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土壤游离氨基酸(S-FAA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Free Amino Acid (S-FAA) Content Assay Kit

产品货号
KTB4063

产品特点:

  • 已验证适用于多种土壤样本,操作步骤简洁,无需复杂前处理
  • 微量法设计,仅需少量样本即可完成检测,节省试剂与样本
  • 线性检测范围 1.25–20 μmol/mL,灵敏度达 1.25 μmol/mL,满足常规研究需求
  • 4 ℃避光保存,有效期 6 个月,冰袋运输,确保运输稳定性
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥398
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥689
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    亚科因生物研发的 CheKine™ 土壤游离氨基酸(S-FAA)含量检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Soil Free Amino Acid (S-FAA) Content Assay Kit)是一款专为土壤样本设计的微量法试剂盒,通过比色法快速测定土壤中游离氨基酸的含量,为土壤氮素循环与植物营养研究提供可靠数据。

    土壤中的游离氨基酸占土壤全氮的 15%–60%,是氮素循环与植物养分供给过程中的关键“库”与“源”。它们既可通过矿化作用释放氮素供作物吸收,也可被植物根系直接摄取,同时还能作为土壤微生物的重要氮源,影响微生物群落的结构、数量与活性。因此,准确监测土壤中游离氨基酸的动态变化,对深入理解土壤氮素循环机制及其对植物生理生态的影响具有重要意义。

    本试剂盒基于氨基酸的α-氨基与水合茚三酮的显色反应:在加热条件下,氨基酸与水合茚三酮生成蓝紫色化合物,该化合物在 570 nm 处具有特征吸收峰;通过测定 570 nm 处的吸光度变化,即可计算土壤样本中游离氨基酸的含量。

    应用领域

    本试剂盒主要用于土壤氮素循环研究、植物营养与生理生态研究、土壤微生物群落功能评估,适用于农业、生态、环境科学等领域的科研实验室。

    土壤游离氨基酸(S-FAA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤游离氨基酸(S-FAA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Free Amino Acid (S-FAA) Content Assay Kit
    产品货号 KTB4063
    样本类型 土壤
    试剂盒组分 • Extraction Buffer
    • ReagentⅠ
    • ReagentⅡ
    • Standard (5 mg)
    检测范围 1.25-20 μmol/mL
    灵敏度 1.25 μmol/mL
    检测指标 土壤游离氨基酸
    注意事项 •推荐使用新鲜土壤样本。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 570 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 离心机、水浴锅、振荡器、30-50目筛
    • 去离子水、乙醇

    试剂准备

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    Extraction Buffer60 mL (48 T) / 120 mL (96 T)4℃
    ReagentⅠ3.5 mL (48 T) / 7 mL (96 T)4℃
    Reagent II Powder×1 vial (48 T) / ×2 vials (96 T)4℃,避光保存
    Standard (5 mg)×1 vial (48 T) / ×1 vial (96 T)4℃,避光保存

    Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Working Reagent II:临用前配制,每瓶 Reagent II加入 1.5 mL 95%乙醇充分溶解,未用完的已溶解的 Reagent II可 4℃避光保存一周。

    注意:ReagentⅠ和 Reagent II有毒且有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    Standard:临用前配制,加 1.033 mL去离子水,充分溶解得到 40 μmol/mL标准品,未用完的已溶解的 Standard可 4℃避光保存一周。

    标准曲线设置

    用去离子水将 40 μmol/mL标准品稀释至 20、10、5、2.5、1.25 µmoL/mL,如下表所示。

    序号标准品体积去离子水体积(µL)标准品浓度
    Std.1100 µL of 40 μmol/mL10020 μmol/mL
    Std.2100 µL of Std.1(20 μmol/mL)10010 μmol/mL
    Std.3100 µL of Std.2(10 μmol/mL)1005 μmol/mL
    Std.4100 µL of Std.3(5 μmol/mL)1002.5 μmol/mL
    Std.5100 µL of Std.4(2.5 μmol/mL)1001.25 μmol/mL
    Blank01000
    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。称取约 0.2 g风干土样,加入 1 mL Extraction Buffer混匀,室温振荡 2 h,然后 10,000 g,室温离心 10 min,取上清液待测。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 570 nm,可见分光光度计用去离子水调零。
    2. 样本测定(在 EP管中依次加入下列试剂):
    试剂名称空白管(μL)标准管(μL)测定管(μL)
    去离子水2000
    不同浓度 Std.0200
    样本0020
    Working Reagent II202020
    ReagentⅠ505050
    3. 混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温 5 min,自来水冷却 10秒钟后加入 120 μL 60%乙醇,反复颠倒 EP管数次,每管取出 150 μL加入 96孔板或微量玻璃比色皿对应的孔中,于 570 nm测定吸光值,记为 A 空白、A 标准、A 测定,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白(空白管只需做 1管),显色后务必在 30 min内测完。
    注意:实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 20 μmol/mL的ΔA 标准,样本可用 Extraction Buffer进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在 570 nm处无吸收峰,因此,570 nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1.标准曲线的绘制

    以标准溶液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定代入方程得到 x (µmol/mL)。

    2. S-FAA含量计算

    S-FAA (µmol/g 土壤)=(x×V 样)÷(W×V 样÷V 提取)=x÷W

    V 样:加入的样本体积,0.02 mL;V 提取:加入 Extraction Buffer体积,1 mL;W:样本质量,g。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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