非蛋白质巯基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 非蛋白质巯基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1551
Price: 348 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Non-protein Sulfhydryl Content Assay Kit

产品货号

KTB1551

产品特点：

适用于动植物组织、血清（浆）及其他液体样本，样本兼容性强

微量法设计，节省样本与试剂，操作简便，检测时间短

提供完整组分（Extraction Buffer、Reagent I、Reagent Ⅱ、Standard）及详细实验流程与计算示例，实验上手快

4 ℃避光保存 6 个月，冰袋运输，实验室日常储存与运输便捷

选择规格

96 T/96 S

¥348

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 非蛋白质巯基含量检测试剂盒（微量法）(CheKine™ Micro Non-protein Sulfhydryl Content Assay Kit) 是一套基于比色法的微量体系，可快速、简便地定量动植物组织、血清（浆）及其他液体样本中的非蛋白质巯基含量，为细胞代谢研究提供可靠数据。

生物体内的巯基化合物分为非蛋白质巯基与蛋白质巯基两大类，其中非蛋白质巯基（如谷胱甘肽等）在抗氧化防御、重金属解毒及氧化还原平衡调节中扮演关键角色。CheKine™ 试剂盒利用巯基与显色试剂发生特异性反应，生成可在特定波长下检测的有色产物，吸光度变化与非蛋白质巯基浓度成正比，从而实现对样本中巯基水平的精准评估。

应用领域：细胞代谢研究、氧化应激评估、药物或毒物对巯基代谢影响分析、植物逆境生理研究、食品及环境样本中巯基水平监测等。

产品参数

中文名称	非蛋白质巯基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Non-protein Sulfhydryl Content Assay Kit
产品货号	KTB1551
检测方法	比色法
样本类型	动植物组织、血清（浆）或其他液体
试剂盒组分	•Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Standard
分子	非蛋白质巯基
注意事项	•推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	4℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见光分光光度计（能测 412 nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机
去离子水，无水乙醇
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

试剂盒组分

组分	规格（96 T）	储存条件
Extraction Buffer	120 mL	4℃
Reagent I	20 mL	4℃
Reagent II Powder	×1 vial	4℃，避光保存
Standard Powder	×1 vial	4℃，避光保存

Reagent II：临用前配制；加入 3 mL无水乙醇充分溶解备用。4℃避光保存一个月。

Standard：临用前配制；加入 1.65 mL Extraction Buffer配制成 50 µmol/mL的半胱氨酸标准品备用，4℃避光可保存 1个月。

标准品制备

使用 50 μmol/mL半胱氨酸标准液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：

序号	Standard体积	去离子水体积（µL）	浓度（μmol/mL）
Std.1	32 µL 50 μmol/mL Standard	968	1.6
Std.2	500 µL of Std.1 (1.6 μmol/mL)	500	0.8
Std.3	500 µL of Std.2 (0.8 μmol/mL)	500	0.4
Std.4	500 µL of Std.3 (0.4 μmol/mL)	500	0.2
Std.5	500 µL of Std.4 (0.2 μmol/mL)	500	0.1
Std.6	500 µL of Std.5 (0.1 μmol/mL)	500	0.05
Std.7	500 µL of Std.6 (0.05 μmol/mL)	500	0.025
Std.8	500 µL of Std.7 (0.025 μmol/mL)	500	0.0125
Std.9	500 µL of Std.8 (0.0125 μmol/mL)	500	0.0063
Blank	0	500	0

注意：每次实验，请使用新配制的标准品；配制好的标准品需要在 4 h之内使用。

样本制备

注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。

1. 组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。

2. 血清（浆）等液体样本：向 0.1 mL血清（浆）、培养液等液体样本中加入 0.5 mL Extraction Buffer，混匀，室温静置 10 min，然后 8,000g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。

注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。因磺基水杨酸会导致蛋白变性，样本需另行用去离子水按照步骤提取。

实验步骤

1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 412 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。

2. 操作表（下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中进行）：

试剂	空白孔（μL）	标准孔（μL）	测定孔（μL）
样本上清	0	0	60
Standard	0	60	0
Reagent I	130	130	130
Reagent II	0	20	20
去离子水	80	0	0

3. 混匀后，25℃静置 10 min，测定 412 nm处吸光度，空白孔记为 A 空白，标准孔记为 A 标准，测定孔记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：标准曲线和空白孔只用测 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 2.0，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μmol/mL)。

2. 非蛋白质巯基含量的计算：

（1）按样本蛋白浓度计算：

非蛋白质巯基含量 (μmol/mg prot)=x×V 样总÷Cpr=x÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

非蛋白质巯基含量 (μmol/g 鲜重)=x×V 样总÷W=x÷W

（3）按样本体积计算：

非蛋白质巯基含量 (μmol/mL)=x×5

V 样总：加入 Extraction Buffe体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；5：血清等液体样本稀释倍数。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。