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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物推出的Fluo-4 钙离子检测试剂盒 (Fluo-4 Calcium Assay Kit, KTA7010)是一款专为细胞状态分析设计的核心产品，基于 Fluo-4 AM 钙离子荧光探针，可快速、直观地监测活细胞内钙离子浓度的动态变化，适用于荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等多种检测平台。
细胞内钙离子（Ca²⁺）作为第二信使，在细胞凋亡、周期调控、信号转导等关键生命活动中扮演重要角色。Fluo-4 AM 是一种细胞膜可穿透的酯化钙荧光探针，进入细胞后被胞内酯酶水解为 Fluo-4，与游离 Ca²⁺ 结合后产生绿色荧光。相较于 Fluo-3，Fluo-4 将 Cl⁻ 替换为 F⁻，激发波长向短波方向偏移约 10 nm，更接近氩激光器 488 nm 激发光，因此荧光信号更强、信噪比更高。通过Ionomycin（钙离子载体）刺激，可在数秒内观察到荧光强度随 Ca²⁺ 浓度升高而增强，实现实时动态监测。
适用于细胞凋亡、细胞周期、神经信号传导、心肌细胞兴奋-收缩偶联、药物筛选等研究，尤其适合监测肿瘤细胞、原代细胞、干细胞等模型中钙离子介导的生理或病理过程。
| 中文名称 | Fluo-4钙离子检测试剂盒 |
| 英文名称 | Fluo-4 Calcium Assay Kit |
| 产品货号 | KTA7010 |
| 试剂盒组分 | •Fluo-4 AM (500×) •Staining Enhancer (500×) •Assay Buffer |
| 注意事项 | • 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解 Fluo-4 AM，从而降低 Fluo-4 AM 进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，加工作液前应尽量去除残留培养基。 • Ionomycin 是一种对钙离子有亲和力的离子载体，细胞经 Ionomycin 处理数秒内就能观察到绿色荧光强度增加，推荐使用激光共聚焦显微镜连续拍摄来检测细胞内钙离子浓度的变化。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于-20℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Stain Solution：临用前配制，每 加入 × ，混匀。1 mLAssay buffer 2 μL Fluo-4 AM (500 )
可选做：如果 进入细胞的效果不好，可向 中加入 × 至终浓度为 ，Fluo-4 AM Stain Solution Staining Enhancer (500 ) 1× Staining Enhancer Fluo-4 AM Fluo-4 AM可防止 在缓冲液中聚集并促进 进入细胞。
1.
对于非贴壁细胞， 离心 收集细胞，用 清洗 次，弃去 。对于贴壁细胞，先用胰蛋白酶（不含 ）消化细胞，然后 离心 离心收集细胞，用 清洗 次，弃去 。300 g 5 min PBS 2 PBS EDTA 300 g 5 min PBS 2
注意：需准备悬浮在 的细胞样本，用于流式细胞检测时的阴性对照。Assay Buffer
2.
用 重悬 6细胞，37℃ 避光孵育 ，不同的细胞最佳孵育时间有所不同。1 mL Stain Solution 1×10 10-60 min
注意：如果是首次实验不能确定孵育温度和时间，建议先尝试 37℃ 孵育 ，观察荧光效果。如果细胞死亡较多，则适当缩短30 min时间或降低温度；如果荧光强度太弱，则适当延长时间。
3.
孵育完成后，可直接进行流式细胞仪检测（ 通道），也可 离心 离心收集细胞，吸弃 后每个样本加入 重悬细胞后进行流式细胞仪检测。FL1/BL1 300 g 5 min Stain Solution 0.5 mL Assay Buffer
(1)
在合适的孔板上培养细胞，在 细胞培养箱中 37℃ 培养至少 ，再进行后续实验。CO2 24 h
(2)
用 清洗细胞 次。PBS 2
(3)
加入适当体积的 到细胞中，通常 孔板每孔加入 ，96 50 μL 24 200 μL孔板每孔加入 ，12 500 μL孔板每孔加入 ，6孔板每孔加入 ，1 mL 37℃ 避光孵育 ，不同的细胞最佳孵育时间有所不同。10-60 min
注意：如果是首次实验不能确定孵育温度和时间，建议先尝试 37℃ 孵育 ，观察荧光效果。如果细胞死亡较多，则适当缩短30 min时间或降低温度；如果荧光强度太弱，则适当延长时间。
(4)
孵育结束后，可直接进行荧光显微镜检测（Ex/Em=494/516 nm），也可吸弃 ，用 或 洗涤细胞 次后进行荧光显微镜检测。Stain Solution PBS HBSS 2-3
(1)
参照步骤 的流式细胞染色。A.1-A.3
(2)
将步骤 的细胞悬浮置于玻片上，用盖玻片盖住细胞，在荧光显微镜下观察。A.3
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杂志名称: Science of The Total Environment | 作者: Li, Ming-Rui, et al.
IF: 8.000 | 发表时间: 2025
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