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组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Tissue and Blood Alkaline Phosphatase (AKP/ALP) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法的微量体系试剂盒,可在 96 孔板内快速、定量地测定组织匀浆、血浆、血清、尿液或纯化酶液中的 AKP/ALP 活性,为细胞代谢与脂肪酸代谢研究提供可靠数据。
碱性磷酸酶(AKP/ALP)是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性条件下可催化多种磷脂单酯的水解反应,其活性变化与肝脏、骨骼、肾脏等组织的代谢状态密切相关。本试剂盒利用 AKP/ALP 催化底物水解后释放的游离磷酸根与显色体系(Chromogen A/B/C)反应,生成黄色产物,在 405 nm 处具有特征吸收峰。吸光度变化与酶活性成正比,从而实现对 AKP/ALP 活性的定量检测。
广泛应用于细胞代谢、脂肪酸代谢、肝脏功能评价、骨代谢研究及药物筛选等基础科研场景。
| 中文名称 | 组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Tissue and Blood Alkaline Phosphatase (AKP/ALP) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1700 |
| 检测类型 | 脂肪酸代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • Chromogen A • Chromogen B • Chromogen C • Standard |
| 分子 | AKP/ALP |
| 检测指标 | AKP/ALP |
| 注意事项 | • 该产品仅供科学研究使用,不适用于临床诊断。有关危险和安全处理信息,请参阅安全数据表。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。 • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • Chromogen A、Chromogen B和Chromogen C均需避光保存。Chromogen C变蓝绿色后不能再使用。 • 加入Chromogen C后必须立即混匀,否则显色不完全。 |
| 保存建议 | 收到货后,请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件,自发货之日起,按照推荐的保存条件,有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 60 mL (48 T) 120 mL (96 T) | 4℃ |
| Chromogen A | 2.5 mL (48 T) 5 mL (96 T) | 4℃,避光保存 |
| Chromogen B | 2.5 mL (48 T) 5 mL (96 T) | 4℃,避光保存 |
| Chromogen C | 7.5 mL (48 T) 15 mL (96 T) | 4℃,避光保存 |
| Standard | 0.5 mL | 4℃ |
Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Chromogen A:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
Chromogen B:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
Chromogen C:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
Standard:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
注意:Chromogen A和 Chromogen C有毒,Standard有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。
注意:推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存 1个月。
注意:如需测定蛋白浓度,推荐使用 Abbkine货号:KTD3001的蛋白质定量试剂盒(BCA法)进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 空白孔(μL) | 标准孔(μL) | 对照孔(μL) | 测定孔(μL) |
|---|---|---|---|---|
| 去离子水 | 4 | 0 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 4 | 0 | 0 |
| Sample | 0 | 0 | 0 | 4 |
| Chromogen A | 40 | 40 | 40 | 40 |
| Chromogen B | 40 | 40 | 40 | 40 |
混匀后置于 37℃孵育 15 min
| 试剂 | 空白孔(μL) | 标准孔(μL) | 对照孔(μL) | 测定孔(μL) |
|---|---|---|---|---|
| Chromogen C | 120 | 120 | 120 | 120 |
| Sample | 0 | 0 | 4 | 0 |
混匀后于 510 nm测定吸光度,其中标准和空白只需做一个,每个样本均需设置对照,各孔的吸光度分别记为 A 空白,A 标准,A 对照,A 测定。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。
AKP/ALP (U/mg prot)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷(Cpr×V 样)÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)÷Cpr
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。
AKP/ALP(U/g鲜重)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷(W÷V 提取×V 样)÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)÷W
活性单位定义:37℃中每毫升血液或尿液每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。
AKP/ALP (U/mL)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷V 样÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)
C 标准品:标准品的浓度,2 μmol/mL;V 样:加入反应体系中上清液体积,0.004 mL;T:反应时间,15 min;V 提取:加入提取液体积,1 mL;W:样本鲜重,g;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
杂志名称: Cancer letters | 作者: Zhang Y, Zhang X X, Ye M X, et al
IF: 6 | 发表时间: 2018
杂志名称: ORIGINAL RESEARCH | 作者: Jing Sun,Mingqiang Chen,Zhengyi Fu,Jingru Yang,Zhenhua Ma
IF: 4 | 发表时间: 2021
杂志名称: Endocrine | 作者: JH Chen, C Shen, H Oh
IF: 3 | 发表时间: 2021
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