Annexin V-AbFluor™ 647 细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)

Name: Annexin V-AbFluor™ 647 细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)
Brand: Abbkine
SKU: KTA0004
Price: 1269 CNY
Availability: InStock

Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection kit (Red Fluorescence)

产品货号

KTA0004

产品特点：

AbFluor™ 647荧光基团较Alexa Fluor 647/Cy5/DyLight™ 649具有更高亮度与光稳定性，适合长时间成像

双通道检测设计，兼容流式细胞术（488 nm激发）与荧光显微镜，无需更换滤光片组

即用型5×结合缓冲液与预稀释染料，减少操作误差，30分钟内完成样本标记

选择规格

50 T

¥1269

现货（次日发货）

100 T

¥2116

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

Annexin V-AbFluor™ 647 细胞凋亡检测试剂盒（红色荧光）是一款基于Annexin V与磷脂酰丝氨酸（PS）高亲和力结合原理，通过流式细胞术或荧光显微镜快速区分早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞的即用型试剂盒。其采用专利AbFluor™ 647红色荧光标记，搭配核酸染料PI，可在单管反应中完成多阶段细胞死亡状态的精准识别。

背景与检测原理

细胞凋亡（apoptosis）是多细胞生物维持稳态的关键程序性死亡过程。在凋亡早期，细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）外翻至膜外侧，成为可被Annexin V特异性识别的“死亡信号”。Annexin V-AbFluor™ 647通过钙离子依赖性结合暴露的PS，发出Ex/Em = 650/665 nm的稳定红色荧光；而核酸染料PI（Ex/Em = 535/617 nm）仅能穿透膜完整性受损的中晚期凋亡或坏死细胞，标记细胞核。两者联用可清晰区分：

Annexin V⁻/PI⁻：活细胞
Annexin V⁺/PI⁻：早期凋亡细胞
Annexin V⁺/PI⁺：晚期凋亡/坏死细胞

应用领域：适用于药物筛选、肿瘤研究、免疫治疗评估等场景，可检测悬浮或贴壁细胞的凋亡状态，兼容原代细胞与细胞系样本。

产品参数

中文名称	Annexin V-AbFluor™ 647 细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)
英文名称	Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection kit (Red Fluorescence)
产品货号	KTA0004
试剂盒组分	• Annexin V 结合缓冲液(5x) • Annexin V- AbFluor™ 647 • Propidium Iodide (PI)
保存建议	从发货之日起，4°C可稳定保存6个月。请避光保存，避免冰冻。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

离心机
移液器及吸头
去离子水
载玻片
荧光显微镜或流式细胞仪
96孔板（细胞培养用）

试剂盒组分

组分	规格	储存条件
Annexin V Binding Buffer (5×)	5 mL (50 T) / 10 mL (100 T)	4℃
Annexin V-AbFluor™ 647	250 μL (50 T) / 500 μL (100 T)	4℃避光保存
Propidium Iodide (PI)	100 μL (50 T) / 200 μL (100 T)	4℃避光保存

试剂准备

Annexin V Binding Buffer (5×)：用去离子水把5×稀释成1×。
Annexin V-AbFlour™ 647：即用型；使用前，平衡到室温。
Propidium Iodide (PI)：即用型；使用前，平衡到室温。

实验步骤

A. 流式细胞仪分析

通过所需方法诱导细胞凋亡，同时培养无诱导的对照培养物。

4℃，300 g离心5 min收集1-2×10⁵细胞，用冰预冷的PBS洗涤两次。

注意：贴壁细胞使用胰酶消化后离心收集细胞，消化时间如果过长，易造成细胞膜结构损伤而出现细胞坏死的假阳性，所以需控制胰酶消化时间。

用100 μL 1× Annexin V Binding Buffer重悬细胞。

每100 μL细胞悬液中加入4-5 μL Annexin V-AbFlour™ 647和1-2 μL PI，轻柔混匀。

室温避光孵育15 min。

孵育结束后加入400 μL 1× Annexin V Binding Buffer，轻柔混匀后置于冰上。染色后30 min内通过流式细胞仪分析细胞。使用650 nm和535 nm激发，665 nm和617 nm附近测量荧光。

B. 荧光显微镜分析

对于悬浮细胞：

(1) 按照步骤A.1到步骤A.6的流式细胞分析步骤。
(2) 将步骤A.6的细胞悬浮置于玻片上，用盖玻片盖住细胞。尽快使用适当的滤镜通过荧光显微镜分析细胞。

对于贴壁细胞，按照以下操作步骤：

(1) 细胞接种于爬片或腔室载玻片上，培养细胞。
(2) 通过所需方法诱导细胞凋亡，同时培养无诱导的对照培养物。
(3) 除去培养基，用PBS洗涤细胞两次。
(4) 准备工作液：每100 μL 1× Annexin V Binding Buffer添加4-5 μL Annexin V-AbFlour™ 647和1-2 μL PI，轻柔混匀。

注意：最佳浓度可根据具体实验要求确定。

(5) 在细胞中加入适量的工作液（确保工作液完全覆盖细胞），室温避光孵育15-30 min（可以在冰上孵育，以减缓凋亡过程，但孵育时间需延长到至少30 min）。
(6) 用1× Annexin V Binding Buffer洗涤细胞两次。

注意：此步不要使用PBS洗涤细胞。

(7) 载玻片上添加一滴1× Annexin V Binding Buffer，然后将细胞爬片置于在载玻片上。对于细胞腔室载玻片上的细胞，添加足够的1× Annexin V Binding Buffer覆盖细胞。

注意：也可使用抗荧光淬灭封片剂封片。

(8) 使用适当的滤光片在荧光显微镜下分析细胞。

常见问题

Q: 该试剂盒是标记细胞凋亡哪个时期的试剂盒？

A: 标记细胞凋亡早期。

文献引用

Protective mechanism of Prim-O-glucosylcimifugin in the treatment of osteoarthritis: Based on lncRNA XIST regulation of Nav1. 7.

杂志名称: Biomedicine & Pharmacotherapy | 作者: Fu, Changlong, et al.

IF: 7 | 发表时间: 2024

PA1b-like peptides alleviate mitochondrial dysfunction induced by glucose toxicity through interaction with VDAC1 in β-cells.

杂志名称: Food & Function | 作者: Huang, Huizhong, et al.

IF: 5.400 | 发表时间: 2025

Neferine attenuates hypertensive cardiomyocyte apoptosis and modulates key signaling pathways: An in vivo and in vitro study.

杂志名称: European Journal of Pharmacology | 作者: Guo, Zhi, et al.

IF: 4.700 | 发表时间: 2025

Gastrodin Alleviates Angiotensin II-Induced Hypertension and Myocardial Apoptosis via Inhibition of the PRDX2/p53 Pathway In Vivo and In Vitro.

杂志名称: Pharmaceuticals | 作者: Xu, Nanhui, et al.

IF: 4 | 发表时间: 2024

CYP2J2-derived epoxyeicosatrienoic acids protect against doxorubicin-induced cardiotoxicity by reducing oxidative stress and apoptosis via activation of the AMPK pathway.

杂志名称: Heliyon | 作者: Zhu, Chuanmeng, et al.

IF: 3 | 发表时间: 2024

Gastrodin alleviates angiotensin Ⅱ-induced hypertension and myocardial apoptosis and PRDX2/p53 pathway activation.

杂志名称: ESS Open Archive eprints | 作者: Xu, Nanhui, et al.

IF: 3 | 发表时间: 2024

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