×

生物素标签蛋白纯化试剂盒(链霉亲和素)-PurKine™

PurKine™ Biotin-Tag Protein Purification Kit (Streptavidin)

产品货号
KTP2030

产品特点:

  • 高载量:每毫升树脂可结合≥6 mg生物素化蛋白,或≥120 nmol生物素基团。
  • 低背景:链霉亲和素pI≈5且无糖基化,非特异性吸附极低。
  • 可重复使用:同一柱材经再生后可重复使用≥5次,性能无明显衰减。
  • 灵活配置:提供散装填料、预装柱及完整试剂盒三种规格,适配不同规模实验。
  • 即用缓冲:试剂盒内含10×结合/洗涤缓冲液与10×洗脱缓冲液,开盒即用。
  • 高流速耐受:高度交联基质可承受500 cm/h线性流速,兼容FPLC系统。
  • 选择规格

    1 mL
    ¥1916
    期货(5天内发货)
    1 mL×5
    ¥4758
    期货(5天内发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    PurKine™ 生物素标签蛋白纯化试剂盒(链霉亲和素)是一套基于链霉亲和素-生物素高亲和力系统的即用型纯化方案,可在温和条件下快速捕获并洗脱带生物素标签的重组蛋白、抗体或多肽,广泛服务于细胞器提取、蛋白互作研究及下游功能分析。

    生物素-链霉亲和素(streptavidin)是目前已知亲和力最高的非共价相互作用之一(Kd≈10⁻¹⁵ M)。链霉亲和素四聚体可特异性结合四个生物素分子,形成稳定复合物;在生理缓冲液中几乎不受pH、温度或变性剂影响。PurKine™ 将高度交联的6%琼脂糖微球与链霉亲和素共价偶联,制成预装柱,可在重力流或低压层析系统中实现对生物素化蛋白的一步式捕获。结合-洗涤-洗脱三步流程即可将目标蛋白从复杂裂解液中分离出来,全程不超过30 min。

    应用领域

    适用于细胞器提取与染色、蛋白-蛋白/蛋白-核酸相互作用研究、抗体或酶定向固定、生物素化探针富集、重组蛋白一步纯化等场景,可处理细菌、酵母、哺乳动物细胞及组织裂解液等多种样本类型。

    生物素标签蛋白纯化试剂盒(链霉亲和素)-PurKine™

    产品参数

    中文名称 生物素标签蛋白纯化试剂盒(链霉亲和素)-PurKine™
    英文名称 PurKine™ Biotin-Tag Protein Purification Kit (Streptavidin)
    产品货号 KTP2030
    标签 生物素
    试剂盒组分 • PurKine™ 生物素标签-链霉亲和素预装柱 6FF
    • 结合与洗涤缓冲液(10X)
    • 洗脱缓冲液(10x)
    保存建议 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 0.22 μm 0.45 μm或 过滤器
    • 可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水
    • 各种制备试剂和缓冲溶液的玻璃器皿

    样本制备

    样品需经过离心或 或 滤膜过滤,以防止堵塞重力柱。如果样品太粘,用 稀释以防止堵塞重力柱。0.22 μm 0.45 μm Binding Buffer

    避免使用蛋白酶抑制剂或其他含有螯合剂(如 EDTA DTT β-)或强还原剂(如 或 巯基乙醇)的添加剂,这些会破坏树脂。注意不

    要超过树脂的载量。

    试剂准备

    用于缓冲液制备的水和化学品需要高纯度。缓冲液在使用前用 或 滤膜过滤。0.22 μm 0.45 μm

    1×Binding/Wash Buffer:使用前配制,Binding/Wash Buffer (10×) 1×Binding/Wash Buffer用去离子水稀释成 ,充分混匀待用。4℃

    保存。

    实验步骤

    1. 固定重力柱。去掉顶部和底部塞子,让储存缓冲液流走。
    2. 2 1×Binding Buffer 3向柱中加入 倍柱体积的 。平衡重力柱,并排出结合缓冲液。重复此步骤 遍。
    3. 将制备好的样品(通过将蛋白质提取物与等量的 混合制备样品)加入柱中,注意收集流穿液,可通过1×Binding Buffer SDS-PAGE
    4. 分析。
    5. 注意:为了最大程度地结合,样品可以在室温或 4℃ 下孵育 。小心不要超过树脂的载量。30 min
    6. 2 1×Wash Buffer SDS-PAGE 6向柱中加入 倍柱体积的 以去除非特异性吸附蛋白。收集可通过 分析的洗涤液。重复此步骤 次。
    7. 5-10 1×Elution Buffer 280 nm向柱中加入 倍柱体积的 洗涤目的蛋白,或直至流出液在 处的吸光度稳定。收集洗涤液,分别检
    8. 测分析各管内的蛋白。
    9. SDS-PAGE Western blotting检查和鉴定含有目标蛋白的组分。通过紫外分光光度计, 或 。

    重力柱的保存

    依次使用 倍柱体积的 和 倍的去离子水平衡重力柱,重复 次。 然后加入 倍柱体积的 乙醇,重复 次。2 Binding Buffer 2 2 2 20% 1

    加入等体积的含有含 乙醇的 作为储存缓冲液,将重力柱储存在20% PBS 4℃以防止细菌污染。

    常见问题

    Q: 纯化试剂盒纯化之后出现低分子量杂带在Input样本中不存在,可能是什么原因?应如何避免?

    A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 预装柱填料中是否含内毒素?

    A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。

    Q: 纯化之后的样本中如果存在少量低分子量杂带,是什么原因?应如何解决?

    A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

    相关资讯

    专业技术支持

    我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务

    实验方案设计

    根据您的研究目标,提供个性化的实验设计方案

    问题排查

    经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题

    在线技术咨询

    7x24小时在线技术支持,随时为您答疑解惑

    免费样品申请

    提供免费样品试用,让您先试后买更放心

    400电话
    在线咨询
    技术支持
    公众号
    公众号
    返回顶部