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土壤丙酮酸(S-PA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Pyruvate (S-PA) Assay Kit

产品货号
KTB4061

产品特点:

  • 微量法设计,仅需少量土壤即可检测,节省样本与试剂
  • 显色反应专一,520 nm 波长下线性关系良好,结果可重复
  • 组分齐全、操作步骤简洁,适合高通量实验需求
  • 灵敏度低至 0.5 µg/mL,可捕捉土壤微环境代谢波动
  • 4 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输保障稳定性
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥1339
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥2116
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤丙酮酸(S-PA)含量检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量比色检测工具,可在 520 nm 波长下通过红色苯腙衍生物的显色反应,定量测定土壤中的游离丙酮酸含量。

    背景原理

    丙酮酸(Pyruvic acid, PA)作为连接糖酵解、三羧酸循环及脂肪酸、氨基酸代谢的中心枢纽,其含量变化可反映土壤微生物活性及有机质分解强度。本试剂盒利用2,4-二硝基苯肼与丙酮酸特异性反应,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙;该红色产物在碱性条件下于 520 nm 处具有最大吸收峰。通过测定吸光度并与标准曲线比对,即可在 1.094–70 µg/mL 范围内准确计算土壤样品中的丙酮酸浓度。

    应用领域

    广泛应用于土壤微生物代谢研究有机质分解动态监测施肥或污染胁迫下土壤呼吸评估等场景,为农业、生态及环境科学领域提供可靠的丙酮酸定量数据支持。

    土壤丙酮酸(S-PA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤丙酮酸(S-PA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Pyruvate (S-PA) Assay Kit
    产品货号 KTB4061
    样本类型 土壤
    试剂盒组分 • Extraction Buffer
    • ReagentⅠ
    • ReagentⅡ
    • Standard (1 mg/mL)
    检测范围 1.094-70 µg/mL
    灵敏度 0.5 µg/mL
    检测指标 土壤丙酮酸
    注意事项 •推荐使用新鲜土壤样本。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能检测 520 nm)
    • 恒温箱、离心机、超声波清洗仪、30-50目筛
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水

    试剂准备

    Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    Extraction Buffer70 mL (48 T)
    70 mL×2 (96 T)
    4℃,避光保存
    ReagentⅠ1.8 mL (48 T)
    3.6 mL (96 T)
    4℃,避光保存
    Reagent II8.8 mL (48 T)
    17.6 mL (96 T)
    4℃
    Standard (1 mg/mL)1 mL4℃

    ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    注意:Extraction Buffer有毒,ReagentⅠ有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    Reagent II:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    标准品制备:

    标准曲线设置:按下表所示用 Extraction Buffer将 1 mg/mL标准溶液稀释至 70、35、17.5、8.75、4.375、2.188、1.094 µg/mL的标准液。

    序号标准品体积Extraction Buffer(µL)标准品浓度(µg/mL)
    Std.135 µL1 mg/mL465 70
    Std.2200 µL of Std.1 (70 µg/mL)20035
    Std.3200 µL of Std.2 (35 µg/mL)20017.5
    Std.4200 µL of Std.3 (17.5 µg/mL)2008.75
    Std.5200 µL of Std.4 (8.75 µg/mL)2004.375
    Std.6200 µL of Std.5 (4.375 µg/mL)2002.188
    Std.7200 µL of Std.6 (2.188 µg/mL)2001.094
    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。称取约 0.1 g风干土样,加入 1 mL Extraction Buffer混匀,置于超声波清洗仪室温超声 30 min,然后 12,000 g,室温离心 10 min,取上清液待测。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上,调节波长至 520 nm,可见分光光度计用去离子水调零;
    2. 样本测定(在 96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂):
    试剂名称空白孔(μL)标准孔(μL)测定孔(μL)
    待测样本0075
    不同浓度的 Std.0750
    Extraction Buffer7500
    ReagentⅠ252525

    混匀后,室温静置 2 min

    试剂名称空白孔(μL)标准孔(μL)测定孔(μL)
    Reagent II125125125

    3.混匀,在 520 nm波长处测定各孔的吸光值 A。计算相对吸光值ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。(空白孔只需做一管)

    注意:空白孔和标准孔只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 70 µg/mL的ΔA 标准,样本可用 Extraction Buffer进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1.标准曲线的绘制

    以标准溶液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定代入方程得到 x (µg/mL)。

    2. S-PA含量计算

    S-PA (µg/g 土壤)=(x×V 样)÷(W×V 样÷V 提取)=x÷W

    V 样:加入的样本体积,0.075 mL;V 提取:加入 Extraction Buffer体积,1 mL;W:样本质量,g。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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