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DiO(DiOC18(3))

DiO (DiOC18(3))

产品货号
BMD0072

产品特点:

  • 高纯度黄色固体,分子量 882 kDa,易溶于无水 DMSO、乙醇或 DMF,溶解度可达 10 mg/mL
  • λEXEm 484/501 nm,绿色荧光信号清晰,背景低,兼容常见 FITC 滤光片组
  • 亲脂插入机制不破坏膜结构,适用于活细胞长时间动态追踪或固定细胞共定位实验
  • 4 ℃避光保存 12 个月稳定,冰袋运输,即用即配,实验流程简洁
  • 选择规格

    10 mg
    ¥589
    现货(当天发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    亚科因生物推出的DiO (DiOC18(3))是一种绿色荧光亲脂性羰花青染料,专为细胞膜及细胞器膜标记而设计。该试剂以黄色固体形式提供,可在无水溶剂中快速溶解,通过简单孵育即可实现对活细胞或固定细胞膜的均匀染色,为细胞器提取、膜流动性研究及细胞追踪实验提供高对比度荧光信号。

    DiOC18(3)(3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)是一种经典的亲脂性膜探针,其分子结构包含两条长链烷基尾部,可稳定插入脂质双层而不破坏膜完整性。在水相环境中,DiO 荧光极弱;一旦嵌入膜结构,其荧光强度与光稳定性显著提升,激发/发射波长分别为 484 nm / 501 nm(甲醇体系),呈现明亮的绿色荧光。该特性使其成为观察线粒体、内质网、高尔基体等膜性细胞器形态与动态变化的理想工具。

    应用领域

    DiO 广泛应用于细胞器提取与染色、细胞膜流动性分析、细胞迁移与侵袭研究、外泌体或囊泡标记、神经轴突示踪及多色荧光共定位成像等细胞生物学实验场景。

    DiO(DiOC18(3))

    产品参数

    中文名称 DiO(DiOC18(3))
    英文名称 DiO (DiOC18(3))
    产品货号 BMD0072
    分子式 C53H85ClN2O6
    产品形式 黄色固体
    分子量 882 kDa
    注意事项 • 可溶于无水乙醇、无水 DMSO 和无水 DMF,在无水 DMSO 中的溶解度约为 10 mg/mL。较难溶解时,可以适当加热或者超声处理。
    保存建议 4℃,避光保存 12 个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 荧光显微镜或流式细胞仪
    • 可调节式移液枪及枪头
    • DMSO
    • DMF
    • EtOH

    实验步骤

    1. 染色液制备

    (1)配制储液:储液用无水 DMSO、无水 DMF 或 EtOH 配制,浓度 1-5 mM。DiO 在无水 DMSO 和无水 DMF 中的溶解度比在 EtOH中的溶解度高。

    注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融;发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。

    (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1-30 μM的工作液。最常用的工作液浓度为 5-10 μM。

    注意:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的 10倍范围内开始最优浓度的摸索。

    2. 悬浮细胞染色

    (1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106/mL。

    (2)37℃孵育细胞 2-20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。

    (3)孵育结束,1,000-1,500 rpm离心 5 min。倾倒上清液,再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。

    (4)重复步骤(3)两次以上。

    3. 贴壁细胞染色

    (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

    (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表面保持湿润。

    (3)在盖玻片的一角加入 100 μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

    (4)37℃孵育细胞 2-20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。

    (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2-3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5-10 min,然后吸干培养基,但要使表面保持湿润。

    4. 结果检测

    样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。

    注意事项

    • 本品是粉末状或者沾壁固体,这是由于生产工艺的不同导致的,不影响使用;使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
    • DiO 染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在 PBS中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
    • 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
    • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    常见问题

    暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。

    文献引用

    Intracellular C5aR1 inhibits ferroptosis in glioblastoma through METTL3-dependent m6A methylation of GPX4.

    杂志名称: Cell Death & Disease | 作者: Meng, **angrui, et al.

    IF: 8 | 发表时间: 2024

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