蛋白质羰基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 蛋白质羰基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1200
Price: 598 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Protein Carbonyl Assay Kit

产品货号

KTB1200

产品特点：

适用于细胞、组织、细菌、血清、植物等多种样本类型，覆盖广泛的研究体系。

提供详尽的样本处理与实验步骤，确保结果准确性与可重复性。

试剂盒组分稳定，保质期长达6个月，便于长期储存与灵活使用。

选择规格

48 T/48 S

¥598

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥989

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 蛋白质羰基含量检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro Protein Carbonyl Assay Kit）是一款基于比色法设计的微量检测工具，可快速、定量地测定细胞、组织、细菌、血清及植物等生物样本中蛋白质羰基（Protein Carbonyl）的水平，帮助研究者评估蛋白质氧化损伤程度。

背景知识

蛋白质羰基是蛋白质氧化修饰的早期标志，由多种氨基酸在氧化应激条件下发生侧链修饰而形成。其含量高低直接反映蛋白质氧化损伤的程度，因此蛋白质羰基含量被广泛用作衡量氧化应激水平的关键指标。CheKine™ 蛋白质羰基含量检测试剂盒（微量法）通过特异性显色反应，使羰基与染色剂结合生成有色产物，在特定波长下测定吸光度变化，从而实现对羰基含量的定量分析。该方法操作简便、灵敏度高，适用于微量样本的检测需求。

应用领域

本产品主要用于细胞代谢研究，尤其适用于氧化应激、衰老机制、疾病模型构建等方向中蛋白质氧化损伤的定量分析。

产品参数

中文名称	蛋白质羰基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Protein Carbonyl Assay Kit
产品货号	KTB1200
检测类型	辅酶相关
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer • Antioxidant • Chromogen • HCL • TCA • Guanidine Hydrochloride
分子	Protein Carbonyl
检测指标	Protein Carbonyl
注意事项	• 该产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。有关危险和安全处理信息，请参阅安全数据表。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • Antioxidant使用前根据要测定的样品数现配，配置好后4℃保存，若变为黑色，则不能使用。 • Chromogen见光易分解，反应需严格避光。
保存建议	收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为6个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或紫外分光光度计（能测 370 nm处的吸光度）
水浴锅、制冰机、低温离心机
96 孔 UV 板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水、无水乙醇及乙酸乙酯
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

试剂盒组分	规格	储存条件
Extraction Buffer	60 mL (48 T) 120 mL (96 T)	4℃
Antioxidant Powder	×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T)	4℃，避光保存
Chromogen	7.5 mL (48 T) 15 mL (96 T)	4℃，避光保存
HCl	7.5 mL (48 T) 15 mL (96 T)	4℃
TCA	18 mL (48 T) 36 mL (96 T)	4℃
Guanidine Hydrochloride	36 mL (48 T) 72 mL (96 T)	4℃

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Working Antioxidant：临用前配制；称取 0.1 g加 1 mL去离子水溶解配制，每 1 mL为 10个样品用量；现用现配。

Chromogen：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

HCl：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

TCA：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Guanidine Hydrochloride：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

注意：Antioxidant和 Chromogen有毒，TCA和 Guanidine Hydrochloride有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。

样本制备

动植物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，4,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，加 0.1 mL Working Antioxidant，室温放置 10 min，4℃，10,000 g离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
细胞或细菌：收集 500万细胞或细菌到离心管内，用冷 PBS清洗细胞，离心后弃上清，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴超声波破碎细胞或细菌 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），然后 10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
血清（浆）：直接测定。

注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 370 nm，紫外分光光度计用去离子水调零。
按照下表进行加样及反应：

试剂	对照管（μL）	测定管（μL）
Sample	60	60
Chromogen	0	120
HCl	120	0

混匀，37℃避光反应 1 h

试剂	对照管（μL）	测定管（μL）
TCA	150	150

静置 5 min，4℃，12,000 g离心 15 min，弃上清，留沉淀

试剂	对照管（μL）	测定管（μL）
无水乙醇	150	150
乙酸乙酯	150	150

漩涡混匀，4℃，12,000 g离心 10 min，弃上清，留沉淀，重复 3次

试剂	对照管（μL）	测定管（μL）
Guanidine Hydrochloride	300	300

漩涡混匀，37℃温育 15 min，沉淀全部溶解后，4℃，12,000 g离心 15 min，取上清 200 μL于 96孔 UV 板或微量石英比色皿中，370 nm处测定吸光值，计算ΔA=A 测定-A 对照。

注意：每个测定管均需设置一个对照管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测小于 0.005可适当加大样本量。如果ΔA 测大于 0.8，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

A. 使用 96孔 UV板测定的计算公式

按照样本蛋白浓度计算
蛋白质羰基含量(μmol/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)]÷(V 样×Cpr)=0.454×ΔA÷Cpr
按照样本重量计算
蛋白质羰基含量(μmol/g鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)]÷(W×V 样÷V 样总)=0.454×ΔA÷W
按照细胞或细菌数量计算
蛋白质羰基含量(μmol/104)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)]÷(500×V 样÷V 样总)=0.454×ΔA÷500
按照液体体积计算
蛋白质羰基含量(μmol/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)]÷V 样=0.454×ΔA

ΔA=A 测定-A 对照；V 反总：反应体系总体积，0.3 mL；ε：羰基摩尔消光系数，22 L/mmol/cm；d：96孔板光径，0.5 cm；V 样：加入样本体积，0.06 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL，W：样本质量，g；500：细胞或细菌数量，5×106。

B. 使用微量石英比色皿测定的计算公式

将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗？

A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。

Q: 该类试剂盒使用量应如何计算？

A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗？

A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

文献引用

Hypothermal effects of cold anesthesia on the vitality and muscle quality of live Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis).

杂志名称: Food Research International | 作者: Chen, Laixin, et al.

IF: 8.000 | 发表时间: 2025

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