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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 可溶性果胶（WSP）含量检测试剂盒（微量法）是一款专为植物细胞壁研究设计的微量比色检测工具，可在细胞代谢层面快速定量样本中的水溶性果胶（WSP）含量，帮助研究者解析细胞壁重塑、果实软化及逆境响应等关键生理过程。
背景知识扩展
果胶是构成细胞初生壁与中胶层的主要多糖，由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸共同组成，富含半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖及葡萄糖醛酸等单糖单元。它通过 Ca²⁺桥、离子键、氢键、糖苷键、酯键及苯环偶联等方式交联，形成复杂的网络结构，直接决定植物源食品的口感与品质。根据抽提方式不同，果胶可分为水溶性果胶（WSP）、离子结合型果胶（ISP）和共价结合果胶（CSP）。本试剂盒聚焦 WSP：先用稀酸温和提取植物组织中的 WSP，再利用咔唑比色法——果胶水解生成的半乳糖醛酸在浓硫酸中与咔唑发生缩合反应，生成紫红色产物，于 530 nm 处呈现最大吸收峰，吸光度与 WSP 含量呈正相关。
应用领域
植物细胞壁代谢研究、果实成熟软化机制解析、逆境胁迫下细胞壁重塑评估、植物源食品品质改良及功能成分筛选等细胞代谢相关实验。
| 中文名称 | 可溶性果胶(WSP)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soluble Pectin (WSP) Content Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1583 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | WSP |
| 检测指标 | WSP |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Standard：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
1. 细胞壁的提取：取约 0.3 g样本，加入 1 mL 80%乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20 min，冷却至室温，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清。沉淀加入 1.5 mL 80%乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡 2 min左右，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1 mL Reagent I（去除淀粉）浸泡 15 h，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2. WSP的提取：称取烘干的 3 mg CWM ，加入 1mL Reagent II，充分匀浆(若烘干物质质地坚硬，可先研碎后再加入 1 mL Reagent II 匀浆，或者用匀浆器匀浆)。8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min，调节波长到 530 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
2. Reagent III 和 Standard在 37℃预热 10 min以上。
3. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 空白管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 样本 | 50 | 50 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 0 | 50 |
| 去离子水 | 0 | 50 | 50 | 0 |
| Reagent III | 50 | 0 | 50 | 50 |
混匀
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 空白管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 浓硫酸 | 400 | 400 | 400 | 400 |
混匀，95℃水浴 5 min后，冷却至室温，取 200 μL至微量玻璃比色皿或 96孔板中，于 530 nm下测定各管吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 空白、A 标准。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
WSP含量的计算:
WSP (mg/g 干重)=(C 标准×V1)×ΔA 测定÷ΔA 标准÷(W×V1÷V2)×F=0.05×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F
C 标准：标准管浓度，0.05 mg/mL；V1：加入样本体积，0.05 mL；V2：加入提取液体积，1 mL；W：样本干重，g；F：稀释倍数。
1. 最低检测限为 50 μg/g干重。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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