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Caspase 3/7和DAPI凋亡双染试剂盒
Caspase 3/7 and DAPI Apoptosis Double Staining Kit
产品特点:
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
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亚科因生物推出的Caspase 3/7和DAPI凋亡双染试剂盒(Caspase 3/7 and DAPI Apoptosis Double Staining Kit,货号:KTA3028)是一款专为细胞凋亡与坏死状态同步评估设计的核心细胞分析工具。通过一次染色即可在单细胞水平同时捕获Caspase 3/7活性与核完整性信息,帮助研究者快速区分早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞。
Caspase 3/7是细胞凋亡执行阶段的关键效应蛋白酶,其活性升高被视为凋亡启动的重要标志。本试剂盒中的Caspase 3/7 Green以DEVD序列偶联高亲和力DNA荧光染料,本身无荧光且带负电荷,无法与DNA结合;当细胞进入凋亡程序,活化的Caspase 3/7会切割底物,释放出可穿透核膜的绿色荧光染料(Ex/Em 488 nm/525 nm,FITC通道检测),从而标记凋亡细胞。
与此同时,DAPI作为经典的蓝色核染料,仅在细胞膜完整性丧失的晚期凋亡或坏死细胞中进入胞核,与双链DNA结合后产生蓝色荧光(Ex/Em 358 nm/461 nm)。两种染料光谱分离良好,可在同一视野下实现凋亡活性与核损伤的双通道共定位。
适用于贴壁或悬浮细胞的凋亡机制研究、药物毒性评价、肿瘤治疗响应监测及细胞质量控制等场景,可广泛应用于肿瘤学、免疫学、神经科学及药物开发等细胞水平实验。
                                    | 中文名称 | Caspase 3/7和DAPI凋亡双染试剂盒 | 
| 英文名称 | Caspase 3/7 and DAPI Apoptosis Double Staining Kit | 
| 产品货号 | KTA3028 | 
| 样本类型 | 细胞 | 
| 试剂盒组分 | • Caspase 3/7 Green • DAPI  | 
                                        
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于-20°C,有效期为12个月。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
| 自备资源类型 | 资源名称 | 备注 | 
|---|---|---|
| 仪器 | 流式细胞仪/荧光显微镜 | 流式中 DAPI需要 405激光器激发检测 | 
| 耗材 | 24孔细胞板 | 荧光显微镜检测 | 
| 试剂 | 磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4) | 清洗和染色 | 
| 其他 | 离心机、移液枪 | 
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存要求 | 
|---|---|---|
| Caspase 3/7 Green | 20 µL (20 T) 100 µL (100 T)  |     -20℃,避光保存 | 
| DAPI | 50 µL (20 T) 250 µL (100 T)  |     -20℃,避光保存 | 
 本产品仅供科学研究使用,不适用于临床诊断。
| 试剂名称 | 试剂准备 | 注意事项 | 
|---|---|---|
| Caspase 3/7 Green | 即用型 | 避光保存;稀释后不可保存 | 
| DAPI | 即用型 | 避光保存;稀释后不可保存 | 
实验设计
选择合适的方法诱导细胞凋亡,同时设置无诱导的对照组。流式检测时非常推荐做阳性单染管及阴性对照,检测时调整合适电压,对后期分群非常有帮助。
1. 流式细胞仪分析
注意:贴壁细胞使用胰酶消化后离心收集细胞,如果消化时间过长,易造成细胞膜结构损伤而出现细胞坏死的假阳性,所以需控制胰酶消化时间(推荐使用温和消化液)。
注意:DAPI的用量可以根据检测仪器进行调整,同时非常推荐做阳性单染管。
2. 荧光显微镜分析
A. 对于悬浮细胞:
B. 对于贴壁细胞,按照以下操作步骤(以 24孔板为例):
注意:荧光显微镜拍照时绿色荧光容易猝灭,推荐染色时染料浓度较高按 1:200稀释,另拍照时先用白光找到视野后再用荧光立即拍照保存。
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