9.600 | 发表时间: 2025
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