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Calcein AM

Calcein AM

产品货号
BMD0064

产品特点:

  • λEXEm = 494/517 nm(pH 8),绿色荧光信号明亮且稳定
  • 极低细胞毒性,适合长时间活细胞动态观察
  • 可与 PI 联用,实现活细胞/死细胞双色区分
  • 固体形式,-20 °C 避光保存 12 个月,运输采用冰袋(蓝冰)
  • 选择规格

    1 mg
    ¥2206
    期货(4天内发货)
    10 mg
    ¥16580
    期货(4天内发货)
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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    Calcein AM 是一种专为活细胞荧光标记设计的细胞膜可穿透探针,进入细胞后由胞内酯酶水解生成 Calcein,从而被滞留在胞质中并发出绿色荧光(λEXEm 494/517 nm,pH 8)。因其极低的细胞毒性,Calcein AM 常被与碘化丙啶(PI)联用,实现活细胞与死细胞的双重染色

    Calcein AM 的分子式为 C46H46N2O23,分子量约 995 kDa,呈灰白色固体,可溶于 DMSO。其非荧光酯化形式能自由穿过活细胞膜;进入胞内后,胞质酯酶迅速水解 AM 酯键,释放出带负电荷且膜不可通透的 Calcein,后者与胞内金属离子螯合后发出稳定绿色荧光。由于死细胞缺乏活性酯酶,Calcein AM 不会在其内累积,因此可精准区分活/死细胞。该探针已广泛应用于细胞器提取与染色、细胞活力评估及流式细胞术等细胞分析场景。

    应用领域

    细胞器提取和染色、细胞活力检测、活细胞成像、流式细胞术、药物筛选及细胞毒性评价等细胞分析研究。

    Calcein AM

    产品参数

    中文名称 Calcein AM
    英文名称 Calcein AM
    产品货号 BMD0064
    分子式 C46H46N2O23
    产品形式 灰白色固体
    分子量 995 kDa
    注意事项 • 可溶于DMSO。
    保存建议 -20℃,避光保存12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 荧光显微镜
    • 可调节式移液枪及枪头
    • PBS

    实验步骤

    1. 用DMSO制备1 mM Calcein AM溶液,并用PBS将其稀释制成1-50 μM Calcein AM溶液。
    2. 注:不同的细胞适用的Calcein AM浓度不同,2 μM Calcein AM适用的细胞有NIH3T3、PtK2、HeLa、MDCK等。

    3. 染色HeLa等贴壁细胞时,先用Trypsin-EDTA等消化细胞,制备成细胞悬液。
    4. 将细胞悬液离心3 min (1,000 rpm),去除上清液,加入PBS缓冲液,细胞数量调整至5×106/mL,再用移液器充分混匀。
    5. 注:由于培养基中的血清等含有酯酶,会分解Calcein AM,导致空白背景数值上升,所以需要离心数次,用PBS洗涤数次直到完全洗净。

    6. 在200 μL细胞悬液中加入50 μL稀释后的Calcein AM溶液,在37℃下孵育15 min。
    7. 在盖玻片上滴加适量的染色的细胞溶液。用490 nm激发波长,515 nm发射波长滤光片的荧光显微镜观察细胞。
    8. 注:如果Calcein AM很难进入细胞,可以使用表面活性剂处理,如Pluronic F127。

    注意事项

    1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
    2. Calcein AM的酯键遇到湿气会分解,使用后请在-20℃下避光密闭冷冻保存,防止水分进入。
    3. Calcein AM储备液稀释后请及时使用,尽量现配现用。
    4. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓淬灭。

    常见问题

    暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。

    文献引用

    Spinal CX3CL1/CX3CR1 May Not Directly Participate in the Development of Morphine Tolerance in Rats

    杂志名称: Neurochem Res | 作者: Peng Y, Guo G, Shu B, et al

    IF: 3 | 发表时间: 2017

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