花青素还原酶(ANR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 花青素还原酶(ANR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB3010
Price: 2639 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Anthocyanidin Reductase(ANR) Activity Assay Kit

产品货号

KTB3010

产品特点：

微量法设计，节省珍贵细胞样本，适配96孔板高通量检测

比色法原理，无需复杂仪器，普通酶标仪即可完成读数

组分齐全，包含专用Extraction Buffer与四支反应试剂，即开即用

全程避光操作指引，减少光敏干扰，数据重现性更佳

选择规格

48 T/24 S

¥2639

现货（次日发货）

96 T/48 S

¥4398

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 花青素还原酶（ANR）活性检测试剂盒（微量法）(CheKine™ Micro Anthocyanidin Reductase(ANR) Activity Assay Kit) 是一款基于比色法的微量检测工具，可在细胞水平快速、准确地测定花青素还原酶活性，为研究植物类黄酮代谢及细胞氧化应激状态提供可靠数据。

花青素还原酶（Anthocyanidin reductase, ANR） 是原花青素生物合成途径中的关键限速酶，可催化花色素（anthocyanidin）还原生成相应的顺式黄烷-3-醇（cis-flavan-3-ol）。该反应不仅决定原花青素的合成效率，还直接影响植物体内类黄酮类物质的积累与花色苷的稳态。在细胞代谢研究中，ANR 活性的高低常被用作衡量细胞抗氧化潜能及类黄酮合成通量变化的重要指标。本试剂盒通过优化的比色体系，使ANR催化底物生成的产物与显色探针反应，在特定波长下产生可量化的吸光度信号，从而实现对ANR活性的高灵敏度检测。

应用领域

本试剂盒适用于植物细胞、愈伤组织及悬浮细胞系等样本，广泛用于细胞代谢、氧化应激、类黄酮合成通路及花色苷调控机制等研究方向，为植物生理学、天然产物合成生物学及细胞工程提供关键酶活数据支持。

产品参数

中文名称	花青素还原酶(ANR)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Anthocyanidin Reductase(ANR) Activity Assay Kit
产品货号	KTB3010
检测类型	氧化应激
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer •Reagent I •Reagent II •Reagent III •Reagent IV
检测指标	ANR
注意事项	• 推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在5 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	建议收到货后避光保存于-20°C，有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或紫外分光光度计（能测 340 nm 处的吸光度）
96 孔 UV 板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机、水浴锅
去离子水、无水乙醇
匀浆器

试剂准备

试剂盒组分	规格	储存条件
Extraction Buffer	60 mL (48 T) 60×2 mL (96 T)	4℃
ReagentⅠ	12 mL (48 T) 24 mL (96 T)	4℃
ReagentⅡ	Powder×1 vial (48 T) Powder×1 vial (96 T)	-20℃
ReagentⅢ	Powder×1 vial (48 T) Powder×1 vial (96 T)	-20℃
ReagentⅣ	Powder×1 vial (48 T) Powder×1 vial (96 T)	4℃

Extraction Buffer：即用型；内含不溶物，使用前摇匀；4℃保存。

ReagentⅠ：即用型；4℃保存。

ReagentⅡ：粉剂，临用前，96 T 加入 1.4 mL 去离子水，48 T 加入 0.7 mL 去离子水，充分混匀待用。用不完的试剂分装后-20℃保存一周，禁止反复冻融。

ReagentⅢ：粉剂，临用前 96 T 加入 1 mL 50%乙醇，48 T 加入 0.5 mL 50%乙醇，充分混匀待用。用不完的试剂分装后-20℃保存一周，禁止反复冻融。

ReagentⅣ：粉剂，临用前 96 T 加入 1 mL 去离子水，48 T 加入 0.5 mL 去离子水，充分混匀待用；4℃保存一周。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，样本如果不是立即测定，可在-80℃保存一个月。

植物组织：称取约 0.1 g 样本，加入 1 mL Extraction Buffer（注意混匀），进行冰浴匀浆，10,000 g，4℃离心 10 min，取上清，置冰上待测。

注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine 货号：KTD3001 的蛋白质定量试剂盒（BCA 法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 340 nm。紫外分光光度计用去离子水调零。
恒温箱预热到 37℃。
加样：

试剂	测定孔（μL）	对照孔（μL）
ReagentⅠ	170	170
ReagentⅡ	10	10
ReagentⅢ	5	5
Sample	10	0

充分混匀后，37℃反应 30 min

试剂	测定孔（μL）	对照孔（μL）
ReagentⅣ	5	5
Sample	0	10

4. 混匀后，测量测定孔和对照孔在 340 nm 下的吸光度，分别记为 A 测定、A 对照，计算 ΔA=A 对照-A 测定。

注意：实验之前，建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果 ΔA 小于 0.001，可适当加大样本量。如果 ΔA 大于 0.4，样本可用 Extraction Buffer 进一步稀释（计算结果乘以稀释倍数），或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

A. 使用 96 孔 UV 板测定的计算公式

1. 按照蛋白浓度计算

活性单位定义：每 mg 蛋白每分钟减少 1 nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

ANR 酶活(U/mg prot)=214.36×ΔA÷Cpr×n

2. 按照样本质量计算

活性单位定义：每 g 组织每分钟减少 1 nmol NADPH 为 1 个酶活单位。

ANR 酶活(U/g 鲜重)=214.36×ΔA÷W×n

ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×10³ L/mol/cm；d：96 孔 UV 板光径，0.5 cm；V 反总：反应体系总体积，L，200 μL=2×10^-4 L；10⁹：1 mol=1×10⁹ nmol；Cpr：蛋白浓度，mg/mL；V 样：加入上清液体积，0.01 mL；T：反应时间，30 min；n：样本稀释倍数；W：样品质量，g；V 样总：Extraction Buffer 的体积，1 mL。

B. 使用微量石英比色皿测定的计算公式

将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm 调整为 d: 1 cm 进行计算即可。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。