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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为土壤样本设计的微量比色检测工具，可在 400 nm 波长下快速定量土壤微生物分泌的 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性，为土壤碳氮循环、微生物生态及环境胁迫研究提供可靠数据。
背景信息
土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是一种由土壤微生物分泌的溶酶体酸性水解酶，广泛分布于各类土壤生态系统中。该酶通过催化 N-β-乙酰氨基葡萄糖苷水解生成对硝基苯酚，其产物在 400 nm 处具有特征吸收峰。CheKine™ 试剂盒利用这一显色反应，通过测定 400 nm 吸光度的变化，快速计算土壤样本中 S-NAG 的活性水平，适用于评估土壤微生物活性、有机质分解速率及环境胁迫响应。
应用领域
土壤微生物生态研究、土壤碳氮循环监测、环境胁迫评估、农业土壤健康评价等水土检测场景。
| 中文名称 | 土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil N-Acetyl-β-D-glucosaminidase (S-NAG) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4028 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG） |
| 检测指标 | 土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG） |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：临用前配制；每瓶加入 8 mL去离子水，充分溶解，用不完的试剂-20℃避光保存 1个月。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Standard：即用型，5 μmol/mL对硝基苯酚标准溶液；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
0.1 μmol/mL Standard：临用前配制；取 20 µL Standard，加入 980 µL ReagentⅡ，充分混匀，配制成 0.1 μmol/mL Standard。
注意：每次实验都需要制备 0.1 μmol/mL Standard，稀释后的 0.1 μmol/mL Standard需在 4 h内使用完。
注意：推荐使用新鲜土壤样本。
鲜土自然风干或 37℃风干，过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| Sample (g) | 0.02 | 0.02 | 0 | 0 |
| 甲苯（μL） | 10 | 10 | 0 | 0 |
| 室温振荡混匀 15 min | 90℃振荡混匀 15 min | 0 | 0 | |
| ReagentⅠ(μL) | 130 | 0 | 0 | 0 |
| 去离子水（μL） | 0 | 130 | 0 | 0 |
| ReagentⅡ(μL) | 160 | 160 | 0 | 0 |
| 混匀，37℃震荡反应 1 h后，沸水浴 5 min，（盖紧，防止水分蒸发），立即冷却至室温。 | ||||
| 10,000g，25℃离心 10 min，取上清液 | ||||
| 上清（μL） | 80 | 80 | 0 | 0 |
| 0.1 μmol/mL Standard (μL) | 0 | 0 | 80 | 0 |
| 去离子水（μL） | 0 | 0 | 0 | 80 |
| ReagentⅢ(μL) | 160 | 160 | 160 | 160 |
| 混匀，室温静置 2 min，10,000 g，25℃离心 10 min，取 200 μL上清至 96孔板或微量玻璃比色皿，405 nm处测定吸光值，分别记为 A 对照、A 测定、A 标准和 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白 |
注意：标准管和空白管只需测 1-2次，每个测定管需设一个对照管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量，如果ΔA 测定大于 0.8，上清可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
活性单位定义：每克土样每天催化产生 1 μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
S-NAG(U/g Soil)=ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准×V 反总÷W÷T=0.72×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准：标准品浓度，0.1 μmol/mL ；V 反总：反应总体积，0.3 mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1 h=1/24 d。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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