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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物研发的CheKine™ 植物类黄酮含量检测试剂盒（微量法）是一种基于比色法的微量检测工具，可快速、定量测定植物组织样本中总类黄酮含量，尤其适用于细胞代谢研究中的氧化应激评估。
类黄酮是植物体内广泛存在的多苯次生代谢物，具有消炎、抗菌、降血脂及清除羟自由基等多重生物活性，槲皮素为其代表性化合物。本试剂盒利用类黄酮在碱性条件下与显色剂发生特异性显色反应，生成可在特定波长下检测的有色产物，其吸光度与类黄酮浓度成正比。通过槲皮素标准品建立标准曲线，即可准确计算样本中类黄酮含量（以槲皮素当量表示）。
适用于植物生理学、细胞代谢及氧化应激研究，可评估植物响应环境胁迫（如干旱、重金属、紫外线）时的类黄酮积累变化，亦可用于药用植物活性成分筛选及功能性食品原料质量控制。
| 中文名称 | 植物类黄酮含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Plant Flavonoids Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1530 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Nitrite Solution • Chromogen • NaOH Solution • 槲皮素标准品（10mg/mL） |
| 检测范围 | 0.156-10 mg/g |
| 灵敏度 | 0.078 mg/g |
| 分子 | Plant Flavonoids |
| 检测指标 | Plant Flavonoids |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • 每个样本都需要设置一个对照孔，OD值大于0.6，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。 •显色完成后立即测定，2小时后吸光值会下降。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为6个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Nitrite Solution | 1.1 mL (48 T) 2.2 mL (96 T) | 4℃ |
| Chromogen | 1 mL (48 T) 2 mL (96 T) | 4℃ |
| NaOH Solution | 8.5 mL (48 T) 17 mL (96 T) | 4℃ |
| Quercetin Standard（10 mg/mL） | 0.1 mL (48 T) 0.2 mL (96 T) | 4℃，避光保存 |
Extraction Buffer（需自备）：60%乙醇，室温保存。
Nitrite Solution：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Chromogen：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
NaOH Solution：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
将 50 µL 10 mg/mL Quercetin Standard用 450 µL 60%乙醇稀释至 1 mg/mL，然后按下表所示，用 60%乙醇进一步将标准品稀释至 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0313、0.0156 mg/mL。用不完的 10 mg/mLQuercetin Standard 4℃避光保存。
| 序号 | 标准品体积 | 60%乙醇体积（µL） | 标准品浓度（mg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 50 µL of 10 mg/mL | 450 | 1 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 100 | 0.5 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (0.5 mg/mL) | 100 | 0.25 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (0.25 mg/mL) | 100 | 0.125 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (0.125 mg/mL) | 100 | 0.0625 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (0.0625 mg/mL) | 100 | 0.0313 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (0.0313 mg/mL) | 100 | 0.0156 |
将植物样本烘干至恒重，粉碎并过 40目筛之后，称取约 0.1 g，加入 1 mL Extraction Buffer，用超声提取法进行提取（300 W，超声 5s，间歇 8s，总时间 30 min，温度 60℃），然后 12,000 rpm，25℃离心 10 min，取上清，用 Extraction Buffer定容至 1 mL，待测。
直接称取约 0.1 g的新鲜组织，加入 1 mL Extraction Buffer捣碎，超声提取（300 W，超声 5 s，间歇 8 s，总时间 30 min，温度 60℃），然后 12,000 rpm，25℃离心 10 min，取上清，用 Extraction Buffer定容至 1 mL，待测。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上，调节波长至 502 nm，可见分光光度计用去离子水调零。
| 试剂 | 空白管（μL） | 标准管（μL） | 测定管（μL） | 对照管（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 样本 | 0 | 0 | 60 | 60 |
| 不同浓度 Std. | 0 | 60 | 0 | 0 |
| 去离子水 | 60 | 0 | 0 | 0 |
| Nitrite Solution | 15 | 15 | 15 | 15 |
| 混匀，室温静置 5 min。 | ||||
| Chromogen | 15 | 15 | 15 | 0 |
| 混匀，室温静置 5 min。 | ||||
| NaOH Solution | 120 | 120 | 120 | 120 |
| 60%乙醇 | 90 | 90 | 90 | 105 |
| 混匀，室温静置 15 min，取 200 µL于 96孔板或微量玻璃比色皿中测定吸光值 A，分别记为 A 空白、A 标准、A 测定、A 对照。计算ΔA测=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。空白孔只需做一个。 | ||||
以标准溶液浓度为 y轴，ΔA 标为 x轴，绘制标准曲线。
将ΔA 测带入方程得到 y值（mg/mL）
类黄酮含量(mg/g干重或鲜重)=y×V 提取÷W×n=10y×n
类黄酮含量(mg/mg prot)=y×V 提取÷(Cpr×V 提取)×n=y÷Cpr×n
V 提取：加入提取液体积，1 mL；W：样品质量，0.1 g；n：样本稀释倍数；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
杂志名称: Postharvest Biology and Technology | 作者: Hao, Yuxuan, et al.
IF: 6.800 | 发表时间: 2025
货号：KTD104
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