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内毒素清除试剂盒(多粘菌素B)-PurKine™
PurKine™ Endotoxin Removal Kit (Polymyxin B)
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
                                
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PurKine™ 内毒素清除试剂盒(多粘菌素B)是一种以多粘菌素B为配基的亲和层析体系,专为去除蛋白样品中的细菌内毒素而设计。该试剂盒通过预装柱形式,可在温和条件下快速、高效地清除重组蛋白、抗体、疫苗等生物制品中的脂多糖(LPS),为下游细胞实验、动物注射或临床前研究提供低内毒素水平的样品。
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,即使极微量(pg级)也能引发强烈的免疫反应,干扰细胞实验结果或引起动物发热、休克等副作用。PurKine™ 内毒素清除试剂盒(多粘菌素B)利用多粘菌素B对脂多糖脂质A结构的高亲和力,在生理盐条件下即可特异性捕获LPS,同时保持目标蛋白的天然构象与活性。试剂盒配套的再生与平衡缓冲液可快速完成树脂再生,确保实验流程连贯、省时。
应用领域:重组蛋白、抗体、疫苗、细胞因子等生物制品的内毒素去除;细胞培养上清、血清、腹水等复杂样品的预处理;动物体内注射或体外细胞实验前的样品纯化。
                                    | 中文名称 | 内毒素清除试剂盒(多粘菌素B)-PurKine™ | 
| 英文名称 | PurKine™ Endotoxin Removal Kit (Polymyxin B) | 
| 产品货号 | KTP2140 | 
| 试剂盒组分 | • PurKine™ 内毒素清除-多粘菌素B预装柱 • 再生缓冲液(10X) • 平衡缓冲液(10x)  | 
                                        
| 保存建议 | 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
样品需经过离心或 0.22 μm或 0.45 μm滤膜过滤,以防止堵塞重力柱。样本 pH最好控制在 pH 7-8,因为内毒素结合至柱子的最佳 pH为 6-9。样本最好控制适当的离子强度,减少非特异性吸附,如 0.15-0.5 M的 NaCl。
所有用水,缓冲液及耗材均需无热源产品,防止在使用过程中引入内毒素。
Equilibration Buffer:临用前用无热源水将 Equilibration Buffer (10×) 稀释 10倍得到 Equilibration Buffer,4℃保存。
Regeneration Buffer:临用前用无热源水将 Regeneration Buffer (10×) 稀释 10倍得到 Regeneration Buffer,4℃保存。
注意:Equilibration Buffer可依据样本性质进行改变,建议 pH 7-8,NaCl约 150-500 mM。
注意:第一次使用前和每次使用后,请将填料再生处理。实验前,将所有溶液和树脂平衡至室温。
使用 5倍柱体积的 Equilibration Buffer 清洗重力柱。 清洗结束后,加入 1 倍柱体积的 Regeneration Buffer,2-8℃保存,避免冷冻。
| 问题 | 原因 | 推荐解决方案 | 
|---|---|---|
| 内毒素去除效率低 | 样品 pH值不在内毒素结合范围内 | 调节样品 pH 在 7-8的范围内 | 
| 内毒素去除效率低 | 样品与填料接触时间短 | 降低流速,增加样品接触时间 | 
| 内毒素去除效率低 | 去除或检测系统被内毒素污染 | 所有实验用品均需无热源产品 | 
| 内毒素去除效率低 | 内毒素与目的蛋白结合较强 | 增加样品在重力柱上操作次数 | 
| 内毒素去除效率低 | 样品被污染 | 填料纯化过其他样品 不要用使用过的填料去除不同样品的内毒素 | 
| 样品回收率低 | 样品非特异性吸附在填料上 | 增加样品中 NaCl的浓度至 500 mM | 
| 样品回收率低 | 目的蛋白与内毒素结合,一起被去除 | - | 
A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。
A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。
杂志名称: Marine Drugs | 作者: Liu, Peng, et al.
IF: 5 | 发表时间: 2024
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