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谷胱甘肽S转移酶标签谷胱甘肽树脂-PurKine™

PurKine™ GST-Tag Glutathione Resin

产品货号
BMR2010

产品特点:

  • 高载量:每毫升树脂可结合 ≥20 mg GST标签融合蛋白,满足高表达量需求。
  • 温和洗脱:非变性条件保护蛋白抗原性与功能活性,适合活性研究或后续结构分析。
  • 经济耐用:同一批次树脂可重复再生使用 ≥5 次,性能稳定,降低实验成本。
  • 形式多样:提供散装填料、预装柱及完整试剂盒,适配重力柱、FPLC、HPLC等多种操作场景。
  • 选择规格

    5 mL
    ¥1316
    期货(4天内发货)
    25 mL
    ¥4198
    期货(4天内发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    PurKine™ GST-Tag Glutathione Resin(PurKine™ 谷胱甘肽S转移酶标签谷胱甘肽树脂)是一款专为高效捕获并纯化GST标签融合蛋白而设计的亲和层析介质。它利用谷胱甘肽与GST标签之间的高亲和力,在温和条件下即可实现一步法纯化,广泛适用于大肠杆菌或其他表达系统来源的重组蛋白粗提物。

    背景延伸:谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因融合系统是目前最常用的重组蛋白表达与纯化平台之一。GST标签(约26 kDa)不仅可作为亲和纯化的抓手,还能显著提升目标蛋白的可溶性与稳定性。PurKine™ 树脂通过将还原型谷胱甘肽共价偶联至高度交联的琼脂糖基质,形成稳定的亲和配体,可在pH 6.5–8.5、非变性缓冲体系中特异性结合GST标签。纯化完成后,利用温和的还原型谷胱甘肽洗脱液即可将目标蛋白释放,最大限度保留其天然构象与生物活性;如需去除标签,树脂兼容多种蛋白酶位点,方便后续切割。

    应用领域:重组蛋白表达与纯化、酶学活性测定、蛋白-蛋白/蛋白-配体相互作用研究、抗体或疫苗制备的前期原料获取,以及需要保持蛋白天然构象的功能学研究。

    谷胱甘肽S转移酶标签谷胱甘肽树脂-PurKine™

    产品参数

    中文名称 谷胱甘肽S转移酶标签谷胱甘肽树脂-PurKine™
    英文名称 PurKine™ GST-Tag Glutathione Resin
    产品货号 BMR2010
    标签 谷胱甘肽S转移酶
    产品形式 液体溶液,含50%的填料匀浆,溶液为:20%乙醇溶液。
    储存缓冲液 含有20%乙醇的PBS缓冲液。
    保存建议 从发货之日起,2-8°C可稳定保存一年,不要冻结该产品。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    试剂准备

    建议在使用之前通过 或 滤膜过滤所有缓冲液。对于大多数蛋白质,建议使用以下缓冲液0.22 μm 0.45 μm :

    Binding/Wash Buffer: 140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.4;

    Elution Buffer: 50 mM Tris-HCl, 10 mM Glutathione, pH 8.0;

    注意:可在 Binding/Wash buffer Elution buffer 1-10 mM DTT, 中添加 ,以增加目的蛋白纯度。然而,这可能会导致目的蛋白的产量降低。

    样本制备

    样品在上样前建议离心或 滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。注意不要超过树脂的载量。0.22 μm/0.45 μm

    蛋白纯化流程

    1. 用适量的树脂装重力柱,向柱中加入 倍柱体积5 Binding Buffer 平衡柱子(使谷胱甘肽树脂与目标蛋白在相同的缓冲系统中,以保护蛋白),流干液体。
    2. ( ) 将蛋白提取物样本加入树脂中孵育。 为了提高目标蛋白的回收率,控制流速,确保目标蛋白与树脂充分接触 。
      注意:收集流穿液,可通过 SDS-PAGE分析。出现问题时,更容易找到解决办法。
    3. 10 向柱中加入 - Wash Buffer 15 倍柱体积的 ,去除非特异性吸附蛋白。注意收集洗杂液。
    4. 10 5-向柱中加入 倍柱体积的 洗脱,分段收集,每一个柱体积收集 管。Elution Buffer 1
    5. 3 Binding Buffer 5 依次向柱中加入 倍柱体积的 和 倍柱体积去离子水交替平衡树脂,最后再使用 含 乙醇的 平衡5 mL 20% PBS树脂,重复 次,然后保存于含 乙醇的 中,置于 ,防止树脂被细菌污染。1 20% PBS 2-8℃
    6. SDS-PAGE 通过 分析各组分样本,检测纯化效果。

    在位清洗

    GST树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时需要对树脂进行清洗。

    去除一些沉淀或变性物质:
    用 倍柱体积的 盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用 倍柱体积的 的 清洗。2 6 M 5 pH 7.4 PBS

    去除一些疏水性吸附造成的非特异性物质:
    用 倍柱体积的 乙醇或 倍柱体积的3-4 70% 2 1% Triton X-100 5 ™ 清洗,然后立即用 倍柱体积的 的 清洗。pH 7.4 PBS

    常见问题

    暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。

    文献引用

    Activation of MAPK-mediated immunity by phosphatidic acid in response to positive-strand RNA viruses

    杂志名称: Plant Communications | 作者: J Lin, J Zhao, L Du, P Wang, B Sun, C Zhang, Y Shi, H Li, H Sun

    IF: 10 | 发表时间: 2024

    RNA Viruses Enhance Plant Drought Tolerance Through Modulation of Phospholipase Dα1 (PLDα1)‐Derived Phosphatidic Acid (PA).

    杂志名称: Plant, Cell & Environment | 作者: Lin, Jiayu, et al.

    IF: 6 | 发表时间: 2025

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