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土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Glutaminase (S-GLS) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4031

产品特点:

  • 验证样本类型齐全,适配多种土壤(农田、林地、湿地等)
  • 微量法设计,节约试剂与样本用量,操作步骤简洁
  • 奈氏试剂显色体系稳定,结果重复性好
  • 4 ℃避光保存6个月,冰袋运输保障组分活性
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥469
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥926
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活测定工具,通过奈氏试剂显色反应,可快速定量土壤中谷氨酰胺酶催化谷氨酰胺水解生成氨的速率,从而准确反映土壤氮素代谢强度。

    土壤谷氨酰胺酶(soil glutaminase,S-GLS)广泛分布于高等动物、部分细菌及植物根系,是调控氮循环的关键酶之一,负责将谷氨酰胺分解为L-谷氨酸与游离氨,直接影响土壤氨浓度及后续尿素代谢。CheKine™ 试剂盒利用S-GLS的催化特性,在微量体系中加入底物谷氨酰胺,反应后产生的氨与奈氏试剂形成棕黄色络合物,于420 nm处测定吸光度变化,通过标准曲线换算即可得出酶活值。

    应用领域

    适用于土壤微生物学、植物营养学、环境科学等研究方向,可用于评估不同施肥措施、植被类型或气候变化对土壤氮转化效率的影响,为精准农业管理、生态修复及碳氮循环模型提供数据支持。

    土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Glutaminase (S-GLS) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4031
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ
    •Reagent Ⅳ
    •Reagent V
    •Reagent VI
    •Standard
    分子 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)
    检测指标 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 420 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管
    • 水浴锅、低温离心机、30-50目筛
    • 去离子水、甲苯

    试剂准备

    • Reagent I:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
    • Working Reagent II:临用前配制;48 T每瓶 Reagent II 加入 25 mL去离子水,96 T每瓶 Reagent II 加入 50 mL去离子水,充分溶解待用。现配现用。
    • Reagent III:即用型;4℃避光保存。
    • Reagent IV:即用型;4℃保存。
    • Reagent V:即用型;4℃保存。
    • Reagent VI:即用型;4℃避光保存。

    注意:Reagent III 有刺激性气味,Reagent IV 有腐蚀性,Reagent VI 有毒,建议在通风橱进行实验。

    • Standard:临用前配制;每瓶加入 1mL去离子水,充分溶解,即 100 μmol/mL氨标准品;用不完的试剂 4℃保存 1个月。
    • 0.3125 μmol/mL标准品:10 µL 100 μmol/mL氨标准品用 3,190 µL 去离子水稀释;使用 0.3125 μmol/mL标准品进行后续检测。

    注意:每次实验都要做一次标准品检测;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 420 nm,可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. 操作表(下述操作在 1.5 mL离心管中操作):
    试剂测定管对照管标准管空白管
    样本(g)0.10.100
    甲苯(μL)252500
    震荡混匀,室温静置 15 min。00--
    Reagent I(μL)10010000
    Working Reagent II(μL)400000
    去离子水(μL)040000
    混匀后,37℃孵育 2 h。00--
    Reagent III(μL)52552500
    混匀后,8,000 g,25℃离心 10 min,取上清。下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中依次进行:----
    上清液(μL)13013000
    0.3125 μmol/mL Standard(μL)001300
    去离子水(μL)000130
    Reagent IV(μL)30303030
    Reagent V(μL)20202020
    Reagent VI(μL)20202020

    立即混匀震荡 5 s,记录 420 nm处吸光值,空白管记为 A 空白,标准管记为 A 标准,测定管记为 A 测定,对照管记为 A 对照。计算ΔA 测定 = A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:(1)空白管和标准管只需做 1-2次,每个测定管均需设置一个对照管。(2)实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.8,减少样本量。(3)加入 Reagent VI 后立即混匀震荡 5 s需测定吸光值,为了避免实验误差,建议每次检测不超过 3个样本孔。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    S-GLS活性的计算

    酶活单位定义:37℃每克土样每分钟催化谷氨酰胺生成 1 nmol氨定义为一个酶活力单位。

    S-GLS(U/g 土样)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷W÷T×1,000=2.734×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W

    C 标准:标准浓度,0.3125 μmol/mL;V 反总:反应体系总体积,1.05 mL;T:反应时间,2 h=120 min;W:样本质量,g;1,000:换算系数,1 μmol=1,000 nmol。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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