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土壤过氧化氢酶(S-CAT)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Catalase (S-CAT) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
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CheKine™ 土壤过氧化氢酶(S-CAT)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量比色检测工具,可快速定量土壤微生物分泌的过氧化氢酶活性,为研究土壤氧化还原平衡、微生物代谢活性及环境胁迫响应提供可靠数据。
过氧化氢酶(CAT,EC 1.11.1.6)是一类以铁卟啉为辅基的结合酶,能够催化 H2O2 分解为水和分子氧,是细胞内清除活性氧的重要酶类。土壤过氧化氢酶(S-CAT)主要由土壤微生物分泌,在土壤 H2O2 清除系统中扮演关键角色,其活性高低可反映土壤微生物群落代谢强度及土壤健康状态。本试剂盒基于比色法原理,通过检测反应体系中剩余 H2O2 与显色底物的显色变化,间接计算 S-CAT 活性,适用于各类土壤样本。
适用于农业生态、环境科学、土壤微生物学等研究方向,可用于评估不同施肥管理、污染胁迫或气候变化条件下土壤微生物代谢活性变化,为土壤质量评价与改良策略提供依据。
                                    | 中文名称 | 土壤过氧化氢酶(S-CAT)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ | 
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Catalase (S-CAT) Activity Assay Kit | 
| 产品货号 | KTB4050 | 
| 检测类型 | 水土检测 | 
| 检测方法 | 比色法 | 
| 样本类型 | 土壤样本 | 
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent II •Reagent III  | 
                                        
| 分子 | S-CAT | 
| 检测指标 | S-CAT | 
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻 时,需在 4 h 内完成样品解冻。 | 
| 保存建议 | 4℃,避光保存 12 个月。 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
注意:推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h内完成样品解冻。
土壤样本:新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。
注意:无土管只需测定 1次,每个测定管需设置一个无基质管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果(A 无土管-A 测定管)小于 0.01可适当加大样本量。如果(A 无土管-A 测定管)大于 1.5,减少提取用样本量。
1. 酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min,调节波长到 240 nm。紫外分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表(下述操作在 1.5 mL EP管中进行):
| 试剂 | 测定管 | 无基质管 | 无土管 | |
|---|---|---|---|---|
| 风干土样(g) | 0.03 | 0.03 | 0 | |
| Reagent I(μL) | 260 | 0 | 260 | |
| 去离子水(μL) | 0 | 260 | 0 | |
| 25℃振荡培养 20 min | ||||
| Reagent II(μL) | 10 | 10 | 10 | |
| 混匀,8,000 g,25℃离心 5 min,取 180 μL上清至 96孔 UV板或微量石英比色皿中 | ||||
| Reagent III(μL) | 20 | 20 | 20 | |
3. 充分混匀,于 240 nm处测定各管吸光度,分别记为 A 测定、A 无基质、A 无土。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
单位的定义:每天每 g风干土样催化 1 μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
S-CAT(U/g 土样)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=33×(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L/mol/cm;d:96孔 UV板光径,0.5 cm;T:反应时间,20 min=1/72 d;W:样本质量,0.03 g。
单位的定义:每天每 g风干土样催化 1 μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
S-CAT(U/g 土样)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=16.5×(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;T:反应时间,20 min=1/72 d;W:样本质量,0.03 g。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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