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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒（微量法）是一款专为植物样本设计的微量比色检测工具，可在 96 孔板中快速定量样本中的原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC）。该试剂盒利用香草醛-盐酸显色体系，通过 500 nm 处的吸光度变化，实现对 OPC 含量的高灵敏度测定，为细胞代谢与氧化应激研究提供可靠数据。
背景知识扩展
原花青素（OPC）是由黄烷醇单体及其聚合体构成的多酚化合物，广泛分布于葡萄籽、松树皮、蓝莓等植物器官中，因其优异的抗氧化和自由基清除能力而被医药、食品、化妆品及保健品行业广泛关注。CheKine™ 试剂盒基于香草醛与 OPC 在酸性条件下发生特异性缩合反应，生成红色产物，其颜色深浅与 OPC 浓度成正比；在 0.39–50 mg/g 的线性区间内，500 nm 吸光度变化可直接反映样本中 OPC 的含量。试剂盒配套提供 OPC 标准品及标准曲线模板，便于研究者进行绝对定量。
应用领域
该试剂盒适用于植物组织、细胞培养物及植物来源提取物中的 OPC 含量测定，可服务于细胞代谢、氧化应激机制研究，以及功能性食品、植物药、化妆品原料的质量控制与配方开发。
| 中文名称 | 植物原花青素(OPC)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Plant Oligomeric Proantho Cyanidins (OPC) Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1520 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • hydrochloric acid • Vanillin（香草醛） • 原花青素（OPC）标准品 |
| 检测范围 | 0.39-50 mg/g |
| 灵敏度 | 0.39 mg/g |
| 分子 | OPC |
| 检测指标 | OPC |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • 每个样本都需要设置一个对照孔，显色完成后立即测定，2小时后吸光值会下降。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为6个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 48 T: 70 mL 96 T: 70 mL×2 | 4℃ |
| Hydrochloric Acid | 48 T: 12 mL 96 T: 24 mL | 4℃ |
| Vanillin Powder | 48 T: ×1 vial 96 T: ×1 vial | 4℃，避光保存 |
| OPC Standard Powder | 48 T: ×1 vial (5 mg) 96 T: ×1 vial (5 mg) | 4℃，避光保存 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Hydrochloric Acid：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Vanillin：使用前，48 T加 6 mL甲醇溶解，96 T加 12 mL甲醇溶解；平衡到室温；4℃避光保存一个月。
工作液：临用前，按照用量将 Hydrochloric Acid和溶解后的 Vanillin按照体积 1:1混合，平衡到室温；现用现配。
空白工作液：临用前，按照用量将 Hydrochloric Acid和甲醇按照体积 1:1混合，平衡到室温；现用现配。
OPC Standard：使用前，加入 1 mL Extraction Buffer溶解，浓度为 5 mg/mL；平衡到室温；4℃避光保存 2周。
OPC Standard设置：按下表所示，用 Extraction Buffer将 5 mg/mL标准品稀释为 2.5、1.25、0.625、0.3125、0.156、0.078和 0 mg/mL的标准溶液。
| 序号 | 标准品体积（µL） | Extraction Buffer体积（µL） | 标准品浓度（mg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 100 µL | 0 | 5 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1 (5 mg/mL) | 100 | 2.5 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (2.5 mg/mL) | 100 | 1.25 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (1.25 mg/mL) | 100 | 0.625 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (0.625 mg/mL) | 100 | 0.3125 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (0.3125 mg/mL) | 100 | 0.156 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (0.156 mg/mL) | 100 | 0.078 |
| Std.8 | 0 | 100 | 0（空白孔） |
1. 纤维较多的植物组织：将植物样本烘干至恒重，粉碎并过 40目筛，称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer捣碎，冰浴超声波破碎 30 min（功率 30%或 300 W，超声 5 s，间隔 8 s），12,000 rpm，25℃离心 10 min，取上清，用 Extraction Buffer定容至 1 mL，置冰上待测。
2. 纤维较少的幼嫩植物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer捣碎，冰浴超声波破碎 30 min（功率 30%或 300 W，超声 5 s，间隔 8 s），12,000 rpm，25℃离心 10 min，取上清，用 Extraction Buffer定容至 1 mL，置冰上待测。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 500 nm，可见分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中操作）：
| 试剂 | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本 | 0 | 40 | 40 |
| 不同浓度 Std. | 40 | 0 | 0 |
| 空白工作液 | 0 | 0 | 160 |
| 工作液 | 160 | 160 | 0 |
3. 混匀，30℃恒温孵育 30 min，检测 500 nm处吸光值。空白孔记为 A 空，标准孔记为 A 标、测定孔记为 A 测、对照孔记为 A 对。
计算ΔA 测=A 测-A 对，ΔA 标=A 标-A 空。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 y轴，ΔA 标为 x轴，绘制标准曲线。
2. 原花青素（OPC）含量的计算
将样本的ΔA 测代入方程得到 y值（mg/mL）。
(1) 按样本质量计算
OPC (mg/g 质量)=y×V 提取÷W=y÷W
(2) 按蛋白浓度数量计算
OPC (mg/mg prot)=y×V 提取÷(Cpr×V 提取)=y÷Cpr
V 提取：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
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