土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB4030
Price: 539 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Soil Amylase (S-AL) Activity Assay Kit

产品货号

KTB4030

产品特点：

专为土壤样本优化，可直接测定土壤悬液或土壤浸提液中的 S-AL 活性

微量法设计，节省试剂与样本，适配 96 孔板高通量检测

提供完整的 Reagent Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 及 Standard，附详细样品制备与结果计算流程

显色稳定，540 nm 读板即可，无需昂贵设备

冰袋运输，4 °C 避光保存，有效期 12 个月

选择规格

48 T/48 S

¥539

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥898

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 土壤淀粉酶（S-AL）活性检测试剂盒(微量法)（CheKine™ Micro Soil Amylase (S-AL) Activity Assay Kit）是一套基于比色法、专为土壤样本设计的微量检测系统，可在常规实验室条件下快速测定土壤淀粉酶（S-AL）活性，为土壤微生物代谢活性及碳循环研究提供可靠数据。

背景与原理

淀粉酶（EC 3.2.1.1）是催化淀粉水解生成还原糖的一类水解酶，土壤中的淀粉酶活性主要来源于土壤微生物。本试剂盒利用淀粉酶水解淀粉产生还原糖，还原糖再与3,5-二硝基水杨酸（DNS）反应生成红棕色络合物，该产物在540 nm处具有特征吸收峰。在一定范围内，540 nm 吸光度值与还原糖生成量成正比，从而间接反映土壤淀粉酶（S-AL）活性。

应用领域

本试剂盒适用于土壤生态学、农业科学、环境微生物学及碳循环研究，可用于评估不同施肥、耕作或污染条件下土壤微生物活性，也可作为土壤健康与肥力评价的辅助指标。

产品参数

中文名称	土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Soil Amylase (S-AL) Activity Assay Kit
产品货号	KTB4030
检测类型	水土检测
检测方法	比色法
样本类型	土壤样本
试剂盒组分	• ReagentⅠ • ReagentⅡ •ReagentⅢ •Standard
分子	S-AL
检测指标	S-AL
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 540 nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温水浴锅、恒温摇床、台式离心机、30-50目筛
去离子水、甲苯

试剂准备

ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Working ReagentⅡ：临用前配制，48 T加入 7.2 mL去离子水，96 T加入 14.4 mL去离子水，置于 70℃水浴，期间不断搅拌或震荡至溶解。用不完的试剂 4℃保存一周。
ReagentⅢ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

试剂盒组分

试剂盒组分	规格	储存条件
ReagentⅠ	12 mL (48 T) 24 mL (96 T)	4℃
ReagentⅡ Powder	×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T)	4℃
ReagentⅢ	15.6 mL (48 T) 31.2 mL (96 T)	4℃
Standard Powder	×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T)	4℃，避光保存

注意：ReagentⅢ有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。

标准品制备：

Standard：临用前配制，加入 1 mL去离子水配成 10 mg/mL的葡萄糖标准液；4℃避光保存 2周。按照下表所示，进一步稀释标准品：

序号	10 mg/mL Standard (µL)	去离子水的体积 (µL)	浓度 (mg/mL)
Std.1	40	160	2
Std.2	20	180	1
Std.3	10	190	0.5
Std.4	5	195	0.25
Std.5	2.5	197.5	0.125
Std.6	1.25	198.75	0.063
Blank	0	200	0

注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50目筛。

实验步骤

酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 540 nm。可见分光光度计用去离子水调零。

操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：

试剂	对照管（μL）	测定管（μL）	标准管（μL）	空白管（μL）
风干土样（g）	0.04	0.04	0	0
甲苯	20	20	0	0
25℃静置	15 min	15 min	-	-
ReagentⅠ	100	100	0	0
Working ReagentⅡ	0	120	0	0
去离子水	120	0	0	0
混匀，37℃恒温摇床震荡 24 h，25℃，8,000 rpm，离心 10 min，取上清	-	-	-	-
样本上清	120	120	0	0
Standard	0	0	120	0
去离子水	0	0	0	120

充分混匀，90℃水浴 5 min，待冷却后，取 200 μL至微量玻璃比色皿/96孔板中测定 540 nm吸光值，分别记为 A 对照、A 测定、A 标准、A 空白，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：1. 空白孔和标准孔只需测定 1次，每次试验需设置对照组。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。2. 每次实验 90℃水浴后的冷却时间保持一致，请于 30 min内完成测定。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 标准曲线的绘制：

以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (mg/mL)。

2. 酶活的计算：

单位的定义：每天每 g土样产生 1 mg还原糖定义为一个土壤淀粉酶活力。

S-AL(U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=6×x

V 反总：酶促反应总体积，0.24 mL；W：土样质量，0.04 g；T：反应时间，1 d。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。