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土壤过氧化物酶(S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Peroxidase (S-POD) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤过氧化物酶 (S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具,可在 96 孔板中完成高通量测定,通过 430 nm 比色信号直接反映土壤过氧化物酶 (S-POD) 的活性水平。
土壤过氧化物酶(Solid Peroxidase,S-POD)主要由土壤微生物分泌,能够催化土壤有机底物氧化生成过氧化物,进而参与腐殖质的形成与碳氮循环。本试剂盒利用 S-POD 将底物氧化成醌类产物,该产物在 430 nm 处具有特征吸收峰;吸光度的变化与酶活性呈正相关,从而实现对土壤样本中 S-POD 活性的定量分析。
适用于农业生态、环境科学及土壤微生物学研究中土壤代谢活性的评估,可服务于土壤健康监测、施肥策略优化及污染物降解潜力分析等场景。
| 中文名称 | 土壤过氧化物酶(S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Peroxidase (S-POD) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4023 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Standard |
| 分子 | 土壤过氧化物酶 (S-POD) |
| 检测指标 | 土壤过氧化物酶 (S-POD) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
Working Reagent I:临用前配制;每瓶加入 12 mL去离子水,充分溶解;用不完的试剂 4℃避光保存 1周。
Reagent II:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
Reagent III:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
Reagent IV:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
Stardard:即用型;10 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.4 mg/mL紫色没食子素溶液;使用前,平衡到室温。4℃避光保存。
0.2 mg/mL Standard:临用前配制;取 150 µL Standard,加入 150 µL Reagent IV,充分混匀,浓度是 5 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.2 mg/mL紫色没食子素溶液。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定管 | 对照管 |
|---|---|---|
| 样本(g) | 0.04 | 0.04 |
| Working Reagent I(μL) | 100 | 100 |
| Reagent II(μL) | 20 | 0 |
| 去离子水(μL) | 0 | 20 |
混匀后,置于 30℃孵育 1 h。
| 试剂 | 测定管 | 对照管 |
|---|---|---|
| Reagent III(μL) | 50 | 50 |
| 乙醚(μL) | 430 | 430 |
震荡 2 min,5,000 g,25℃离心 10 min,取 200 μL上清至 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿中,记录 430 nm处吸光值,测定孔记为 A 测定,对照孔记为 A 对照。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照。
(1) 空白孔和标准孔只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。
(2) 如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.6可减少样本量。
(3) 乙醚具有刺激性和腐蚀性,建议在使用过程中做好个人防护,使用 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿;因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上清液里润洗 2-3次,再转移测定;乙醚易挥发,转移至 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿后立即测定,最好一个一个测定。
S-POD活性的计算:
酶活单位定义:每天每 g土样中产生 1 mg紫色没食子素为一个酶活力单位。
S-POD(U/g 土样)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷W÷T=2.88×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准:0.2 mg/mL紫色没食子素溶液;V 反总:反应体系总体积,0.6 mL;W:样品质量,g;T:反应时间,1 h=1/24 d。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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