买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。
活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ α-葡萄糖苷酶活性检测试剂盒（微量法）(CheKine™ Micro α-glucosidase(α-GC) Activity Assay Kit) 是一套基于比色法的微量检测体系，可在 96 孔 UV 微孔板内快速测定动植物组织、培养细胞及血清（浆）等样本中 α-葡萄糖苷酶（α-GC）的催化活性，为糖代谢研究提供简便、可靠的定量工具。
α-葡萄糖苷酶（α-GC，EC 3.2.1.20）广泛分布于动物、植物、微生物及培养细胞中，负责水解芳基或烃基与糖基之间的 α-糖苷键并释放游离葡萄糖，其活性与细胞壁重塑、细胞识别及信号分子生成密切相关。本试剂盒利用对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG）作为底物：α-GC 催化底物裂解生成对-硝基苯酚（pNP），该产物在 400 nm 处具有最大吸收峰。通过连续监测 400 nm 吸光度的升高速率，即可定量计算样本中 α-GC 的活性水平。
细胞代谢研究、糖代谢通路分析、植物逆境生理、微生物发酵过程监控及药物筛选等细胞类实验场景。
| 中文名称 | α-葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro α-glucosidase(α-GC) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1015 |
| 检测类型 | 糖代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer •Reagent I •Reagent II •Reagent III •Standard |
| 分子 | α-GC |
| 检测指标 | α-GC |
| 注意事项 | • 需用96孔UV微孔板。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，匀浆液避免反复冻融。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于-20°C，有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent I：临用前配制；加入 12 mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂 20℃分装避光保存一个月，禁止反复冻融。
| 试剂盒组分 | 规格（96 T） | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 60×2 mL | 4℃ |
| Reagent I Powder | ×1 vial | -20℃，避光保存 |
| Reagent II | 24 mL | 4℃ |
| Reagent III | 22 mL | 4℃ |
| Standard | 1 mL | 4℃，避光保存 |
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Standard：5 μmol/mL对硝基苯酚标准液，即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
使用 5 μmol/mL对硝基苯酚标准液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（nmol/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 20 µL 5 μmol/mL Standard | 980 | 100 |
| Std.2 | 500 µL of Std.1 (100 nmol/mL) | 500 | 50 |
| Std.3 | 500 µL of Std.2 (50 nmol/mL) | 500 | 25 |
| Std.4 | 500 µL of Std.3 (25 nmol/mL) | 500 | 12.5 |
| Std.5 | 500 µL of Std.4 (12.5 nmol/mL) | 500 | 6.25 |
| Std.6 | 500 µL of Std.5 (6.25 nmol/mL) | 500 | 3.125 |
| Std.7 | 500 µL of Std.6 (3.125 nmol/mL) | 500 | 1.563 |
| Blank | 0 | 500 | 0（空白管） |
注意：1. 如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
2. 该试剂盒提取的动植物组织样本也可以适用于 KTB1322、KTB1323、KTB1324的测定。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 400 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|
| Reagent I | 120 | 0 | 0 |
| Reagent II | 150 | 150 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 120 | 0 |
| 样本上清 | 30 | 30 | 0 |
充分混匀，放入 37℃准确水浴 30 min后，立即放入 95℃水浴 5 min（盖紧，以防止水分散失），冷却后充分混匀（以保证浓度不变），8,000 g，4℃，离心 5 min，取上清液（在 1 mL微量玻璃比色皿或 96孔板中加入下列试剂）
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|
| Standard | 0 | 0 | 70 |
| 上清液 | 70 | 70 | 0 |
| Reagent III | 130 | 130 | 130 |
3. 充分混匀，室温静置 2 min后，于 400 nm处测定吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 标准，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (nmol/mL)。
2. α-GC活性的计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟产生 1 nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活性单位。
α-GC (U/mg prot)=(x×V 反总)÷(V 样×Cpr)÷T=x÷Cpr÷3
单位的定义：每 g组织每分钟产生 1 nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活性单位。
α-GC (U/g 鲜重)=(x×V 反总)÷(W×V 样÷V 样总)÷T=x÷W÷3
单位的定义：每 104个细胞每分钟产生 1 nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活性单位。
α-GC (U/104 cell)=(x×V 反总)÷(500×V 样÷V 样总)÷T=x÷500÷3
单位的定义：每mL液体样本每分钟产生 1 nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活性单位。
α-GC (U/mL)=(x×V 反总)÷(V 样÷V 样总)÷T=x÷3
V 反总：反应体系总体积，0.3 mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.03 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞总数，5×106；T：反应时间，30 min。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
货号：KTB1610
CheKine™ 氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可快速、准确地定量血清、血浆...
货号：KTB1600
CheKine™ 还原型谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可在 96 孔板内快速定量血清、血...
货号：KTB1010
亚科因生物研发的CheKine™ 辅酶Ⅱ NADP(H) 含量检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro Coenzyme Ⅱ NADP(H) Assay...
我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务
根据您的研究目标，提供个性化的实验设计方案
经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题
7x24小时在线技术支持，随时为您答疑解惑
提供免费样品试用，让您先试后买更放心
