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土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Lipase (S-LPS) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4026

产品特点:

  • 样本兼容广:经验证适用于多种土壤类型,包含农田、林地、湿地及草地等
  • 操作极简:微量法设计,只需常规移液与孵育步骤,90 min 内完成检测
  • 组分齐全:提供 Reagent I、Reagent II、Reagent III 及标准品,开箱即可实验
  • 稳定易存:4 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输,实验室日常储存无压力
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥369
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥658
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活测定工具,可在常规实验室条件下快速评估土壤脂肪酶(S-LPS)的催化活力,为研究土壤碳/脂代谢、微生物活性及生态功能提供可靠数据。

    背景与原理

    脂肪酶(LPS)又称甘油酯水解酶,能够催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或甘油二酯和单酯),是土壤有机质分解与碳循环过程中的关键限速酶之一。CheKine™ 土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒(微量法)基于铜皂法:LPS 在反应体系中催化油酯水解生成游离脂肪酸,脂肪酸与铜离子形成紫色铜皂,在特定波长下测定吸光度变化,即可根据脂肪酸生成速率计算土壤 LPS 活性。该方法无需复杂前处理,适用于各类新鲜或低温保存的土壤样本。

    应用领域

    广泛应用于土壤微生物生态学、农业施肥管理、环境污染修复及土壤健康评价等研究场景,尤其适合监测土壤碳/脂代谢动态、评估微生物活性变化及筛选高效降解菌群。

    土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Lipase (S-LPS) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4026
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ
    •Standard
    分子 土壤脂肪酶(S-LPS)
    检测指标 土壤脂肪酶(S-LPS)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 710 nm处的吸光度)
    • 恒温箱、震荡混匀器、制冰机、低温离心机、30-50目筛
    • 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯材质)或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水、甲苯
    • 匀浆器

    试剂准备

    • ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
    • ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温,每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20 min;4℃避光保存。
    • ReagentⅢ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
    • Standard:临用前配制;加入 3.168 mL甲苯,充分溶解即为 10 µmol/mL 的油酸标准溶液;用不完的试剂可以 4℃保存一个月。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    鲜土自然风干或 37℃风干,过 30-50目筛。称取约 0.1g土样,加入 1 mL Reagent I 进行冰浴匀浆,再室温振荡提取 15 min,4℃,4,000 g离心 10 min,取上清待测。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min,调节波长到 710 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. Reagent I 和 Reagent II 置于 37℃水浴中预热 30 min以上。
    3. 操作表(下述操作在 1.5 mL EP管中进行):
    试剂空白管(μL)测定管(μL)标准管(μL)
    去离子水15000
    样本0500
    Reagent I3003000
    Reagent II01000
    37℃振荡反应 20 min
    甲苯8008000
    37℃振荡反应 10 min后,8,000 g,25℃,离心 10 min,取上清液
    上清液4004000
    10 µmol/mL Standard00400
    Reagent III100100100
    37℃振荡反应 5 min后,室温 4,000 g离心 10 min,取 200 μL上层液加入微量玻璃比色皿或 96孔石英板/玻璃板(非聚苯乙烯材质),于 710 nm处测定吸光值,分别记为 A 空白、A 测定和 A 标准。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量,如果ΔA 测定大于 1.0,样本可用 Reagent I 进一步稀释或者将第一步甲苯(800 μL)萃取后样本用甲苯进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    活性单位定义:37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1 μmol脂肪酸为一个酶活单位。

    S-LPS (U/g Soil)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T=8×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W

    C 标准:标准品的浓度,10 µmol/mL;V 反总:甲苯萃取体积,0.8 mL;V 样:反应中加入样本体积,0.05 mL;V 样总:加入 Reagent I 体积,1 mL;W:样本质量,g;T:催化反应时间,20 min。

    注意事项

    1. 甲苯有毒,实验过程中需佩戴手套和口罩,建议在通风橱中操作。
    2. 实验过程中须远离火源。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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