线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1法)

Name: 线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1法)
Brand: Abbkine
SKU: KTA4001
Price: 416 CNY
Availability: InStock

Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1)

产品货号

KTA4001

产品特点：

采用JC-1染料，红/绿荧光双通道信号，结果直观可靠

兼容流式细胞仪与荧光显微镜，实验设计灵活

内含CCCP阳性对照，便于验证实验体系

组分完整，包含100×JC-1染液、50 mM CCCP及10×PBS，即开即用

冰袋运输，-20℃避光保存，有效期≥12个月

选择规格

20 T

¥416

现货（当天发货）

100 T

¥998

现货（当天发货）

500 T

¥3616

现货（次日发货）

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买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物推出的线粒体膜电位分析试剂盒（JC-1法）（Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit, JC-1）是一款专为细胞状态评估设计的核心工具，利用JC-1阳离子荧光染料快速、直观地监测线粒体膜电位变化，从而判断细胞健康或早期凋亡状态。

线粒体膜电位（ΔΨm）的下降是细胞凋亡或周期紊乱最早发生的分子事件之一。JC-1是一种亲脂性阳离子染料，在正常线粒体中因膜电位高而聚集成红色荧光聚合物；当膜电位降低时，JC-1以单体形式存在，发出绿色荧光。通过红/绿荧光强度比值即可定量评估线粒体膜电位变化，适用于流式细胞仪或荧光显微镜平台。试剂盒附带CCCP（羰基氰酸间氯苯腙）作为阳性对照，可快速诱导线粒体膜电位耗散，验证体系有效性。

应用领域

适用于细胞凋亡/周期研究、药物毒性筛选、线粒体功能评估等细胞生物学实验，尤其适合对细胞健康状态进行快速、高通量分析。

产品参数

中文名称	线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1法)
英文名称	Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1)
产品货号	KTA4001
试剂盒组分	• JC-1 Stain(100×) • CCCP (50 mM) • PBS (10×)
注意事项	• JC-1溶解度低，难以制备。使用前，确保JC-1完全解冻并温热至室温。 • JC-1具有光敏性。孵育需要在黑暗中进行。
保存建议	请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

培养板、可调节式移液枪及枪头
离心机、37℃，5% CO2细胞培养箱
荧光显微镜或流式细胞仪
去离子水

试剂准备

JC-1 Stain (100×): 使用前，平衡到室温，融解后使用；-20℃避光分装保存，避免反复冻融。

注意：JC-1 (100×)在 4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以 20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

CCCP (50 mM): 使用前，平衡到室温；-20℃分装保存，避免反复冻融。

PBS (10×): 加入去离子水稀释成 1×PBS；4℃保存。

实验步骤

A. 用流式细胞仪进行检测

1. 对于非贴壁细胞，300 g离心 5 min收集细胞，用 1×PBS清洗 2次。对于贴壁细胞，先用胰蛋白酶消化细胞，然后 300 g离心 5 min离心收集细胞，用 1×PBS清洗 2次。弃去 1×PBS，加 1 mL细胞培养基重悬细胞，细胞密度为 1×10⁶个/mL。

2. 阳性对照的设置：阳性对照孔培养基中加入 1 μL CCCP (50 mM)，其终浓度为 50 μM，充分混匀，在 37℃，5% CO2细胞培养箱中孵育 5 min。

注意:（1）对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料确定。（2）建议保留未染色对照细胞（即不带 JC-1染色），细胞悬浮在检测缓冲液中，使处理过的和未处理的样品都能通过流式细胞仪。

3. 每孔培养基中加入 10 μL JC-1 (100×)，充分混匀，37℃，5% CO2细胞培养箱孵育 15-30 min。

注意：1）不同细胞染色时间不同。正式实验前，做预实验确定最佳孵育时间。2）选择细胞状态好进行染色，以获得最佳实验结果。

4. 37℃孵育结束后，400 g，4℃离心 3-4 min，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。

5. 加入 1 mL预冷的 1×PBS重悬细胞，400 g，4℃离心 3-4 min，沉淀细胞，弃上清，重复洗涤 1次。

6. 将细胞重悬于 500 μL预冷的 1×PBS中，流式细胞仪立即分析细胞。在 FITC通道（通常为 FL1），可检测到凋亡细胞中的 JC-1单体，呈扩散绿色荧光。正常细胞中，JC-1聚集体可在 PI通道（通常为 FL2）中检测，呈点状红色荧光。

注意：染色后尽量在 30-60 min内完成上机检测。

B. 用荧光显微镜检测

1. 悬浮细胞，遵循流式细胞仪的方案 A1-6步骤，将步骤 A6 收集的细胞悬液放置于载玻片上，用盖玻片盖住细胞。选择合适的滤光片对细胞进行荧光显微镜分析。

2. 对于贴壁细胞：建议的方案如下所示：

(1) 以 6孔板为例，每孔加入 1 mL细胞培养基。其他培养器皿以此类推。

(2) 阳性对照的设置：阳性对照孔培养基中加入 1 μL CCCP (50 mM)，其终浓度为 50 μM，充分混匀，在 37℃，5% CO2细胞培养箱中孵育 5 min。

注意：对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料确定。

(3) 每孔培养基中加入 10 μL JC-1 (100×)，充分混匀，37℃，5% CO2细胞培养箱孵育 15-30 min。

注意：1）不同细胞染色时间不同。正式实验前，做预实验确定最佳孵育时间。2）选择细胞状态好进行染色，以获得最佳实验结果。

(4) 37℃孵育结束后，吸除上清，用 1×PBS洗涤 2次。

(5) 加入 500 μL室温的 1×PBS，在荧光显微镜下观察细胞。

注意：酚红不干扰 JC-1染色。染色后尽量在 30 min内完成拍照。

注意事项

JC-1探针装载完并洗涤后尽量在 30 min内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

常见问题

Q: 如何在保证小老鼠精子的体外存活的前提下，用该试剂盒进行线粒体膜电位分析？

A: 用HBSS溶液培养小鼠精子，并用该缓冲液配置染色工作液，进行活细胞染色。

Q: 该试剂盒可以用分光光度计检测吗？

A: 不建议用，该试剂盒是基于线粒体跨膜电位的变化，运用JC-1进行细胞染色，区分健康和凋亡细胞，建议用流式细胞仪或者荧光显微镜进行检测。

Q: 该试剂盒如果储存时间偏长染液吸出是无色，这应该如何处理？

A: 该试剂盒如果客户低温储存时间偏长，染料可能会低温析出，建议将瓶子振摇，然后水浴37度加热，混匀即可。

Q: 该试剂盒能用分光光度计检测吗？

A: 该试剂盒运用的是荧光定量法，不建议用分光光度计检测。

文献引用

High-fat diet-induced L-saccharopine accumulation inhibits estradiol synthesis and damages oocyte quality by disturbing mitochondrial homeostasis.

杂志名称: Gut Microbes | 作者: Wen, **gyi, et al.

IF: 12 | 发表时间: 2024

DST-3, a novel cryptotanshinone derivate, attenuates glutamate excitotoxicity after ischemic stroke via CREB-Homer1 axis activation

杂志名称: Phytomedicine | 作者: Yuxing Dai, Jiaying Yu, Gongyun He, et al.

IF: 8 | 发表时间: 2025

Effective compound combination of Bufei Yishen formula ameliorates PM2. 5-induced COPD by inhibiting mitochondrial oxidative stress through SIRT3-mediated FOXO3 deacetylation.

杂志名称: Phytomedicine | 作者: Wang, **g, et al.

IF: 7 | 发表时间: 2024

PA1b-like peptides alleviate mitochondrial dysfunction induced by glucose toxicity through interaction with VDAC1 in β-cells.

杂志名称: Food & Function | 作者: Huang, Huizhong, et al.

IF: 5 | 发表时间: 2024

Cytotoxic Effect of Escitalopram/Etoposide Combination on Etoposide-Resistant Lung Cancer.

杂志名称: Pharmaceuticals | 作者: Özkaya Gül, Serap, et al.

IF: 4 | 发表时间: 2024

Mitochondrial Ca2+ overload due to altered proteostasis amplifies apoptosis in C2C12 myoblasts under hypoxia: Protective role of nanocurcumin formulation.

杂志名称: IUBMB life | 作者: Kushwaha, Asha D., et al.

IF: 4 | 发表时间: 2024

Senescence marker protein30 protects lens epithelial cells against oxidative damage by restoring mitochondrial function.

杂志名称: Bioengineered | 作者: Teng, He, et al.

IF: 4 | 发表时间: 2024

The interplay between H19 and HIF-1α in mitochondrial dysfunction in myocardial infarction.

杂志名称: Cellular Signalling | 作者: **e, Luhan, et al.

IF: 4 | 发表时间: 2024

miR‐139‐5p upregulation alleviated spontaneous recurrent epileptiform discharge‐induced oxidative stress and apoptosis in rat hippocampal neurons via regulating the Notch pathway.

杂志名称: Cell Biology International | 作者: Zhao, Chensheng, et al.

IF: 3 | 发表时间: 2024

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杂志名称: Clinical Proteomics | 作者: **e, Ming-Zhang, et al.

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A. 用流式细胞仪进行检测

B. 用荧光显微镜检测

注意事项

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Q: 如何在保证小老鼠精子的体外存活的前提下，用该试剂盒进行线粒体膜电位分析？

Q: 该试剂盒可以用分光光度计检测吗？

Q: 该试剂盒如果储存时间偏长染液吸出是无色，这应该如何处理？

Q: 该试剂盒能用分光光度计检测吗？

文献引用

High-fat diet-induced L-saccharopine accumulation inhibits estradiol synthesis and damages oocyte quality by disturbing mitochondrial homeostasis.

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