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DiO(DiOC18(3))
DiO (DiOC18(3))
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
                                
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亚科因生物推出的DiO (DiOC18(3))是一种绿色荧光亲脂性羰花青染料,专为细胞膜及细胞器膜标记而设计。该试剂以黄色固体形式提供,可在无水溶剂中快速溶解,通过简单孵育即可实现对活细胞或固定细胞膜的均匀染色,为细胞器提取、膜流动性研究及细胞追踪实验提供高对比度荧光信号。
DiOC18(3)(3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)是一种经典的亲脂性膜探针,其分子结构包含两条长链烷基尾部,可稳定插入脂质双层而不破坏膜完整性。在水相环境中,DiO 荧光极弱;一旦嵌入膜结构,其荧光强度与光稳定性显著提升,激发/发射波长分别为 484 nm / 501 nm(甲醇体系),呈现明亮的绿色荧光。该特性使其成为观察线粒体、内质网、高尔基体等膜性细胞器形态与动态变化的理想工具。
DiO 广泛应用于细胞器提取与染色、细胞膜流动性分析、细胞迁移与侵袭研究、外泌体或囊泡标记、神经轴突示踪及多色荧光共定位成像等细胞生物学实验场景。
                                    | 中文名称 | DiO(DiOC18(3)) | 
| 英文名称 | DiO (DiOC18(3)) | 
| 产品货号 | BMD0072 | 
| 分子式 | C53H85ClN2O6 | 
| 产品形式 | 黄色固体 | 
| 分子量 | 882 kDa | 
| 注意事项 | • 可溶于无水乙醇、无水 DMSO 和无水 DMF,在无水 DMSO 中的溶解度约为 10 mg/mL。较难溶解时,可以适当加热或者超声处理。 | 
| 保存建议 | 4℃,避光保存 12 个月。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
(1)配制储液:储液用无水 DMSO、无水 DMF 或 EtOH 配制,浓度 1-5 mM。DiO 在无水 DMSO 和无水 DMF 中的溶解度比在 EtOH中的溶解度高。
注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融;发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1-30 μM的工作液。最常用的工作液浓度为 5-10 μM。
注意:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的 10倍范围内开始最优浓度的摸索。
(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106/mL。
(2)37℃孵育细胞 2-20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。
(3)孵育结束,1,000-1,500 rpm离心 5 min。倾倒上清液,再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。
(4)重复步骤(3)两次以上。
(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表面保持湿润。
(3)在盖玻片的一角加入 100 μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)37℃孵育细胞 2-20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2-3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5-10 min,然后吸干培养基,但要使表面保持湿润。
样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。
暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。
杂志名称: Cell Death & Disease | 作者: Meng, **angrui, et al.
IF: 8 | 发表时间: 2024
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