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组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Tissue and Blood Alkaline Phosphatase (AKP/ALP) Activity Assay Kit

产品货号
KTB1700

产品特点:

  • 兼容组织裂解液、血浆、血清、尿液及纯化酶液等多种样本类型,满足细胞代谢研究多样化需求。
  • 微量法设计,样本消耗低,适合珍贵或有限样本的高通量检测。
  • 试剂盒组分独立包装,避光保存条件下有效期长达 12 个月,实验流程与计算公式详尽精炼,降低操作误差。
  • 选择规格

    48 T/24 S
    ¥198
    现货(当天发货)
    96 T/48 S
    ¥326
    现货(当天发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法的微量体系试剂盒,可在 96 孔板内快速、定量地测定组织匀浆、血浆、血清、尿液或纯化酶液中的 AKP/ALP 活性,为细胞代谢与脂肪酸代谢研究提供可靠数据。

    碱性磷酸酶(AKP/ALP)是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性条件下可催化多种磷脂单酯的水解反应,其活性变化与肝脏、骨骼、肾脏等组织的代谢状态密切相关。本试剂盒利用 AKP/ALP 催化底物水解后释放的游离磷酸根与显色体系(Chromogen A/B/C)反应,生成黄色产物,在 405 nm 处具有特征吸收峰。吸光度变化与酶活性成正比,从而实现对 AKP/ALP 活性的定量检测。

    应用领域

    广泛应用于细胞代谢、脂肪酸代谢、肝脏功能评价、骨代谢研究及药物筛选等基础科研场景。

    组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Tissue and Blood Alkaline Phosphatase (AKP/ALP) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB1700
    检测类型 脂肪酸代谢
    检测方法 比色法
    试剂盒组分 • Extraction Buffer
    • Chromogen A
    • Chromogen B
    • Chromogen C
    • Standard
    分子 AKP/ALP
    检测指标 AKP/ALP
    注意事项 • 该产品仅供科学研究使用,不适用于临床诊断。有关危险和安全处理信息,请参阅安全数据表。
    • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
    • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。
    • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。
    • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    • Chromogen A、Chromogen B和Chromogen C均需避光保存。Chromogen C变蓝绿色后不能再使用。
    • 加入Chromogen C后必须立即混匀,否则显色不完全。
    保存建议 收到货后,请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件,自发货之日起,按照推荐的保存条件,有效期为12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 510 nm处的吸光度)
    • 恒温箱、制冰机、低温离心机
    • 96孔板或微量玻璃比色皿
    • 可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水
    • 匀浆器(如果是组织样本)

    试剂准备

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    Extraction Buffer60 mL (48 T)
    120 mL (96 T)
    4℃
    Chromogen A2.5 mL (48 T)
    5 mL (96 T)
    4℃,避光保存
    Chromogen B2.5 mL (48 T)
    5 mL (96 T)
    4℃,避光保存
    Chromogen C7.5 mL (48 T)
    15 mL (96 T)
    4℃,避光保存
    Standard0.5 mL4℃

    Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Chromogen A:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    Chromogen B:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    Chromogen C:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    Standard:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    注意:Chromogen A和 Chromogen C有毒,Standard有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存 1个月。

    1. 组织样本:称取约 0.1 g样本,加入 1 mL Extraction Buffer,冰浴匀浆,10,000 rpm,4℃离心 10 min,取上清液,置冰上待测。
    2. 血清(浆):血浆和血清可以直接用于测定。血浆制备时不能用 EDTA和柠檬酸盐,可用其它抗凝剂。
    3. 尿液:直接测定。

    注意:如需测定蛋白浓度,推荐使用 Abbkine货号:KTD3001的蛋白质定量试剂盒(BCA法)进行样本蛋白质浓度测定。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 510 nm,可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. 按照下表进行加样及反应:
    试剂空白孔(μL)标准孔(μL)对照孔(μL)测定孔(μL)
    去离子水4000
    Standard0400
    Sample0004
    Chromogen A40404040
    Chromogen B40404040

    混匀后置于 37℃孵育 15 min

    试剂空白孔(μL)标准孔(μL)对照孔(μL)测定孔(μL)
    Chromogen C120120120120
    Sample0040

    混匀后于 510 nm测定吸光度,其中标准和空白只需做一个,每个样本均需设置对照,各孔的吸光度分别记为 A 空白,A 标准,A 对照,A 测定。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 按蛋白浓度计算

    活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。

    AKP/ALP (U/mg prot)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷(Cpr×V 样)÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)÷Cpr

    2. 按样本鲜重计算

    活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。

    AKP/ALP(U/g鲜重)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷(W÷V 提取×V 样)÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)÷W

    3. 按液体体积计算

    活性单位定义:37℃中每毫升血液或尿液每分钟催化产生 1 μmol酚为一个酶活力单位。

    AKP/ALP (U/mL)=[C 标准品×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)×V 样]÷V 样÷T=0.133×(A 测定-A 对照)÷(A 标准-A 空白)

    C 标准品:标准品的浓度,2 μmol/mL;V 样:加入反应体系中上清液体积,0.004 mL;T:反应时间,15 min;V 提取:加入提取液体积,1 mL;W:样本鲜重,g;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    FBW7 loss promotes epithelial-to-mesenchymal transition in non-small cell lung cancer through the stabilization of Snail protein

    杂志名称: Cancer letters | 作者: Zhang Y, Zhang X X, Ye M X, et al

    IF: 6 | 发表时间: 2018

    A comparative study on low and high salinity tolerance of two strains of Pinctada fucata

    杂志名称: ORIGINAL RESEARCH | 作者: Jing Sun,Mingqiang Chen,Zhengyi Fu,Jingru Yang,Zhenhua Ma

    IF: 4 | 发表时间: 2021

    Exendin-4, a glucagon-like peptide receptor agonist, facilitates osteoblast differentiation via connexin43

    杂志名称: Endocrine | 作者: JH Chen, C Shen, H Oh

    IF: 3 | 发表时间: 2021

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