高通量实验室如何布局SOD检测？一板搞定8组模型+标准

做 SOD 的时候，你多半遇到过这种场景：

• 动物模型一大堆：对照、模型、低中高剂量、阳性药、空白…
• 每组还要 n≥5 只动物；
• 还想顺手做个板内标准、重复组，看看批次间是不是稳定。

结果就是：

“明明有 96 孔板，最后却像 24 孔板在用。”

这篇文章就围绕一个问题展开：

用一块 96 孔板，把 8 组模型 + 板内标准的 SOD 活性检测合理排下去，既不浪费孔，又留出足够质控。

默认你用的是一款WST-8 微量法 SOD试剂盒，比如：

CheKine™ 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒（微量法），KTB1030

下面所有“排板策略”“线性范围”的讨论，都按这种体系来写。

一、为什么 SOD 特别适合做 96 孔板高通量？

要想一板搞定 8 组模型，前提是方法本身够“板友好”。WST-8 微量法 SOD 有几个天然优势：

1. 完全 96 孔板逻辑
• 450 nm 读数，标准酶标仪即可；
• 体系体积在微量范围，对样本量友好。
2. 线性范围宽，抑制率可调
• 通过控制样本稀释，让抑制率稳定在 10–90% 区间；
• 最大抑制率可接近 100%，高活性样本也有操作空间。
3. 样本类型通吃
• 血清 / 血浆、组织匀浆、细胞裂解液都能在同一套体系里跑；
• 对“一个课题多模型、多组织”的实验室来说，非常适合做成平台法。

具体到CheKine™ SOD kit：

你可以把它当成实验室里“默认的 SOD 96 孔板方案”，再根据自己动物数和模型设计去改排板。

二、做 SOD 高通量排板的 3 条基本原则

在聊具体布局前，先把三条“死规矩”立住：

原则 1：每板必须有自己的“板内标准 + Blank 区”

高通量不是“孔塞满就算赢”，而是：

• 每块板都有Blank / Blank Control；
• 每块板都有一小块板内标准 / 质控样本，用来监控不同板之间的漂移。

以后你回头看数据时，

第一眼要能确认：

“这块板整体状态是正常的。”

原则 2：以“2 孔 / 样本”为基础，必要时按组共享对照孔

在 WST-8 SOD 体系里，理论最完整的做法是：

• 每个样本：1 个 Sample 孔（加 XO）+ 1 个 Sample Control 孔（不加 XO）。

在高通量场景下，如果你要挤进 8 组模型，可以在保证科学性的前提下做一点“合并”：

• 同一组 / 同一组织类型，可以共享 Sample Control（例如每组 1–2 个样本对照）；
• 个别“离群”的样本，如果发现背景特别高，再给它开独立 Sample Control。

这样可以把“每样本 3–4 孔”压缩到“多数样本 2 孔 + 每组 1–2 个对照孔”，

总通量立刻上一个台阶。

原则 3：行/列固定逻辑，方便日后追踪

高通量最怕的不是“排不下”，而是：

• 过几个月再看，谁也看不懂当时怎么排的。

推荐一个简单通用的习惯：

• 按行分组、按列排个体
• 行 = 不同处理组（Normal / Model / 药物组…）；
• 列 = 同一组里的个体（Animal 1–5）；
• Sample 与对应的 Sample Control 放在相邻列：
• 比如 C1–C2 是某只动物的 Sample 孔，D1–D2 是这一组的共享对照孔。

只要这个基本逻辑固定下来，你们组后来再扩容、接新同事，理解成本都非常低。

三、实例：一板搞定 8 组模型 + 板内标准（思路拆解）

下面给一个实际可落地的逻辑范例。

不强制你按这个精确排版，但思路照搬即可。

1. 假设的实验场景

• 动物：大鼠
• 模型：典型氧化应激 / 心血管 / 肝肾损伤一类设计
• 分组（共 8 组）：
1. 正常对照（NC）
2. 模型组（Model）
3. 阳性药物组（Positive）
4. 低剂量组（Low）
5. 中剂量组（Mid）
6. 高剂量组（High）
7. 载体对照组（Vehicle）
8. 预处理组 / 联合给药组（Pre/Combo）
• 每组计划：n = 5 只动物

目标：

一块 96 孔板，完成

• 8 组 × 5 只动物的 SOD 测定（以血清为例）

• 板内 Blank / Blank Control

• 1 组板内标准样本（QC），方便板间比较

2. 孔数预算（先算再排）

我们用“兼顾严谨 + 通量”的折中策略：

• 每只动物：
• 1 孔 Sample（+XO）
• Sample Control 采用每组共享 2 孔的方式
• 每组 5 只动物 → 5 孔 Sample + 2 孔 Group Sample Control
• 8 组 → (5 + 2) × 8 = 56 孔

额外再加：

• Blank 2 孔
• Blank Control 2 孔
• 板内标准样本（QC）：
• 3 孔 Sample + 2 孔 Sample Control → 5 孔

目前合计：

56（8 组样本） + 4（Blank 区） + 5（QC） = 65 孔

96 孔 − 65 孔 = 31 孔 仍然是空余的，可用来：

• 给某些关键组额外加 1–2 只动物；
• 给个别波动较大的组增加复孔；
• 给第二种样本类型（如肝匀浆）开一小块区域。

3. 排板示意：按行分组，按列排个体

下面给一个抽象版布局（示意，不是逐孔坐标表）：

• 第 1 行：板内质控区（QC + Blank）
• A1–A3：QC 样本（Sample 孔，3 个复孔）
• A4–A5：QC 样本控制（Sample Control）
• A6–A7：Blank（工作液 + XO）
• A8–A9：Blank Control（工作液，无 XO）
• A10–A12：预留（可做第二个 QC 或空板检查）
• 第 2–9 行：8 个处理组
• 前 5 个孔：该组 5 只动物的 Sample（+XO）
• 接着 2 个孔：该组共享 Sample Control
• 后面剩余孔：
• 视通量需要，可以放更多动物 / 复孔
• 或者不排满，给后续实验留下空位
• B 行：NC
• C 行：Model
• D 行：Positive
• E 行：Low
• F 行：Mid
• G 行：High
• H 行：Vehicle + Pre/Combo（可以一半一半）
• 每一行对应一个组：
• 每组内部逻辑：

例如（仅示意文字版）：

• B1–B5：NC Animal 1–5（Sample）
• B6–B7：NC Group Sample Control
• B8–B12：备用孔

其他组以此类推。

这样的排布有几个好处：

1. 一看一懂：
• 行 = 组别，列号 = 个体；
• 任何人拿到排板图都能迅速匹配。
2. 方便做“整板图”：
• 你可以导出 A 值 / 抑制率的热图，一眼看哪一组整体高、哪一组整体低。
3. 扩展性强：
• 如果未来改成 n=6 或 n=8，只需要把后面备用孔填上。

四、利用 KTB1030 体系体积和线性范围，优化高通量细节

说完大架构，再落回到这套CheKine™ WST-8 微量法 SOD kit（KTB1030） 的两个细节优势：

1. 微量体系体积，样本压力小

• 每孔总体系体积在微量范围（具体按说明书），血清 / 匀浆上样量也相对较小；
• 这意味着：
• 同一只动物的血清，既能做 SOD，又能留样给 MDA、GSH-Px 等其他指标；
• 对于组织匀浆，可以同时分装给多项酶活检测。

对高通量实验室的意义：

同一批动物，可以在一次取材中支撑完整的氧化应激 panel，

而不是“这次做 SOD，下次再补做 MDA”。

2. 抑制率范围可控，方便“一板多模型”

KTB1030 的设计逻辑是：

• 在合适样本稀释下，抑制率可以稳定落在 10–90%，
• 最大抑制率可接近 100%。

对排板意味着：

• 不同组织、不同模型（比如肝、高脂、肾、脑组织），

  你可以通过预实验把稀释倍数调整到相近抑制率区间；

• 真正上大板时，各组 A 值不会一边“贴底”、一边“顶格”，

  更适合做高通量对比。

高通量不是简单“堆样本”，而是：

通过体系体积 + 线性范围的组合， 让不同模型、不同样本在一块板上有可比性。

五、如果你不只做 SOD：一板 SOD，整套 panel 统一布局

很多高通量实验室不会只做 SOD，

常见是：

• SOD + MDA
• SOD + GSH-Px + CAT
• 甚至 SOD + 总抗氧化能力（T-AOC）一整套。

合理的策略是：

• 以 SOD 排板为“模板”：
• 行对应组别；
• 列对应个体；
• 其他指标（MDA、GSH-Px 等）在相邻板上，复制同一套排板逻辑：
• B1–B5 永远是 NC Animal 1–5；
• C1–C5 永远是 Model Animal 1–5；
• …

这样做的好处：

• 组合分析、相关性分析时，几乎不需要对照样本表；

• 任何一个样本的数据出问题（某一孔异常），

  可以立刻从其他指标对应孔位去交叉验证。

如果你用的都是CheKine™ 系列 kit， 完全可以在内部建立一个“氧化应激高通量排板模板”：

• SOD 板：按上文排一次；
• MDA 板：复制同样排法；
• GSH-Px / CAT 板：继续复制；
• 整个课题的板型结构保持一致。

六、最后：把排板变成你实验室的“固定资产”

真正成熟的高通量实验室，一般会做三件事：

1. 画一份固定的 SOD 96 孔排板模板
• 标好组别、个体编号、对照孔、QC 区域；
• 放在实验室墙上 / 文件夹里，新人一眼就懂。
2. 把模板和 KTB1030 的说明书绑在一起
• 明确每孔体系体积、上样体积；
• 写清楚推荐的样本稀释区间和预实验策略。
3. 把这块板作为“其他指标排板”的母版
• 后续的 MDA、GSH-Px、CAT 都沿用同样板型。

按照这套思路，

一块 96 孔板就不再只是“凑孔数”，而是变成一套：

有 QC、有标准、有跨指标可比性的

SOD 高通量检测平台。

如果你现在手上本来就在用CheKine™ 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒（微量法，KTB1030），

完全可以直接从这篇文章里抽出：

• “8 组 + 板内标准”的孔数预算；
• “按行分组、按列排个体”的排板逻辑；

再结合你自己的动物数和组织类型，

改成一份带组名的排板图，贴在实验室里长期使用。