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麦芽糖结合蛋白标签糊精树脂-PurKine™

PurKine™ MBP-Tag Dextrin Resin

产品货号
BMR2020

产品特点:

  • 高载量:每毫升树脂可结合≥20 mg MBP标签融合蛋白,满足微克至克级纯化需求。
  • 温和洗脱:麦芽糖竞争性洗脱体系保留蛋白天然构象与活性,减少下游复性步骤。
  • 经济耐用:树脂可重复再生使用≥5次,批次间性能稳定,降低实验成本。
  • 灵活兼容:提供散装填料、预装柱及完整试剂盒三种形式,适配手动重力柱、FPLC或HPLC系统。
  • 高流速耐受:高度交联微球支持500 cm/hour线性流速,缩短纯化时间。
  • 选择规格

    5 mL
    ¥1316
    现货(次日发货)
    25 mL
    ¥4198
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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    PurKine™ 麦芽糖结合蛋白标签糊精树脂 (PurKine™ MBP-Tag Dextrin Resin) 是一款专为MBP标签融合蛋白设计的高性能亲和层析介质。它以高度交联的糊精微球为基质,通过特异性结合麦芽糖结合蛋白(MBP)实现一步式纯化,适用于细菌、酵母及哺乳动物细胞裂解液等多种样品,帮助研究者快速获得高纯度、高活性的目标蛋白。

    背景知识扩展

    麦芽糖结合蛋白(MBP)是分子生物学中广泛应用的亲和标签,不仅能显著提升重组蛋白的表达量与可溶性,还能辅助蛋白正确折叠,尤其对易形成包涵体的难溶蛋白具有独特优势。PurKine™ MBP-Tag Dextrin Resin利用MBP与糊精的特异性相互作用,在生理pH及温和洗脱条件下完成纯化,仅需加入麦芽糖即可竞争性洗脱目标蛋白,避免了极端pH或变性剂对蛋白活性的影响,为后续功能研究、晶体结构解析或药物筛选提供可靠保障。

    应用领域

    该树脂广泛应用于蛋白纯化领域,包括:
    • 重组MBP标签蛋白的快速捕获与中度纯化
    • 难溶蛋白的可溶性表达与复性研究
    • 蛋白-蛋白/蛋白-配体相互作用分析的前处理
    • 抗体片段、酶类及疫苗抗原的规模化制备

    麦芽糖结合蛋白标签糊精树脂-PurKine™

    产品参数

    中文名称 麦芽糖结合蛋白标签糊精树脂-PurKine™
    英文名称 PurKine™ MBP-Tag Dextrin Resin
    产品货号 BMR2020
    标签 麦芽糖结合蛋白
    产品形式 液体溶液,含50%的填料匀浆,溶液为:20%乙醇溶液。
    储存缓冲液 含有20%乙醇的PBS缓冲液。
    保存建议 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    实验步骤

    1. 用适量的树脂装重力柱,流干保护液。
    2. 向柱中加入2倍柱体积的Binding buffer平衡树脂,流干后,再重复2次。
    3. 将处理好的蛋白提取物样本(蛋白提取物与等体积的Binding buffer混合制备样本)加入树脂中孵育。注意收集流穿液,可通过SDS-PAGE分析。
    4. 为了最大限度结合,样本可在4℃或室温与树脂孵育30 min,注意不要超过树脂的载量。
    5. 向柱中加入2倍柱体积的Wash Buffer,去除非特异性吸附蛋白。注意收集洗杂液用于SDS-PAGE检测分析,重复6次。
    6. 向柱中加入5-10倍柱体积的Elution Buffer洗脱蛋白,或直至流出物OD280 nm稳定,分段收集,每个柱体积收集一管,分别检测。
    7. 通过SDS-PAGE、Western blotting或紫外分光光度计检测和鉴定含有目标蛋白的组分。

    柱子保存

    用2倍柱体积的Binding buffer和2倍柱体积的去离子水依次清洗平衡柱,重复2次。然后加入2倍柱体积的20%乙醇,重复2次。加入等体积含20%乙醇的PBS作为储存液,4℃保存,防止树脂被细菌污染。

    在位清洗

    一般情况下,树脂至少可以使用5次。当细胞碎片和非特异性蛋白的聚集,并且在洗涤步骤中无法完全去除。如果该柱需要再次使用,应将这些污染物从柱上清除。通过在位清洗清除和防止污染物的逐步累积。

    1. 向柱中添加3倍柱体积的去离子水。
    2. 向柱中添加3倍柱体积的0.1% SDS或0.5 M NaOH溶液。
    3. 向柱中添加3倍柱体积的去离子水,添加树脂等体积的含20%乙醇的PBS保护液,4℃保存。

    常见问题

    问题原因推荐解决方案
    柱子反压过高柱子被堵塞在位清洗,增加样本离心速度或过滤样本
    无目的蛋白蛋白表达量低通过检测提取液、流穿、洗脱部分和离心颗粒中的蛋白表达量,检查蛋白表达水平。或者应用更大的样本容量。
    蛋白较少目的蛋白降解4℃含有蛋白酶抑制剂的条件下纯化
    样品或缓冲液中存在大量淀粉酶-培养基中加入葡萄糖抑制淀粉酶的表达

    常见问题

    暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。

    文献引用

    Activation of MAPK-mediated immunity by phosphatidic acid in response to positive-strand RNA viruses

    杂志名称: Plant Communications | 作者: J Lin, J Zhao, L Du, P Wang, B Sun, C Zhang, Y Shi, H Li, H Sun

    IF: 10 | 发表时间: 2024

    Preparation of two kinds of immunocastration vaccines and their immune effects on male goats.

    杂志名称: Animal Bioscience | 作者: Pan, Fuqiang, et al.

    IF: 2 | 发表时间: 2025

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