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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 己糖激酶（HK）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可快速、准确地定量测定生物样本中己糖激酶（HK）的活性，为研究细胞糖酵解代谢提供可靠数据支持。
己糖激酶（HK）是葡萄糖分解代谢中的首个限速酶，广泛分布于动物、植物、微生物及培养细胞中。它催化葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖，后者既是糖酵解的入口，也是磷酸戊糖途径的关键节点，因此HK活性直接反映细胞对葡萄糖的利用效率。CheKine™ 己糖激酶（HK）活性检测试剂盒通过WST-8显色系统，在450 nm处检测NADH的生成量，间接定量HK活性，适用于血清（浆）、动植物组织/细胞、细胞上清及细菌等多种样本。
本试剂盒主要用于细胞代谢研究，尤其适用于：
| 中文名称 | 己糖激酶(HK)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Hexokinase (HK) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1123 |
| 检测类型 | 糖酵解代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • Assay Buffer • Substrate Mix • Enzyme Mix • WST-8 • Enhancer • NADH Standard |
| 检测范围 | 31.25-2000μM |
| 分子 | HK |
| 检测指标 | HK |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于-20℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 60 mL (48 T) 60 mL×2 (96 T) | 4℃ |
| Assay Buffer | 16 mL (48 T) 32 mL (96 T) | 4℃ |
| Substrate Mix Powder | ×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T) | 4℃，避光保存 |
| Enzyme Mix | 45 µL (48 T) 90 µL (96 T) | -20℃，避光保存 |
| WST-8 | 400 μL (48 T) 800 µL (96 T) | -20℃，避光保存 |
| Enhancer | 80 µL (48 T) 160 µL (96 T) | -20℃，避光保存 |
| NADH Standard Powder | ×1 vial (48 T) ×2 vials (96 T) | -20℃，避光保存 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Assay Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Substrate Mix：临用前配制，加入 Assay Buffer充分溶解（48 T的试剂盒加 15.2 mL Assay Buffer；96 T试剂盒加 30.4 mL Assay Buffer），未用完的已溶解的 Substrate Mix可 4℃保存一周。若需更长时间保存，请分装后-20℃避光保存 1个月，避免反复冻融。
Enzyme Mix：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。
WST-8：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。
Enhancer：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。
NADH Standard：临用前配制，加 1 mL去离子水，充分溶解得到 2,000 µM标准品，未用完的已溶解的 NADH Standard可 4℃保存一周。若需更长时间保存，请分装后-20℃避光保存 1个月，避免反复冻融。
测定工作液的配制：测定孔每孔配制 190 µL测定工作液：吸取 183 µL Substrate Mix，1 µL Enzyme Mix，5 µL WST-8，1 µL Enhancer。
对照工作液的配制：对照孔每孔配制 190 µL对照工作液：吸取 184 µL Substrate Mix，5 µL WST-8，1 µL Enhancer。工作液需现配现用。
标准曲线设置：按下表所示，用去离子水将 2,000 µM标准品稀释为 2,000、1,000、500、250、125、62.5、31.25 µM的标准溶液。
| 序号 | 标准品体积 | 去离子水体积（µL） | 标准品浓度（µM） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 µL | 0 | 2,000 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1 (2,000 µM) | 100 | 1,000 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (1,000 µM) | 100 | 500 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (500 µM) | 100 | 250 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (250 µM) | 100 | 125 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (125 µM) | 100 | 62.5 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (62.5 µM) | 100 | 31.25 |
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；T：反应时间，5 min；n：样本稀释倍数；W：样品质量，g；500：细菌或细胞总数，500万；V 样：加入样本体积，0.01 mL。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
杂志名称: Phytomedicine | 作者: Cen, Kuan, et al.
IF: 8.300 | 发表时间: 2025
杂志名称: PLoS pathogens | 作者: Sun, Zhe, et al.
IF: 4.900 | 发表时间: 2025
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