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谷胱甘肽S转移酶标签蛋白纯化试剂盒(谷胱甘肽)-PurKine™

PurKine™ GST-Tag Protein Purification Kit (Glutathione)

产品货号
KTP2010

产品特点:

  • 高载量:每毫升树脂可结合超过20 mg GST-标签融合蛋白,满足毫克级制备需求。
  • 温和洗脱:非变性洗脱条件,最大限度保留蛋白活性与结构完整性。
  • 经济耐用:同一树脂可重复使用5次以上,性能无明显衰减,降低单次实验成本。
  • 灵活配置:提供树脂填料、预装柱及完整试剂盒三种形式,适配不同规模实验。
  • 即用型缓冲液:试剂盒内含预先配制的结合、洗涤及洗脱缓冲液,简化操作流程。
  • 选择规格

    1 mL
    ¥998
    期货(5天内发货)
    1 mL×5
    ¥2478
    期货(5天内发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    PurKine™ 谷胱甘肽S转移酶标签蛋白纯化试剂盒(谷胱甘肽)是一套专为GST-标签融合蛋白设计的完整纯化解决方案,通过谷胱甘肽亲和层析原理,可在温和条件下快速捕获并纯化来自大肠杆菌或其他表达系统的目标蛋白,为下游功能研究、结构解析及抗体制备提供高纯度样品。

    谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因融合系统是目前最常用的重组蛋白表达与纯化平台之一。GST标签(约26 kDa)不仅能提高目标蛋白的可溶性及稳定性,还可与固定化谷胱甘肽树脂发生高特异性、可逆性结合。PurKine™ GST-Tag Protein Purification Kit 利用这一特性,在生理pH及温和离子强度下实现高选择性结合;随后通过还原型谷胱甘肽竞争性洗脱,即可获得高纯度、保持天然构象的GST-标签蛋白。整个流程无需变性剂,有效保护蛋白的抗原性和功能活性。

    应用领域

    广泛适用于蛋白纯化、蛋白-蛋白/蛋白-配体相互作用研究、抗体生产、酶学分析、结构生物学等方向,特别适合从大肠杆菌裂解液中快速获取高纯度GST-标签重组蛋白。

    谷胱甘肽S转移酶标签蛋白纯化试剂盒(谷胱甘肽)-PurKine™

    产品参数

    中文名称 谷胱甘肽S转移酶标签蛋白纯化试剂盒(谷胱甘肽)-PurKine™
    英文名称 PurKine™ GST-Tag Protein Purification Kit (Glutathione)
    产品货号 KTP2010
    标签 谷胱甘肽S转移酶
    试剂盒组分 • PurKine™ 谷胱甘肽S转移酶标签蛋白纯化预装柱
    • 结合与洗涤缓冲液(10X)
    • 洗脱缓冲液(10x)
    保存建议 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    试剂准备

    建议在使用之前通过 或 滤膜过滤所有缓冲液。对于大多数蛋白质,建议使用以下缓冲液0.22 μm 0.45 μm :

    注意:可在 , 中添加 ,以增加目的蛋白纯度。然而,这可能会导致目的蛋白的Binding/Wash buffer Elution buffer 1-10 mMDTT

    产量降低。

    蛋白纯化流程

    1. 固定重力柱,去掉上端塞和下端塞,流干保护液。
    2. 5 mL Binding/Wash Buffer 2 15 mL Binding/Wash Buffer向柱中加入 。平衡树脂,流干后,再重复 次,共使用 。
    3. SDS-PAGE将处理好的蛋白提取物样本加入树脂中孵育。注意收集流穿液,可通过 分析。出现问题时,更容易找到解决办法。
    4. 5 mLBinding/Wash Buffer向柱中加入 ,去除非特异性吸附蛋白。注意收集洗杂液。流干后重复 次,共使用5 30 mL Binding/Wash
    5. Buffer。
    6. 15-30 mLElution Buffer向柱中加入 洗脱蛋白,分段收集,每 收集一管,分别检测(既可以保证所有结合的目的蛋白倍洗5 mL
    7. 脱,又可以得到高纯度和高浓度的蛋白)。
    8. 5 mL Binding/Wash Buffer 5 mL 2 5 mL 20%依次向柱中加入 和 去离子水交替平衡树脂,重复 次,最后再使用 乙醇平衡树脂,
    9. 重复 次,然后保存于含 乙醇的 中,置于 ,防止树脂被细菌污染。1 20% PBS 2-8℃
    10. SDS-PAGE通过 分析各组分样本,检测纯化效果。

    在位清洗

    GST树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时需要对树脂

    进行清洗。

    去除一些沉淀或变性物质:

    用 倍柱体积的 盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用 倍柱体积的 的 清洗。2 6 M 5 pH 7.4 PBS

    去除一些疏水性吸附造成的非特异性修物质:

    用 倍柱体积的 乙醇或 倍柱体积的 清洗,然后立即用 倍柱体积的 的 清洗。3-4 70% 2 1% Triton X-100 5 pH 7.4 PBS

    常见问题

    Q: 纯化试剂盒纯化之后出现低分子量杂带在Input样本中不存在,可能是什么原因?应如何避免?

    A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 预装柱填料中是否含内毒素?

    A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。

    Q: 纯化之后的样本中如果存在少量低分子量杂带,是什么原因?应如何解决?

    A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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