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胰蛋白酶活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Trypsase Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 胰蛋白酶活性检测试剂盒(微量法) (CheKine™ Micro Trypsase Activity Assay Kit) 是一款专为细胞代谢研究设计的微量比色试剂盒,通过监测胰蛋白酶对底物 TAME 的催化水解反应,快速、定量地测定动植物组织样本中的胰蛋白酶活性。
胰蛋白酶(Trypsase)是一种丝氨酸蛋白酶,能选择性水解变性蛋白质中赖氨酸或精氨酸羧基端肽键,在消化、炎症反应及组织修复过程中发挥关键作用。临床上,胰蛋白酶亦被用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡及创伤性损伤等所致局部水肿、血肿和脓肿的辅助治疗。
CheKine™ 胰蛋白酶活性检测试剂盒(微量法)以TAME(Nα-对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐)为底物,胰蛋白酶催化其酯键水解,释放出游离羧基并与体系中的 NaOH 发生中和反应,导致 pH 值下降。以苯酚红为酸碱指示剂,通过测定 555 nm 处吸光度的降低值,即可反映胰蛋白酶的活性;在一定范围内,555 nm 吸光度的下降与酶活性呈良好线性关系。
本试剂盒适用于细胞代谢研究、消化生理机制探索、炎症及创伤修复模型评估,以及药物对胰蛋白酶活性调控的体外筛选等场景。
| 中文名称 | 胰蛋白酶活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Trypsase Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB2320 |
| 检测类型 | 氨基酸代谢 |
| 试剂盒组分 | •Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ |
| 分子 | Trypsase |
| 检测指标 | Trypsase |
| 注意事项 | • 推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent :临用前配制;根据用量按照 ReagentⅠ(V):Reagent II(V):去离子水(V):Reagent III(V)=1 mL:1 mL:5.4 mL:0.4 mL的比例充分混合,现配现用。用多少配多少,在空瓶中配制,48 T中带有 2个空瓶,96 T中带有 4个空瓶。
注意:建议使用新鲜样本。如果不立即使用,可将样品在-80℃下保存一个月。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h内完成样品解冻。
组织:称取约 0.1 g样本,加入 1 mL Extraction Buffer,冰浴匀浆,10,000 g,4℃离心 10 min,取上清液,即粗酶液,置冰上待测。
| 试剂 | 测定孔(μL) |
|---|---|
| 样本 | 5 |
| Working Reagent | 195 |
3. 混匀后立即测定,记录 555 nm下 1 min时的吸光值 A1和 2 min时的吸光值 A2。计算△A=A1-A2。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活单位定义:室温下每毫克蛋白质每分钟催化 555 nm处吸光值减少 0.5为 1个酶活单位。
(2)按样本鲜重计算:
酶活单位定义:室温下每克组织每分钟催化 555 nm处吸光值减少 0.5为 1个酶活单位。
Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:组织质量,g;V1:加入反应体系中粗酶液体积,5 μL=0.005 mL;V2:粗酶液总体积,1 mL;V 反总:反应总体积,0.2 mL;T:反应时间,1 min。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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