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麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)-PurKine™
PurKine™ MBP-Tag Protein Purification Kit (Dextrin)
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
                                
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PurKine™ 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)是一套专为MBP标签融合蛋白设计的亲和纯化解决方案,可在温和生理条件下,通过糊精亲和层析快速捕获并洗脱目标蛋白,广泛适用于从细菌、酵母或哺乳动物细胞裂解液中制备高纯度、高活性的重组蛋白。
麦芽糖结合蛋白(MBP)作为亲和标签,可显著提升目标蛋白的表达水平与溶解度,并协助其正确折叠,尤其对易形成包涵体的重组蛋白尤为有效。MBP标签与糊精树脂的亲和力高,纯化过程在生理pH与温和离子强度下进行;洗脱时仅需加入麦芽糖即可竞争性释放目标蛋白,避免极端pH或变性剂对蛋白活性的损伤。
适用于蛋白纯化、细胞器提取与染色等研究场景,特别适合需要保持蛋白活性及正确折叠的结构生物学、功能酶学、蛋白-蛋白相互作用等实验。
                                    | 中文名称 | 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化试剂盒(糊精)-PurKine™ | 
| 英文名称 | PurKine™ MBP-Tag Protein Purification Kit (Dextrin) | 
| 产品货号 | KTP2020 | 
| 标签 | 麦芽糖结合蛋白 | 
| 试剂盒组分 | • PurKine™ 麦芽糖结合蛋白标签蛋白纯化预装柱 • 结合与洗涤缓冲液(10X) • 洗脱缓冲液(10x)  | 
                                        
| 保存建议 | 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
注意:可在Binding buffer和Elution buffer中添加1 mM DTT或10mM β-巯基乙醇。
注意:为了最大限度结合,样本可在4℃或室温与树脂孵育30 min,注意不要超过树脂的载量。
用2倍柱体积的Binding buffer和2倍柱体积的去离子水依次清洗柱子,重复2次。然后加入2倍柱体积的20%乙醇,重复1次。加入等体积含20%乙醇的PBS作为储存液,4℃保存,防止树脂被细菌污染。
一般情况下,树脂至少可以使用5次。当细胞碎片和非特异性蛋白的聚集,并且在洗涤步骤中无法完全去除。如果该柱需要再次使用,应将这些污染物从柱上清除。通过在位清洗清除和防止污染物的逐步累积。
| 问题 | 原因 | 推荐解决方案 | 
|---|---|---|
| 柱子反压过高 | 柱子被堵塞 | 在位清洗,增加样本离心速度或过滤样本 | 
| 无目的蛋白 | 蛋白表达量低 | 通过检测提取液、流穿、洗脱部分和离心颗粒中的蛋白表达量,检查蛋白表达水平。或者应用更大的样本容量。 | 
| 蛋白较少 | 目的蛋白降解 | 4℃含有蛋白酶抑制剂的条件下纯化 | 
| 样品或缓冲液中存在大量淀粉酶 | - | 培养基中加入葡萄糖抑制淀粉酶的表达 | 
A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。
A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。
杂志名称: Nature Communications | 作者: Zhao, Yong, et al.
IF: 15.700 | 发表时间: 2025
杂志名称: Plant Biotechnology Journal | 作者: Feng, Chen, et al.
IF: 10.500 | 发表时间: 2025
杂志名称: Journal of Integrative Plant Biology | 作者: Zhao, Yong, et al.
IF: 9.300 | 发表时间: 2025
杂志名称: Cell reports | 作者: Hu, Haichao, et al.
IF: 8 | 发表时间: 2024
杂志名称: Journal of Agricultural and Food Chemistry | 作者: Wang, Wenting, et al.
IF: 6 | 发表时间: 2024
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