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土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Polyphenoloxidase (S-PPO) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4029

产品特点:

  • 验证的样本类型齐全,适配多种土壤基质
  • 微量法设计,节省样本与试剂用量
  • 操作步骤精简,显色反应迅速,实验周期短
  • 4 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输确保组分稳定
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥269
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥526
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具,可在微量体系内快速测定土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性,为土壤微生物代谢、有机质循环及环境修复研究提供可靠数据。

    土壤多酚氧化酶(S-PPO)主要由土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,是芳香族化合物循环的关键限速酶。该酶催化邻苯三酚等酚类底物氧化生成有色醌类物质,后者在 430 nm 处具有特征吸收峰。CheKine™ 试剂盒利用这一显色反应,通过 430 nm 吸光度变化定量反映 S-PPO 活性,适用于新鲜或低温保存的土壤样本,为土壤环境修复与碳循环研究提供简便、快速的检测手段。

    应用领域

    土壤微生物生态学、土壤有机质循环机制研究、污染土壤生物修复效果评估、农林地力监测及环境科学教学实验。

    土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Polyphenoloxidase (S-PPO) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4029
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Standard
    分子 土壤多酚氧化酶(S-PPO)
    检测指标 土壤多酚氧化酶(S-PPO)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 430 nm处的吸光度)
    • 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 烘箱、30-50目筛、离心机、恒温水浴锅、分析天平
    • 去离子水、乙醚、0.5 mol/L HCI溶液

    试剂准备

    ReagentⅠ:临用前配制,取一瓶 ReagentⅠ加入 9 mL去离子水充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存 1周。

    ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Standard:10 mmol/L重铬酸钾溶液,相当于 0.4 mg/mL紫色没食子素溶液。

    注意:ReagentⅠ和 Standard有毒,建议在通风橱进行实验。

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    ReagentⅠ Powder48T: ×1 vial
    96T: ×2 vials
    4℃,避光保存
    ReagentⅡ48T: 3.5 mL
    96T: 7 mL
    4℃
    Standard48T: 2 mL
    96T: 2 mL
    4℃,避光保存

    标准曲线设置

    按下表所示,用 0.5 mol/L HCI溶液将 Standard稀释至 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625 mg/mL。

    序号不同浓度的标准品的体积(µL)0.5 mol/L HCI的体积(µL)标准品浓度(mg/mL)
    Std.1600 µL of Standard00.4
    Std.2300 µL of Std.1 (0.4 mg/mL)3000.2
    Std.3300 µL of Std.2 (0.2 mg/mL)3000.1
    Std.4300 µL of Std.3 (0.1 mg/mL)3000.05
    Std.5300 µL of Std.4 (0.05 mg/mL)3000.025
    Std.6300 µL of Std.5 (0.025 mg/mL)3000.0125
    Std.7300 µL of Std.6 (0.0125 mg/mL)3000.00625
    Blank03000(空白孔)

    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜样本

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 430 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
    2. 标准曲线的建立:以 0 mg/mL的标准品为空白管,取 200 μL稀释好的各管标准品(0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625 mg/mL)于 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿中在 430 nm处测定吸光值 A,分别记为 A 标准和 A 空白,标准曲线只需做 1-2次。
    3. 样本测定(下述操作在 1.5 mL离心管中进行):
      试剂测定管(μL)
      风干土样(g)0.02
      ReagentⅠ120

      振荡混匀,30℃恒温培养 1 h

      试剂测定管(μL)
      ReagentⅡ50
      乙醚430

      振荡数次,室温静置 30 min,取 200 μL上层液于 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿中测定 430 nm处的吸光值 A 测定,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:1. 因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗 2-3次,再转移测定;2、乙醚易挥发,转移到 96孔石英/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿后立即测定,最好一个一个测定)。3. 标准曲线只需测定 1次,实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.5,可适当降低样本质量后进行测定,注意同步修改计算公式。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 标准曲线的绘制
    2. 以标准液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴绘制标准曲线。将ΔA 测定代入标准曲线公式计算出 x(mg/mL)。
    3. S-PPO活力的计算

      单位的定义:每天每 g土样中产生 1 mg紫色没食子酸定义为一个酶活力单位。

      S-PPO (U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=10.32×x÷W

      V 反总:加入乙醚萃取体积:0.43 mL;W:样本质量,0.02 g;T:反应时间,1 h=1/24 d。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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