WB及IP裂解液

Name: WB及IP裂解液
Brand: Abbkine
SKU: BMP2020
Price: 139 CNY
Availability: InStock

WB (IP) Lysis Buffer

产品货号

BMP2020

产品特点：

非变性配方，温和裂解，有效保护蛋白复合物与相互作用

兼容IP、Co-IP、WB、IF等多种下游应用，一瓶多用

即开即用，4 ℃保存无需反复冻融，操作便捷

配套蛋白酶抑制剂PMSF，随加随用，降低蛋白降解风险

冰袋运输，12个月稳定储存，实验计划更灵活

选择规格

100 mL

¥139

现货（当天发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物推出的WB及IP裂解液 (WB (IP) Lysis Buffer)是一款专为免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）、Western Blot（WB）等蛋白研究场景设计的非变性细胞/组织裂解试剂，可在温和条件下高效释放可溶性蛋白，同时最大限度保留蛋白天然构象与相互作用。

背景与原理

在蛋白互作研究与信号通路分析中，维持蛋白复合物的完整性是获得可信结果的关键。WB及IP裂解液采用非离子型温和表面活性剂体系，可在不破坏蛋白间相互作用的前提下，快速裂解动物细胞与组织，释放胞内及膜结合蛋白。配套提供的PMSF（100 mM）可在裂解过程中即时抑制丝氨酸蛋白酶活性，防止蛋白降解，确保下游IP/Co-IP、SDS-PAGE及Western Blot实验的样本质量。

应用领域

广泛适用于动物细胞与动物组织样本的可溶性蛋白提取，特别适合蛋白-蛋白相互作用研究、信号转导通路验证、靶标蛋白富集及翻译后修饰分析等实验场景。

产品参数

中文名称	WB及IP裂解液
英文名称	WB (IP) Lysis Buffer
产品货号	BMP2020
试剂盒组分	• WB (IP) Lysis Buffer-50 mL×2 • PMSF (100 mM)-1.5 mL
保存建议	按各组分标签提示分开存储，保质期12个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

制冰机，低温离心机，涡旋仪
蛋白酶抑制剂混合物 (100×)
磷酸酶抑制剂混合物
可调节式移液枪及枪头
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

WB (IP) Lysis Buffer：即用型；使用前，置于冰上待用；4℃保存。

PMSF (100 mM)：即用型；使用前，置于冰上待用；避光保存。-20℃

Working WB (IP) Lysis Buffer：使用前，取适量的WB (IP) Lysis Buffer (每×10^6个细胞需要约50-100 μL或每20 mg组织样本需要约100-200 μL)，按100:1(V/V)加入PMSF(100 mM)。根据实验需要，加入蛋白酶抑制剂混合物（100×）和磷酸酶抑制剂混合物。

实验步骤

试剂盒组分	规格	储存条件
WB (IP) Lysis Buffer	50 mL×2	4 ℃保存
PMSF (100 mM)	1.5 mL	-20℃避光保存

A. 对于细胞

弃去培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗1遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗），离心收集细胞。
按照每10^6个细胞需要约50-100 μL Working WB (IP) Lysis Buffer的比例加入，比如6孔板每孔细胞量大约需加入100-200 μL Working WB (IP) Lysis Buffer。用移液器吹打数下，使Working WB (IP) Lysis Buffer和细胞充分接触，冰上裂解3-5 min。
充分裂解后，10,000-14,000 g离心3-5 min，取上清，即可进行后续的SDS-PAGE、WB、IP和Co-IP等操作。

B. 对于组织样品

把组织剪切成细小的碎片。
按照每20 mg组织样本加入100 μL的比例加入Working WB (IP) Lysis Buffer。
用匀浆器匀浆，冰上裂解3-5 min。
注意：如果样本裂解不充分，可以适当提高1. Working WB (IP) Lysis Buffer的用量；若需要高浓度的蛋白样品，也可适当降低Working WB (IP) Lysis Buffer的用量。若组织样本非常细小，可以适当剪切后直接加入Working WB (IP) Lysis Buffer，通过强烈涡旋振荡使其裂解充分。
充分裂解后，10,000-14,000 g离心3-5 min，取上清，即可进行后续的SDS-PAGE、WB、IP和Co-IP等操作。

注意事项

裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行，裂解后的蛋白样品可分装并长期保存于-80℃。
裂解后的蛋白样品，推荐使用蛋白质定量试剂盒（BCA法）测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定样品的蛋白浓度。
裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA团块形成，不必采用超声处理等就可以用于后续操作，也适合用于磷酸化蛋白的检测。推荐使用ExKine™ Pro动物细胞组织总蛋白提取试剂盒（柱式法），获得干净的上清。如果发现目的蛋白无法被WB下来，则说明WB (IP) Lysis Buffer的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如NP 40裂解液。