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麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)-PurKine™

PurKine™ MBP-Tag Protein Purification Kit (Dextrin)

产品货号
KTP2020

产品特点:

  • 高载量:每毫升树脂可结合≥20 mg MBP标签融合蛋白,满足大规模制备需求。
  • 温和洗脱:麦芽糖竞争洗脱,保留蛋白天然构象与活性。
  • 经济耐用:同一树脂可重复使用≥5次,性能稳定。
  • 灵活可选:提供树脂填料、预装柱及完整试剂盒三种形式,适配不同实验规模。
  • 即用型缓冲液:试剂盒内附10×结合/洗涤及洗脱缓冲液,无需额外配制。
  • 选择规格

    1 mL
    ¥998
    现货(当天发货)
    1 mL×5
    ¥2478
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    PurKine™ 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)是一套专为MBP标签融合蛋白设计的亲和纯化解决方案,可在温和生理条件下,通过糊精亲和层析快速捕获并洗脱目标蛋白,广泛适用于从细菌、酵母或哺乳动物细胞裂解液中制备高纯度、高活性的重组蛋白。

    麦芽糖结合蛋白(MBP)作为亲和标签,可显著提升目标蛋白的表达水平与溶解度,并协助其正确折叠,尤其对易形成包涵体的重组蛋白尤为有效。MBP标签与糊精树脂的亲和力高,纯化过程在生理pH与温和离子强度下进行;洗脱时仅需加入麦芽糖即可竞争性释放目标蛋白,避免极端pH或变性剂对蛋白活性的损伤。

    应用领域

    适用于蛋白纯化细胞器提取与染色等研究场景,特别适合需要保持蛋白活性及正确折叠的结构生物学、功能酶学、蛋白-蛋白相互作用等实验。

    麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)-PurKine™

    产品参数

    中文名称 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)-PurKine™
    英文名称 PurKine™ MBP-Tag Protein Purification Kit (Dextrin)
    产品货号 KTP2020
    标签 麦芽糖结合蛋白
    试剂盒组分 • PurKine™ 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化预装柱
    • 结合与洗涤缓冲液(10X)
    • 洗脱缓冲液(10x)
    保存建议 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:可在Binding buffer和Elution buffer中添加1 mM DTT或10mM β-巯基乙醇。

    蛋白纯化流程

    1. 固定重力柱,去掉上端塞和下端塞,流干保护液。
    2. 向柱中加入2倍柱体积Binding buffer。平衡树脂,流干后,再重复2次。
    3. 将处理好的蛋白提取物样本(蛋白提取物与等体积的Binding buffer混合制备样本)加入树脂中孵育。注意收集流穿液,可通过SDS-PAGE分析。
    4. 注意:为了最大限度结合,样本可在4℃或室温与树脂孵育30 min,注意不要超过树脂的载量。

    5. 向柱中加入6倍柱体积Wash Buffer,去除非特异性吸附蛋白。注意收集洗杂液用于SDS-PAGE检测分析,重复2次。
    6. 向柱中加入5-10倍柱体积的Elution Buffer洗脱蛋白,或直至流出物OD280 nm稳定,分段收集,每个柱体积收集一管,分别检测。
    7. 通过SDS-PAGE、Western blotting检测和鉴定含有目标蛋白的组分。通过紫外分光光度计,或OD280 nm检测。

    柱子保存

    用2倍柱体积的Binding buffer和2倍柱体积的去离子水依次清洗柱子,重复2次。然后加入2倍柱体积的20%乙醇,重复1次。加入等体积含20%乙醇的PBS作为储存液,4℃保存,防止树脂被细菌污染。

    在位清洗

    一般情况下,树脂至少可以使用5次。当细胞碎片和非特异性蛋白的聚集,并且在洗涤步骤中无法完全去除。如果该柱需要再次使用,应将这些污染物从柱上清除。通过在位清洗清除和防止污染物的逐步累积。

    1. 向柱中添加3倍柱体积的去离子水。
    2. 向柱中添加3倍柱体积的0.1% SDS或0.5 M NaOH溶液。
    3. 向柱中添加3倍柱体积的去离子水,添加树脂等体积的含20%乙醇的PBS保护液,4℃保存。

    常见问题

    问题原因推荐解决方案
    柱子反压过高柱子被堵塞在位清洗,增加样本离心速度或过滤样本
    无目的蛋白蛋白表达量低通过检测提取液、流穿、洗脱部分和离心颗粒中的蛋白表达量,检查蛋白表达水平。或者应用更大的样本容量。
    蛋白较少目的蛋白降解4℃含有蛋白酶抑制剂的条件下纯化
    样品或缓冲液中存在大量淀粉酶-培养基中加入葡萄糖抑制淀粉酶的表达

    常见问题

    Q: 纯化试剂盒纯化之后出现低分子量杂带在Input样本中不存在,可能是什么原因?应如何避免?

    A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 预装柱填料中是否含内毒素?

    A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。

    Q: 纯化之后的样本中如果存在少量低分子量杂带,是什么原因?应如何解决?

    A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。

    文献引用

    Elite haplotype of STRONG1 enhances rice yield by improving lodging resistance, panicle and plant architecture.

    杂志名称: Nature Communications | 作者: Zhao, Yong, et al.

    IF: 15.700 | 发表时间: 2025

    GmAKT1‐mediated K+ absorption positively modulates soybean salt tolerance by GmCBL9‐GmCIPK6 complex.

    杂志名称: Plant Biotechnology Journal | 作者: Feng, Chen, et al.

    IF: 10.500 | 发表时间: 2025

    The MYB61–STRONG2 module regulates culm diameter and lodging resistance in rice.

    杂志名称: Journal of Integrative Plant Biology | 作者: Zhao, Yong, et al.

    IF: 9.300 | 发表时间: 2025

    The dynamic TaRACK1B-TaSGT1-TaHSP90 complex modulates NLR-protein-mediated antiviral immunity in wheat.

    杂志名称: Cell reports | 作者: Hu, Haichao, et al.

    IF: 8 | 发表时间: 2024

    Integrated Full-Length Transcriptomics and Metabolomics Reveal Glycosyltransferase Involved in the Biosynthesis of Flavonol Glycosides in Laportea bulbifera.

    杂志名称: Journal of Agricultural and Food Chemistry | 作者: Wang, Wenting, et al.

    IF: 6 | 发表时间: 2024

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