SOD活性检测计算避坑指南：一套思路搞定 U/g、U/mL、U/mgprot
做 SOD 活性检测，最容易拖慢节奏的不是上样和读板，而是——算结果。
- 四种孔型：空白、空白对照、样本、样本对照；
- ΔA、抑制率、稀释倍数、组织湿重、蛋白浓度……
- 稍不注意就少乘一个倍数、多除一个体积，整板数据全乱。
下面按**“统一计算思路 + 典型算例 + 常见坑 + 在线计算器”来整理一套可直接变成实验室 SOP 的逻辑， 默认使用的是一款WST-8 微量法 SOD试剂盒（例如 CheKine™ 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒，货号 KTB1030）**。
一、先固定一套“算账思路”
1. 四类孔 & ΔA 计算
常见孔型：
- 空白孔（Blank）：工作液 + XO，无样本
- 空白对照孔（Blank Control）：工作液，无 XO、无样本
- 样本孔（Sample）：样本 + 工作液 + XO
- 样本对照孔（Sample Control）：样本 + 工作液，无 XO
读完 450 nm 后，先做两件事：
① 扣本底，算 ΔA：
- ΔA_blank = A_blank − A_blank control
- ΔA_sample = A_sample − A_sample control
② 算抑制率：
抑制率（%） = [ΔA_blank − ΔA_sample] ÷ ΔA_blank × 100
抑制率反映的是：样本里的 SOD 把显色反应“压”掉了多少。
**目标区间：**抑制率控制在 10%–90%，才是理想线性范围。
太低或太高都要通过调整样本稀释倍数来修正。
2. 通用的 SOD 活性计算框架
不同试剂盒的公式细节（常数 K、体积因子等）略有差异，但结构都差不多，可以抽象成：
- 先通过抑制率算出“该体系内总 SOD 活性（U）”
- 再根据样本量做归一化，得到 U/g、U/mL、U/mgprot 等单位
可以理解为两步：
步骤 1：
活性（U/反应体系） = f（抑制率、体系常数 K）
步骤 2：
根据你关心的样本量形式去归一化：
- 组织 → 除以组织湿重 → U/g
- 血清 / 血浆 → 除以体积 → U/mL
- 细胞 / 组织+蛋白浓度 → 除以蛋白量 → U/mgprot
- 细胞 / 细菌 → 除以细胞数或 CFU → U/10⁶ cells / U/10⁸ CFU
实际实验中，不需要手动整理所有常数，直接按说明书给出的公式或者用在线计算器即可。
下面用三个简化过的“算例结构”来把整个链路跑一遍。
二、三个典型算例：血清 / 组织 / 细胞
说明：下面数字均为演示用的“结构示例”，
真实实验请以当批试剂盒说明书或在线计算器为准。
1. 血清样本：算到 U/mL
已知条件：
- 血清取 10 μL，用 Sample Diluent 稀释 10 倍（D = 10）；
- 上板体积每孔 20 μL；
- 读板后，某个样本的 4 个孔的 A 值为：
- A_blank = 0.800，A_blank control = 0.050 → ΔA_blank = 0.750
- A_sample = 0.400，A_sample control = 0.060 → ΔA_sample = 0.340
① 抑制率：
抑制率 = (0.750 − 0.340) ÷ 0.750 × 100%
≈ 54.7%
已经在 10–90% 区间，可以接受。
② 按说明书公式算 SOD 活性（示意）：
假设某 WST-8 kit 给出公式结构为：
SOD 活性（U/mL 原始血清）
= 抑制率（%） × K × 稀释倍数 D
例如：
SOD 活性（U/mL） ≈ 54.7 × K × 10
其中 K 为试剂盒给定的体系常数，你只要把抑制率和稀释倍数代进去即可。
2. 组织样本：从 U/mL 匀浆换算到 U/g 湿重
已知条件：
- 取肝组织 0.10 g；
- 加 0.90 mL 裂解液，做成 10% 匀浆，总体积记为 V = 1.00 mL；
- 取 10 μL 匀浆上板，稀释 5 倍（D = 5）；
- 按上一步类似方法算出匀浆样本的 SOD 活性为：
- SOD 活性（匀浆） = X U/mL
要得到： 以组织湿重计的 SOD 活性（U/g）。
计算结构：
- 匀浆总体积 V = 1.00 mL
- 每 mL 匀浆有 X U SOD 活性
- 这 1.00 mL 匀浆对应的组织湿重是 W = 0.10 g
于是：
组织 SOD 活性（U/g）
= X（U/mL 匀浆） × V（mL） ÷ W（g）
= X × 1.00 ÷ 0.10
= 10X（U/g）
只要你的 Excel 模板或计算器把 V 和 W 固定写进公式，以后算组织样本就只需要填 X 就行。
3. 细胞样本：算到 U/mgprot
已知条件：
- 收集某细胞系，经处理后，裂解得到上清；
- 同一管裂解液分两路：
- 一路做 SOD；
- 一路做 BCA 蛋白定量；
- BCA 结果：裂解液蛋白浓度 C = 2.0 mg/mL；
- 从 SOD 这一路的 A 值算出：
- SOD 活性（U/mL 裂解液） = Y U/mL。
要得到： SOD 活性以 U/mgprot 表示。
计算结构：
SOD 活性（U/mgprot）
= SOD 活性（U/mL 裂解液） ÷ 蛋白浓度（mg/mL）
= Y ÷ 2.0（U/mgprot）
例如 Y = 40 U/mL，则：
SOD 活性（U/mgprot） = 40 ÷ 2.0 = 20 U/mgprot
这就是细胞类实验里最常见的一种写法。
三、最常见的 6 个计算坑（真·会搞崩整板数据）
这 6 条，几乎每个做 SOD 的实验室都踩过一部分：
- 忘乘稀释倍数
- 上样前稀释了几倍，结果算活性时直接拿“表面看见的浓度”当真，整体结果偏小或偏大一截。
- 把“匀浆总体积”和“上板体积”搞混
- 公式里写的是总体积 V（匀浆总体体积），实际却塞进去了上板体积 V₁，直接多除了一次体积。
- 只算了 U/mL，就当成 U/g 或 U/mgprot 用
- 特别是组织样本，有的人只算了“匀浆 U/mL”，忘了乘总体积 / 除以湿重。
- 忘记扣样本对照孔本底
- 只用 A_sample − A_blank 的差值算抑制率，完全没处理样本自身颜色 / 浑浊。
- 复孔差很大，却直接平均
- 单个样本两个复孔差距过大（>10–15%），本应查原因 / 剔除异常值，却直接平均写进结果。
- 同一个课题里，几个人用不同版本公式
- 甲用早期抄的公式，乙用说明书最新版，丙用了自己改的 Excel，最后三套结果对不上。
解决方式其实很简单：
统一一套公式 + 固定一个 Excel 模板 / 在线计算器，
后面所有人都按这一个口径来算，数据才可比。
四、推荐的“默认单位习惯”（一张表就够）
日常用 SOD 做氧化应激，只要记住这一张表就行：
| 样本类型 | 默认单位 | 说明 |
|---|---|---|
| 动物 / 植物组织 | U/g | 以组织湿重计，必要时补 U/mgprot |
| 血清 / 血浆 / 其他体液 | U/mL | 以原始样本体积计 |
| 细胞裂解液 | U/mgprot | 以蛋白量计，机制研究最常用 |
| 细胞 / 细菌（可选） | U/10⁶ cells 等 | 按细胞数 / CFU 归一化，特殊场景使用 |
真正需要“选择”的地方不多， 更多是把同一类样本在一个课题里坚持用同一单位，别一会儿 U/g、一会儿 U/mgprot 乱切换。
五、手算太麻烦？直接用 SOD 在线计算器 / Excel 模板
如果你的实验用的是CheKine™ 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒（微量法，KTB1030），
可以直接用对应的在线计算器：
https://calculate.abbkine.cn/KTB1030/
这个工具的思路就是把上面那套流程“写死”进系统里：
- 你只需要：
- 选择样本类型；
- 把 450 nm 的 A 值按孔位填进去；
- 填上样本的质量 / 体积 / 稀释倍数 / 蛋白浓度等基础信息；
- 计算器自动帮你：
- 计算 ΔA、抑制率；
- 套用当前批次 KTB1030 的标准公式；
- 输出已经换算好的 SOD 活性（U/g、U/mL、U/mgprot 等）；
- 可以导出 / 复制，直接贴到你的 Excel 或统计软件中。
如果你愿意，可以再在实验室内部做一份对应的Excel 模板：
- 模板结构完全对齐在线计算器；
- 线上工具用来校验公式是否正确；
- 线下 Excel 用来长期保存原始数据和结果。
小结
这篇的目的不是教你“怎么选单位”，而是：
- 把WST-8 法 SOD 计算的统一思路 讲清楚；
- 用血清 / 组织 / 细胞的三个算例把 A 值 → 抑制率 → 活性 → 单位的链路跑一遍；
- 把最容易翻车的6 个计算坑 先列出来，后面少踩几次；
- 给出一个可以直接用在 KTB1030 的在线计算器入口：
https://calculate.abbkine.cn/KTB1030/
后面你在写 SOD 相关的技术文章或内部 SOP 时， 可以直接把这套逻辑和工具地址打包进去，让“怎么计算 SOD 活性”这件事在你们组里变成一个不用再讨论的问题。
