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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 土壤蔗糖酶（S-SC）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具，可在常规实验室条件下快速测定土壤蔗糖酶活性，为土壤代谢研究提供可靠数据支持。
土壤蔗糖酶（S-SC）能够水解蔗糖生成可被微生物与植物吸收利用的单糖，其活性与土壤有机质、氮、磷含量、微生物数量及土壤呼吸强度密切相关，因此被视为评价土壤肥力的重要生化指标。CheKine™ 土壤蔗糖酶（S-SC）活性检测试剂盒（微量法）基于3,5-二硝基水杨酸（DNS）显色反应：S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，还原糖与 DNS 在碱性条件下反应生成棕红色氨基化合物，在 510 nm 处产生特征吸收峰；在一定范围内，510 nm 吸光度的增加速率与 S-SC 活性成正比，从而实现对土壤蔗糖酶活性的定量分析。
本试剂盒适用于土壤微生物生态、农业科学、环境科学及植物营养学等研究领域，可用于评估不同施肥管理、土地利用方式或环境胁迫下土壤蔗糖酶活性的变化，进而反映土壤碳循环与肥力状况。
| 中文名称 | 土壤蔗糖酶(S-SC)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Saccharase (S-SC) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4057 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤蔗糖酶（S-SC） |
| 检测指标 | 土壤蔗糖酶（S-SC） |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent II：临用前配制；48 T试剂盒向 Reagent II 中加入 13.2 mL去离子水；96 T试剂盒向 Reagent II 中加入 26.4 mL去离子水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存 2周。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
注意：Reagent III 有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。
Standard：临用前配制；加入 1 mL去离子水，充分溶解，即 10 mg/mL葡萄糖标准品；用不完的试剂 4℃避光保存 2周。使用 10 mg/mL葡萄糖标准品，按照下表所示，进一步稀释标准品：
| 序号 | Standard体积（μL） | 去离子水体积（μL） | 浓度（mg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 100 μL of 10 mg/mL Standard | 900 | 1 |
| Std.2 | 80 μL of 10 mg/mL Standard | 920 | 0.8 |
| Std.3 | 60 μL of 10 mg/mL Standard | 940 | 0.6 |
| Std.4 | 40 μL of 10 mg/mL Standard | 960 | 0.4 |
| Std.5 | 500 μL of Std.4 (0.4 mg/mL) | 500 | 0.2 |
| Std.6 | 500 μL of Std.5 (0.2 mg/mL) | 500 | 0.1 |
| Std.7 | 500 μL of Std.6 (0.1 mg/mL) | 500 | 0.05 |
注意：每次实验都要做一次标准品检测；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。
注意：推荐使用新鲜土壤样本。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50目筛。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 510 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 1.5 mL离心管中操作）：
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| 样本（g） | 0.03 | 0.03 | 0 | 0 |
| 甲苯（μL） | 5 | 5 | 0 | 0 |
| 振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15 min | - | - | - | - |
| ReagentⅠ（μL） | 75 | 75 | 0 | 0 |
| Working Reagent II（μL） | 220 | 0 | 0 | 0 |
| 去离子水（μL） | 0 | 220 | 0 | 0 |
| 混匀，37℃水浴 24 h后，10,000 g，4℃离心 5 min，取上清液，下述操作在新的 1.5 mL EP中操作： | - | - | - | - |
| 上清液（μL） | 85 | 85 | 0 | 0 |
| Standard（μL） | 0 | 0 | 85 | 0 |
| 去离子水（μL） | 0 | 0 | 0 | 85 |
| Reagent III（μL） | 215 | 215 | 215 | 215 |
3. 混匀，90℃水浴 5 min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却至室温，用去离子水稀释 10倍（可以吸取 100 μL，加入 900 μL去离子水稀释），取 200 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中，记录 510 nm处吸光值。测定管记为 A 测定，对照管记为 A 对照，标准管记为 A 标准，空白管记为 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：空白孔和标准孔只需做 1-2次，每个测定孔均需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.05 mg/mL的ΔA 标准可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 1 mg/mL的ΔA 标准，上清液可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定代入方程得到 x (mg/mL)。
2. S-SC活性的计算：
酶活单位定义：每天每 g土样中产生 1 mg还原糖定义为一个 S-SC活力单位。
S-SC (U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T×F=3×x÷W
V 反总：酶促反应体积，0.3 mL；T：反应时间，1 d； W：样本质量，g；F：稀释倍数，10。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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