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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 土壤中性木聚糖酶（S-NEX）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可在中性 pH 条件下快速测定土壤样本中中性木聚糖酶（S-NEX）的活性，为研究土壤碳循环、微生物生态功能及农业地力评价提供可靠数据。
木聚糖酶（EC 3.2.1.8）主要由细菌、真菌等微生物分泌，可催化木聚糖主链的β-1,4-糖苷键水解，生成还原性寡糖及单糖，进而参与土壤有机碳的转化与养分释放。中性木聚糖酶（NEX）多分离自最适生长 pH 6–8 的微生物，是土壤碳降解关键酶之一。本试剂盒利用 NEX 在中性缓冲体系中催化木聚糖降解，产生的还原糖在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，于540 nm处形成特征吸收峰；吸光值增加速率与酶活性成正比，从而实现对土壤 S-NEX 活力的定量分析。
适用于土壤微生物生态学、农业科学、环境科学等研究方向，可用于评估不同土地利用方式、施肥管理或气候变化对土壤中性木聚糖酶活性及碳周转效率的影响。
| 中文名称 | 土壤中性木聚糖酶(S-NEX)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Neutral Xylanase (S-NEX) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4052 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤中性木聚糖酶（S-NEX） |
| 检测指标 | 土壤中性木聚糖酶（S-NEX） |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
注意：Reagent III 有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。
Standard：临用前配制；加入 1 mL去离子水，充分溶解，即 100 μmol/mL D-木糖标准品；用不完的试剂 4℃避光保存 1个月。
10 μmol/mL D-木糖标准品：取 120 µL 100 μmol/mL D-木糖标准品加 1,080 µL去离子水配制成 10 μmol/mL D-木糖标准品；使用 10 μmol/mL D-木糖标准品，按照下表所示，进一步稀释标准品：
| 序号 | Standard体积（μL） | 去离子水体积（μL） | 浓度（μmol/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 μL of 10 μmol/mL Standard | 800 | 2 |
| Std.2 | 150 μL of 10 μmol/mL Standard | 850 | 1.5 |
| Std.3 | 120 μL of 10 μmol/mL Standard | 880 | 1.2 |
| Std.4 | 100 μL of 10 μmol/mL Standard | 900 | 1 |
| Std.5 | 80 μL of 10 μmol/mL Standard | 920 | 0.8 |
| Std.6 | 40 μL of 10 μmol/mL Standard | 960 | 0.4 |
注意：每次实验都要做一次标准品检测；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。
注意：推荐使用新鲜土壤样本。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50目筛。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 540 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 1.5 mL离心管中操作）：
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| 样本（g） | 0.02 | 0.02 | 0 | 0 |
| ReagentⅠ（μL） | 100 | 150 | 0 | 0 |
| Reagent II（μL） | 50 | 0 | 0 | 0 |
混匀，50℃水浴 2 h后，立即 90℃灭活 10 min。8,000 g，25℃离心 10 min，取上清液，下述操作在新的 1.5 mL离心管中操作：
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| 上清液（μL） | 100 | 100 | 0 | 0 |
| Standard（μL） | 0 | 0 | 100 | 0 |
| 去离子水（μL） | 0 | 0 | 0 | 100 |
| Reagent III（μL） | 100 | 100 | 100 | 100 |
3. 混匀，90℃显色 5 min，流水冷却至室温，取 180 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中，记录 540 nm处吸光值。测定管记为 A 测定，对照管记为 A 对照，标准管记为 A 标准，空白管记为 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：空白孔和标准孔只需做 1-2次，每个测定孔均需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.05可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 2 μmol/mL的ΔA 标准，上清液可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μmol/mL)。
2. S-NEX活性的计算：
酶活单位定义：50℃，pH 6.0条件下，每克土壤每小时分解木聚糖产生 1 μmol还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-NEX(U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T×F=0.075×x÷W×F
V 反总：酶促反应体积，0.15 mL；T：反应时间，2 h； W：样本质量，g；F：稀释倍数。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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