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土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Glutaminase (S-GLS) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活测定工具,通过奈氏试剂显色反应,可快速定量土壤中谷氨酰胺酶催化谷氨酰胺水解生成氨的速率,从而准确反映土壤氮素代谢强度。
土壤谷氨酰胺酶(soil glutaminase,S-GLS)广泛分布于高等动物、部分细菌及植物根系,是调控氮循环的关键酶之一,负责将谷氨酰胺分解为L-谷氨酸与游离氨,直接影响土壤氨浓度及后续尿素代谢。CheKine™ 试剂盒利用S-GLS的催化特性,在微量体系中加入底物谷氨酰胺,反应后产生的氨与奈氏试剂形成棕黄色络合物,于420 nm处测定吸光度变化,通过标准曲线换算即可得出酶活值。
适用于土壤微生物学、植物营养学、环境科学等研究方向,可用于评估不同施肥措施、植被类型或气候变化对土壤氮转化效率的影响,为精准农业管理、生态修复及碳氮循环模型提供数据支持。
| 中文名称 | 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Glutaminase (S-GLS) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4031 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent V •Reagent VI •Standard |
| 分子 | 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) |
| 检测指标 | 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
注意:Reagent III 有刺激性气味,Reagent IV 有腐蚀性,Reagent VI 有毒,建议在通风橱进行实验。
注意:每次实验都要做一次标准品检测;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。
注意:推荐使用新鲜土壤样本。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| 样本(g) | 0.1 | 0.1 | 0 | 0 |
| 甲苯(μL) | 25 | 25 | 0 | 0 |
| 震荡混匀,室温静置 15 min。 | 0 | 0 | - | - |
| Reagent I(μL) | 100 | 100 | 0 | 0 |
| Working Reagent II(μL) | 400 | 0 | 0 | 0 |
| 去离子水(μL) | 0 | 400 | 0 | 0 |
| 混匀后,37℃孵育 2 h。 | 0 | 0 | - | - |
| Reagent III(μL) | 525 | 525 | 0 | 0 |
| 混匀后,8,000 g,25℃离心 10 min,取上清。下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中依次进行: | - | - | - | - |
| 上清液(μL) | 130 | 130 | 0 | 0 |
| 0.3125 μmol/mL Standard(μL) | 0 | 0 | 130 | 0 |
| 去离子水(μL) | 0 | 0 | 0 | 130 |
| Reagent IV(μL) | 30 | 30 | 30 | 30 |
| Reagent V(μL) | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Reagent VI(μL) | 20 | 20 | 20 | 20 |
立即混匀震荡 5 s,记录 420 nm处吸光值,空白管记为 A 空白,标准管记为 A 标准,测定管记为 A 测定,对照管记为 A 对照。计算ΔA 测定 = A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意:(1)空白管和标准管只需做 1-2次,每个测定管均需设置一个对照管。(2)实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.8,减少样本量。(3)加入 Reagent VI 后立即混匀震荡 5 s需测定吸光值,为了避免实验误差,建议每次检测不超过 3个样本孔。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
酶活单位定义:37℃每克土样每分钟催化谷氨酰胺生成 1 nmol氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(U/g 土样)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷W÷T×1,000=2.734×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准:标准浓度,0.3125 μmol/mL;V 反总:反应体系总体积,1.05 mL;T:反应时间,2 h=120 min;W:样本质量,g;1,000:换算系数,1 μmol=1,000 nmol。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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