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WB裂解液

WB Lysis Buffer

产品货号
BMP2010

产品特点:

  • 变性体系,一步裂解胞膜、胞浆及胞核,蛋白释放充分
  • 配套提供100 mM PMSF,抑制蛋白酶活性,减少蛋白降解
  • 4 ℃保存即用,无需解冻,流程简化,节省实验时间
  • 选择规格

    100 mL
    ¥169
    现货(当天发货)
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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    亚科因生物研发的WB裂解液 (WB Lysis Buffer)是一种专为变性条件设计的蛋白提取试剂,可在单次操作中高效裂解动物细胞与组织的胞膜、胞浆及胞核组分,所获得的蛋白样品可直接用于SDS-PAGE、Western Blot等下游实验。

    Western Blot实验中,样本前处理的质量直接决定目标蛋白的检出效率。WB裂解液通过高浓度变性剂与离子型表面活性剂的协同作用,可迅速破坏细胞及亚细胞结构,释放可溶性蛋白;同时配方中已预混蛋白酶抑制剂PMSF,降低内源性蛋白酶对目标蛋白的降解风险。实验时只需将样品与本裂解液按比例混合,4 ℃短时孵育或冰上超声即可,无需反复冻融,操作便捷。

    应用领域:Western Blot、SDS-PAGE、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、免疫荧光(IF)等蛋白水平检测与功能研究。

    WB裂解液

    产品参数

    中文名称 WB裂解液
    英文名称 WB Lysis Buffer
    产品货号 BMP2010
    试剂盒组分
    • WB Lysis Buffer-50 mL×2
    • PMSF (100 mM)-1.5 mL
    保存建议 按各组分标签提示分开存储,保质期12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    A. 对于细胞

    1. 弃去培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗1遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗),离心收集细胞。
    2. 按照每10^6个细胞需要约50-100 μL的比例加入Working WB Lysis Buffer,比如6孔板,每孔细胞量大约需加入150-250 μL Working WB Lysis Buffer。用移液器吹打数下,使Working WB Lysis Buffer和细胞充分接触。通常接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
    3. 充分裂解后,10,000-14,000 g离心3-5 min,取上清,即可进行后续的SDS-PAGE和WB等操作。

    B. 对于组织样品

    1. 把组织剪切成细小的碎片。
    2. 按照每20 mg组织样本加入150-250 μL的比例加入Working WB Lysis Buffer。
    3. 用匀浆器匀浆,冰上裂解3-5 min。
    4. 注意:1.如果样本裂解不充分,可以适当提高Working WB Lysis Buffer的用量;若需要高浓度的蛋白样品,也可适当降低Working WB Lysis Buffer的用量。2.若组织样本非常细小,可以适当剪切后直接加入Working WB Lysis Buffer,通过强烈涡旋振荡使其裂解充分。
    5. 充分裂解后,10,000-14,000 g离心3-5 min,取上清,即可进行后续的SDS-PAGE和WB等操作。

    注意事项

    1. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行,裂解后的蛋白样品可分装并长期保存于-80℃。
    2. 4℃保存时,WB Lysis Buffer中的SDS易析出,使用前请置于37℃使其完全溶解,待恢复到室温即可使用。
    3. 裂解后的蛋白样品,推荐使用蛋白质定量试剂盒(BCA法)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定样品的蛋白浓度。
    4. WB Lysis Buffer的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物,在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清,用于后续实验。如果需要检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理,打散该透明胶状物,随后离心取上清,用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如p53、NF-kappaB等,通常不必进行超声处理即可完成检测。

    常见问题

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