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土壤过氧化物酶(S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Peroxidase (S-POD) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4023

产品特点:

  • 已验证多种土壤类型,样本兼容性强
  • 微量法设计,节省样本与试剂,适配 96 孔板高通量检测
  • 操作步骤简洁,显色反应快速,结果读取直观
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥416
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥798
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤过氧化物酶 (S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具,可在 96 孔板中完成高通量测定,通过 430 nm 比色信号直接反映土壤过氧化物酶 (S-POD) 的活性水平。

    背景与原理

    土壤过氧化物酶(Solid Peroxidase,S-POD)主要由土壤微生物分泌,能够催化土壤有机底物氧化生成过氧化物,进而参与腐殖质的形成与碳氮循环。本试剂盒利用 S-POD 将底物氧化成醌类产物,该产物在 430 nm 处具有特征吸收峰;吸光度的变化与酶活性呈正相关,从而实现对土壤样本中 S-POD 活性的定量分析。

    应用领域

    适用于农业生态、环境科学及土壤微生物学研究中土壤代谢活性的评估,可服务于土壤健康监测、施肥策略优化及污染物降解潜力分析等场景。

    土壤过氧化物酶(S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤过氧化物酶(S-POD) 活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Peroxidase (S-POD) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4023
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ
    •Reagent Ⅳ
    •Standard
    分子 土壤过氧化物酶 (S-POD)
    检测指标 土壤过氧化物酶 (S-POD)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 430 nm处的吸光度)
    • 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管
    • 水浴锅、离心机、30-50目筛
    • 去离子水、乙醚

    试剂准备

    Working Reagent I:临用前配制;每瓶加入 12 mL去离子水,充分溶解;用不完的试剂 4℃避光保存 1周。

    Reagent II:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。

    Reagent III:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。

    Reagent IV:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。

    Stardard:即用型;10 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.4 mg/mL紫色没食子素溶液;使用前,平衡到室温。4℃避光保存。

    注意:Reagent I,Reagent IV 和 Stardard有一定的刺激性,建议在使用过程中做好个人防护。

    0.2 mg/mL Standard:临用前配制;取 150 µL Standard,加入 150 µL Reagent IV,充分混匀,浓度是 5 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.2 mg/mL紫色没食子素溶液。

    注意:每次实验都需要制备 0.2 mg/mL Standard,稀释后的 0.2 mg/mL Standard需在 4 h内使用完。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 430 nm,可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. 标准孔和空白孔的测定:以 Reagent IV 为空白孔,分别取 200 μL Reagent IV 和 200 μL 0.2 mg/mL Standard至微量玻璃比色皿或 96孔板中,记录 430 nm处吸光值,空白孔记为 A 空白,标准孔记为 A 标准,计算ΔA 标准=A 标准-A 空白。
    3. 操作表(下述操作在 1.5 mL离心管中):
    试剂测定管对照管
    样本(g)0.040.04
    Working Reagent I(μL)100100
    Reagent II(μL)200
    去离子水(μL)020

    混匀后,置于 30℃孵育 1 h。

    试剂测定管对照管
    Reagent III(μL)5050
    乙醚(μL)430430

    震荡 2 min,5,000 g,25℃离心 10 min,取 200 μL上清至 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿中,记录 430 nm处吸光值,测定孔记为 A 测定,对照孔记为 A 对照。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照。

    (1) 空白孔和标准孔只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。

    (2) 如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.6可减少样本量。

    (3) 乙醚具有刺激性和腐蚀性,建议在使用过程中做好个人防护,使用 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿;因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上清液里润洗 2-3次,再转移测定;乙醚易挥发,转移至 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯/聚丙烯材质)或微量玻璃比色皿后立即测定,最好一个一个测定。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    S-POD活性的计算:

    酶活单位定义:每天每 g土样中产生 1 mg紫色没食子素为一个酶活力单位。

    S-POD(U/g 土样)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷W÷T=2.88×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W

    C 标准:0.2 mg/mL紫色没食子素溶液;V 反总:反应体系总体积,0.6 mL;W:样品质量,g;T:反应时间,1 h=1/24 d。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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