羟自由基清除能力检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 羟自由基清除能力检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1091
Price: 248 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Hydroxyl Free Radical Scavenging Capacity Assay Kit

产品货号

KTB1091

产品特点：

简单、快速、灵敏的比色法，30 min内完成检测。

兼容动植物组织、血清（浆）、细胞、细菌、细胞上清、果汁、蜂蜜、尿液等多种样本。

提供详细的样品制备流程、结果计算方法及标准化结果展示模板，便于实验标准化与数据比对。

选择规格

48 T/48 S

¥248

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥326

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的CheKine™ 羟自由基清除能力检测试剂盒（微量法）是一种基于Fenton反应与比色法的快速检测工具，通过测定水杨酸捕获•OH后生成的有色产物，在510 nm处吸光度的变化，定量评估动植物组织、细胞、血清、果汁、蜂蜜、尿液等多种样本对羟自由基的清除能力。

羟自由基（•OH）是氢氧根离子（OH⁻）的中性形式，反应活性极高，易攻击蛋白质、核酸、脂质等生物大分子，引发细胞结构与功能损伤，进而导致代谢紊乱及疾病。羟自由基清除能力已成为抗氧化类保健品、药品及食品研究的核心指标之一。本试剂盒利用Fe²⁺-H₂O₂体系产生•OH，后者与水杨酸反应生成2,3-或2,5-二羟基苯甲酸，在510 nm处呈现特征吸收峰；当样本中存在抗氧化物时，•OH被清除，吸光度降低，其下降幅度与样本抗氧化能力成正比。

应用领域

细胞代谢研究、氧化应激机制探索、抗氧化药物筛选、功能性食品与保健品功效评价、环境毒理学评估等。

产品参数

中文名称	羟自由基清除能力检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Hydroxyl Free Radical Scavenging Capacity Assay Kit
产品货号	KTB1091
检测类型	氧化应激
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Ferrous Salt • H2O2 •Salicylic Acid
分子	Hydroxyl Free Radical Scavenging Capacity
检测指标	Hydroxyl Free Radical Scavenging Capacity
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 •测定过程中样本和所有试剂在冰上放置，以免变性和失活。 • OD值超过1.3，样本需要稀释。 • 样本有溶血或本身颜色深，需要做自身对照。具体做法是取200 µL稀释后的样本加入30 µL 的Extraction Buffer（1x），37℃孵育5 min，记录340 nm处的吸光值，计算时测定孔减去自身对照的OD值。 • 血清和血浆以及组织样本建议用Extraction Buffer（1x）稀释5倍进行检测。 • Reagent I和Reagent II用完密封保存。
保存建议	该试剂盒的有效期为12个月，4℃保存；试剂盒各组分的储存条件，请参考说明书。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 520 nm处的吸光度）
恒温箱、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

试剂盒组分

试剂名称	规格	储存条件
Ferrous Salt	10 mL (48 T) / 20 mL (96 T)	4℃，避光保存
H2O2	5 mL (48 T) / 10 mL (96 T)	4℃，避光保存
Salicylic Acid	10 mL (48 T) / 20 mL (96 T)	4℃，避光保存

Ferrous Salt：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

H2O2：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

Salicylic Acid：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

注意：Ferrous Salt具有腐蚀性，Salicylic Acid对皮肤和黏膜具有刺激性，建议使用时做好个人防护。

样本制备

动物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL去离子水，冰浴匀浆，10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
植物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL去离子水捣碎，冰浴超声波破碎 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
细胞或细菌：收集 500万细胞或细菌到离心管内，用冷 PBS清洗细胞或细菌，离心后弃上清，加入 1 mL去离子水，冰浴超声波破碎细胞或细菌 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），然后 10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
血清（浆）等蛋白含量高或浑浊的液体：取 0.1 mL样本，加入 1 mL去离子水混匀，10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
蜂蜜和尿液等蛋白含量低且清澈的液体：直接测定。
提取物或者药物：可配制成一定浓度，如 0.5 mg/mL进行测定。

实验步骤

酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 520 nm，可见分光光度计用去离子水调零。
样本测定（在 96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂）：
试剂空白孔 (μL) 标准孔 (μL) 测定孔 (μL) 对照孔 (μL)
Ferrous Salt 40 40 40 40
H2O2 0 40 40 0
去离子水 120 80 40 80
Salicylic Acid 40 40 40 40
样本 0 0 40 40
混匀，37℃反应 20 min，测定 520 nm吸光值。计算ΔA 测=A 测定-A 对照、ΔA 标=A 标准-A 空白

注意：(1) 为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须稀释倍数相同，提取物或者药物配制成同样浓度。(2) 空白管和标准管只需做 1-2次。每个测定孔需要设置一个对照孔。(3) 如果ΔA 测小于 0.02可适当加大样本量。如果ΔA 测大于ΔA 标，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

计算公式：羟自由基清除率 D%=(ΔA 标-ΔA 测)÷ΔA 标×100%

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗？

A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。

Q: 该类试剂盒使用量应如何计算？

A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗？

A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

文献引用

The dual angiogenesis effects via Nrf2/HO-1 signaling pathway of melatonin nanocomposite scaffold on promoting diabetic bone defect repair.

杂志名称: International journal of nanomedicine | 作者: Chen, Tingting, et al.

IF: 7 | 发表时间: 2024

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试剂	空白孔 (μL)	标准孔 (μL)	测定孔 (μL)	对照孔 (μL)
Ferrous Salt	40	40	40	40
H2O2	0	40	40	0
去离子水	120	80	40	80
Salicylic Acid	40	40	40	40
样本	0	0	40	40

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