雌二醇 ELISA定量试剂盒-EliKine™

Name: 雌二醇 ELISA定量试剂盒-EliKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTE0003
Price: 1598 CNY
Availability: InStock

EliKine™ Estradiol ELISA Kit

产品货号

KTE0003

产品特点：

竞争法设计，检测范围 40–1500 pg/ml，灵敏度低至 40 pg/ml，可覆盖生理及病理浓度区间

高特异性抗体，对雌二醇类似物无明显交叉反应，背景干扰极低

支持人、小鼠、大鼠、驴等多物种血清、血浆及其它生物液体样本，兼容性强

预包被微孔板与即用型试剂组合，实验流程简洁，节省操作时间

选择规格

48 T

¥1598

期货（4天内发货）

96 T

¥2558

期货（4天内发货）

🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

EliKine™ 雌二醇 ELISA定量试剂盒 (EliKine™ Estradiol ELISA Kit, KTE0003) 采用竞争法原理，通过预包被高亲和力抗体与HRP标记雌二醇的竞争结合，实现对血清、血浆及其它生物液体中雌二醇含量的精准测定，适用于人、小鼠、大鼠及驴等多物种样本。

雌二醇(E2) 是卵巢成熟滤泡分泌的主要天然雌激素，调控子宫内膜增殖并促进女性第二性征发育。其血清浓度随月经周期波动：排卵前期 48–521 pmol/L、排卵期 70–1835 pmol/L、排卵后期 272–793 pmol/L；低值提示卵巢功能低下、卵巢早衰或席汉氏综合征。EliKine™ 试剂盒基于竞争法，在预包被雌二醇抗体的微孔板中，样本雌二醇与HRP偶联雌二醇竞争结合抗体位点；加入HRP底物后，显色强度与样本雌二醇浓度呈反比，于450 nm读取吸光度即可定量。

应用领域：生殖内分泌研究、卵巢功能评估、动物模型雌激素水平监测、临床体外诊断辅助检测及药物干预效果评价。

产品参数

中文名称	雌二醇 ELISA定量试剂盒-EliKine™
英文名称	EliKine™ Estradiol ELISA Kit
产品货号	KTE0003
反应性	人#驴#小鼠#大鼠
检测类型	ELISA
检测方法	竞争法
样本类型	血清#血浆#其它生物液体
试剂盒组分	• Estradiol 抗体预包被微孔板 • Estradiol 标准品 • HRP偶联的estradiol • Estradiol检测抗体 • HRP底物A • HRP底物B • 反应终止液 • 洗涤缓冲液 • 封板膜.
检测范围	40 pg/ml-1000 pg/ml
灵敏度	40 pg/ml
检测指标	Estradiol
注意事项	• 试剂盒的试剂不能与其它批号的试剂或超出有效期的试剂混合使用。 • 试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡30 分钟。 • 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 • 实验中未用的板条立即放回包装中，密闭封口，4℃保存。 • 充分混匀对反应结果尤为重要，推荐使用低速频率振荡器或者每10分钟手动摇匀。 • 对于样品和标准品，建议做双孔或者三孔检测（复孔）。.
保存建议	请将未开封使用的试剂盒保存于2-8℃；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪（能测450 nm处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水

酶标仪（能测450 nm处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

试剂准备

注意：提前20 min从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。提前15 min打开酶标仪预热。

注意：

1× Wash Buffer：用去离子水将20× Wash Buffer (20×) 1:20稀释得到1× Wash Buffer，4℃保存。如果有结晶析出，轻轻加热直至完全溶解。室温保存，此溶液可稳定保存30天。
工作液的配制：临用前，根据实验检测数量，按1/10的体积取HRP Conjugated Estradiol，与Assay Buffer混合得工作液。例如：取3 mL HRP Conjugated Estradiol，加入0.3 mL Assay Buffer混合得工作液。

1× Wash Buffer：用去离子水将20× Wash Buffer (20×) 1:20稀释得到1× Wash Buffer，4℃保存。如果有结晶析出，轻轻加热直至完全溶解。室温保存，此溶液可稳定保存30天。

1× Wash Buffer：

工作液的配制：临用前，根据实验检测数量，按1/10的体积取HRP Conjugated Estradiol，与Assay Buffer混合得工作液。例如：取3 mL HRP Conjugated Estradiol，加入0.3 mL Assay Buffer混合得工作液。

工作液的配制：

样本制备

血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结30 min，然后1,000 g离心15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。
血浆：使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30 min内1,000 g离心15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结30 min，然后1,000 g离心15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

血清：

血浆：使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30 min内1,000 g离心15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

血浆：

注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在24 h内使用，则可以将其储存在2-8℃。避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

注意：

实验步骤

1. 从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。
2. 每孔加入50 μL Estradiol Standard或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。
3. 每孔加入50 μL工作液（空白孔不加），混匀，用提供的板贴盖住，37℃孵育1 h。
4. 除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的1×Wash Buffer。
5. 每孔加入50 μL HRP Substrate A和50 μL HRP Substrate B，混匀，用提供的板贴盖住。37℃避光孵育15 min，远离气流和其他温度波动。
6. 每孔加入50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与HRP Substrate相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。
7. 30 min内测定每孔450 nm处的吸光值。

1. 从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。

2. 每孔加入50 μL Estradiol Standard或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。

3. 每孔加入50 μL工作液（空白孔不加），混匀，用提供的板贴盖住，37℃孵育1 h。

4. 除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的1×Wash Buffer。

5. 每孔加入50 μL HRP Substrate A和50 μL HRP Substrate B，混匀，用提供的板贴盖住。37℃避光孵育15 min，远离气流和其他温度波动。

6. 每孔加入50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与HRP Substrate相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。

7. 30 min内测定每孔450 nm处的吸光值。

结果计算

计算每个标准品和样品的复孔平均OD值。
标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为x轴，各标准品的平均吸光度为y轴，绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。

计算每个标准品和样品的复孔平均OD值。

标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为x轴，各标准品的平均吸光度为y轴，绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

A: 血浆。

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

文献引用

β-glucan from Aureobasidium pullulans SM-2001 prevents ovariectomy (OVX)-induced osteoporosis in rats.

杂志名称: Herbal Formula Science | 作者: Kim, Jong Min, et al.

IF: 2 | 发表时间: 2024

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