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土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil β-Xylosidase (S-β-XYS) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具,可在微孔板体系内快速、定量地测定β-木糖苷酶活性,为土壤碳循环及微生物功能研究提供可靠数据。
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)广泛分布于植物根系、细菌及真菌细胞壁,是木聚糖半纤维素降解途径中的关键限速酶,其催化产物木糖可作为微生物发酵的重要碳源。该酶在造纸工业中还可作为环保型生物漂白剂,替代传统含氯漂白工艺,降低环境污染。
本试剂盒以对硝基苯酚-β-D-木糖苷(pNPX)为底物,β-木糖苷酶水解底物后释放对硝基苯酚(pNP),后者在405 nm处具有特征吸收峰。通过连续监测405 nm吸光度的上升速率,即可计算样本中β-木糖苷酶的活性。
适用于土壤学、环境科学、农业生态及微生物功能组学等研究方向,可用于:
| 中文名称 | 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil β-Xylosidase (S-β-XYS) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4025 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS) |
| 检测指标 | 土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
ReagentⅠ:临用前配制;每瓶加入 5 mL 去离子水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃避光保存 1个月。
ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅢ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Standard:即用型,5 μmol/mL对硝基苯酚标准溶液;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
0.1 μmol/mL Standard:临用前配制;取 20 µL Standard,加入 980 µL ReagentⅡ,充分混匀,配制成 0.1 μmol/mL Standard。
注意:每次实验都需要制备 0.1 μmol/mL Standard,稀释后的 0.1 μmol/mL Standard需在 4 h内使用完。
注意:推荐使用新鲜土壤样本。
鲜土自然风干或 37℃风干,过 30-50目筛。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min,调节波长到 405 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表(下述操作在 1.5 mL EP管):
| 试剂 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| Sample (g) | 0.02 | 0.02 | 0 | 0 |
| 甲苯(μL) | 10 | 10 | 0 | 0 |
| 室温振荡混匀 | 15 min | 90℃振荡混匀 15 min | 0 | 0 |
| ReagentⅠ(μL) | 80 | 0 | 0 | 0 |
| 去离子水(μL) | 0 | 80 | 0 | 0 |
| ReagentⅡ | 100 | 100 | 0 | 0 |
| 混匀,45℃水浴 1 h后,沸水浴 5 min,(盖紧,防止水分蒸发),立即冷却至室温。10,000 g,25℃离心 10 min,取上清液 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 上清(μL) | 100 | 100 | 0 | 0 |
| 0.1 μmol/mL Standard (μL) | 0 | 0 | 100 | 0 |
| 去离子水(μL) | 0 | 0 | 0 | 100 |
| ReagentⅢ(μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
| 混匀,室温静置 2 min,10,000g,25℃离心 10 min,取 200 μL上清至 96孔板或微量玻璃比色皿,405 nm处测定吸光值,分别记为 A 对照、A 测定、A 标准和 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准-A 空白 | - | - | - | - |
注意:标准管和空白管只需测 1-2次,每个测定管需设一个对照管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量,如果ΔA 测定大于 0.8,上清可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少样本量。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
活性单位定义:每克土样每天催化产生 1 μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
S-β-XYS (U/g Soil)=ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准×V 反总÷W÷T=0.456×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准:标准品浓度,0.1 μmol/mL ;V 反总:反应总体积,0.19 mL;W:样本质量,g;T:反应时间,1 h=1/24 d。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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