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土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Polyphenoloxidase (S-PPO) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具,可在微量体系内快速测定土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性,为土壤微生物代谢、有机质循环及环境修复研究提供可靠数据。
土壤多酚氧化酶(S-PPO)主要由土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,是芳香族化合物循环的关键限速酶。该酶催化邻苯三酚等酚类底物氧化生成有色醌类物质,后者在 430 nm 处具有特征吸收峰。CheKine™ 试剂盒利用这一显色反应,通过 430 nm 吸光度变化定量反映 S-PPO 活性,适用于新鲜或低温保存的土壤样本,为土壤环境修复与碳循环研究提供简便、快速的检测手段。
土壤微生物生态学、土壤有机质循环机制研究、污染土壤生物修复效果评估、农林地力监测及环境科学教学实验。
| 中文名称 | 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Polyphenoloxidase (S-PPO) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4029 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Standard |
| 分子 | 土壤多酚氧化酶(S-PPO) |
| 检测指标 | 土壤多酚氧化酶(S-PPO) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
ReagentⅠ:临用前配制,取一瓶 ReagentⅠ加入 9 mL去离子水充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存 1周。
ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Standard:10 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.4 mg/mL紫色没食子素溶液。
注意:ReagentⅠ和 Standard有毒,建议在通风橱进行实验。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| ReagentⅠ Powder | 48T: ×1 vial 96T: ×2 vials | 4℃,避光保存 |
| ReagentⅡ | 48T: 3.5 mL 96T: 7 mL | 4℃ |
| Standard | 48T: 2 mL 96T: 2 mL | 4℃,避光保存 |
按下表所示,用 0.5 mol/L HCI溶液将 Standard稀释至 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625 mg/mL。
| 序号 | 不同浓度的标准品的体积(µL) | 0.5 mol/L HCI的体积(µL) | 标准品浓度(mg/mL) |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 600 µL of Standard | 0 | 0.4 |
| Std.2 | 300 µL of Std.1 (0.4 mg/mL) | 300 | 0.2 |
| Std.3 | 300 µL of Std.2 (0.2 mg/mL) | 300 | 0.1 |
| Std.4 | 300 µL of Std.3 (0.1 mg/mL) | 300 | 0.05 |
| Std.5 | 300 µL of Std.4 (0.05 mg/mL) | 300 | 0.025 |
| Std.6 | 300 µL of Std.5 (0.025 mg/mL) | 300 | 0.0125 |
| Std.7 | 300 µL of Std.6 (0.0125 mg/mL) | 300 | 0.00625 |
| Blank | 0 | 300 | 0(空白孔) |
注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。
注意:推荐使用新鲜样本
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定管(μL) |
|---|---|
| 风干土样(g) | 0.02 |
| ReagentⅠ | 120 |
振荡混匀,30℃恒温培养 1 h
| 试剂 | 测定管(μL) |
|---|---|
| ReagentⅡ | 50 |
| 乙醚 | 430 |
振荡数次,室温静置 30 min,取 200 μL上层液于 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿中测定 430 nm处的吸光值 A 测定,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意:1. 因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗 2-3次,再转移测定;2、乙醚易挥发,转移到 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿后立即测定,最好一个一个测定)。3. 标准曲线只需测定 1次,实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.5,可适当降低样本质量后进行测定,注意同步修改计算公式。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
单位的定义:每天每 g土样中产生 1 mg紫色没食子酸定义为一个酶活力单位。
S-PPO (U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=10.32×x÷W
V 反总:加入乙醚萃取体积:0.43 mL;W:样本质量,0.02 g;T:反应时间,1 h=1/24 d。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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