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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 单胺氧化酶（MAO）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法设计的微量检测工具，可快速测定生物样本中单胺氧化酶（MAO）的催化活性。该试剂盒适用于血清（浆）、动植物组织、细胞、细菌及其他生物体液，为细胞代谢与氧化应激研究提供可靠数据支持。
单胺氧化酶（Monoamine Oxidase, MAO, EC1.4.3.4）广泛分布于脊椎动物的分泌腺、脑、肝脏等器官，在无脊椎动物及豆类芽等植物中也有低水平表达。它通过催化单胺类神经递质与激素的氧化脱氨反应，维持细胞内单胺类物质的稳态。研究表明，MAO活性与肝纤维化程度呈正相关；其活性异常会导致单胺类神经递质代谢紊乱，进而诱发神经退行性疾病、情绪障碍等多种病理状态。因此，准确测定MAO活性对理解细胞代谢异常及疾病机制具有重要意义。
该试剂盒主要应用于细胞代谢与氧化应激研究，可用于：
| 中文名称 | 单胺氧化酶(MAO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Monoamine Oxidase (MAO) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1900 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer I • Extraction Buffer II • Assay Buffer • Substrate |
| 分子 | MAO |
| 检测指标 | MAO |
| 注意事项 | • 需用96孔UV微孔板。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，匀浆液避免反复冻融。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 60 mL (48 T) 120 mL (96 T) | 4℃ |
| ReagentⅠ | 7 mL (48 T) 14 mL (96 T) | 4℃，避光保存 |
| ReagentⅡ | 7 mL (48 T) 14 mL (96 T) | 4℃ |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
ReagentⅡ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3002蛋白质定量试剂盒（Bradford法）进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 测定孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|
| 样本 | 10 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 10 |
| ReagentⅠ | 100 | 100 |
| 混匀，37℃孵育 5 min | ||
| ReagentⅡ | 100 | 100 |
迅速混匀，立即读取 340 nm处 0 min的初始吸光值 A1和 37℃孵育 4 min后的吸光值 A2。测定孔记为 A 测定，空白孔记为 A 空白，计算ΔA=(A1 测定-A2 测定)-(A1 空白-A2 空白)。
注意：1.需使用 UV板，空白管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA小于 0.005可适当加大样本量。如果ΔA大于 0.6，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。2.因通过反应速率计算酶活，使用 96孔 UV板时请根据操作速度控制一次测定的样本数，建议一次检测的样本组数 2-3个。该酶促反应速度较快，需要把握好检测的起始时间点（ReagentⅡ加入后迅速混匀并检测）。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
酶活定义：每 g蛋白每分钟消耗 1 μmol NADH 定义为一个酶活力单位。
MAO 活性(U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×106 ]÷(V 样×Cpr)÷T=1.688×ΔA÷Cpr
酶活定义：每千克组织每分钟消耗 1 μmol NADH定义为一个酶活力单位。
MAO 活性(U/g)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×106]÷(V 样÷V 样总×W)÷T=1.688×ΔA÷W
酶活定义：每 104细胞或细菌每分钟消耗 1 μmol NADH定义为一个酶活力单位。
MAO 活性(U/104)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×106]÷(500×V 样÷V 样总)÷T=1.688×ΔA÷500=0.0034×ΔA
酶活定义：每升液体每分钟消耗 1 μmol NADH定义为一个酶活力单位。
MAO 活性(U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×106]÷V 样÷T=1.688×ΔA
V 反总：反应体系总体积，0.21 mL=0.00021 L；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L /mol /cm；d：96孔板光径，0.5 cm；106：1 mol=1×106 μmol；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；T：反应时间，4 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万。
将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
杂志名称: Neurochemistry International | 作者: Sun, Liang, et al.
IF: 4 | 发表时间: 2024
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