原果胶含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 原果胶含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1580
Price: 1289 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Protopectin Content Assay Kit

产品货号

KTB1580

产品特点：

样本类型覆盖广：经验证适用于多种植物组织，满足不同实验需求

微量体系设计：节约样本与试剂，降低实验成本

操作步骤精简：酸水解-显色-比色三步完成，实验流程清晰易掌握

选择规格

48 T/48 S

¥1289

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96 T/96 S

¥2148

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 原果胶含量检测试剂盒（微量法） (CheKine™ Micro Protopectin Content Assay Kit) 是一款基于酸水解-咔唑显色的比色法试剂盒，可在微量体系内快速测定植物组织等生物样本中的原果胶（Protopectin）含量，为细胞壁代谢研究提供可靠数据。

背景知识

果胶是植物细胞壁中一类富含半乳糖醛酸的多糖，通常以水溶性果胶与不溶性原果胶两种形式存在。原果胶在稀酸条件下可水解为可溶性果胶，并进一步降解为半乳糖醛酸；该产物在强酸环境中与咔唑发生缩合反应，生成紫红色化合物，于 530 nm 处具有特征吸收峰。CheKine™ 原果胶含量检测试剂盒利用这一原理，通过测定 530 nm 的吸光度变化，实现对植物组织中原果胶含量的微量级定量。

应用领域

本试剂盒主要用于细胞代谢与细胞壁生物学研究，可服务于植物生理学、作物品质改良、食品科学及天然产物开发等方向，为探索果胶代谢途径、评估细胞壁结构变化提供定量依据。

产品参数

中文名称	原果胶含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Protopectin Content Assay Kit
产品货号	KTB1580
检测方法	比色法
试剂盒组分	Extraction Buffer II •Reagent III •Standard
分子	Protopectin
检测指标	Protopectin
注意事项	•推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	4℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见光分光光度计（能测 530 nm 处的吸光度）
96 孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL 离心管
恒温箱、制冰机、低温离心机
去离子水、浓硫酸、无水乙醇
匀浆器或研钵（如果是组织样本）

试剂准备

Extraction BufferⅠ：95%乙醇。即将 95 mL 无水乙醇和 5 mL 去离子水混合。（自备）

Extraction Buffer II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

Reagent I：浓硫酸。（自备）

Reagent II：无水乙醇。（自备）

Reagent III：临用前配制；48 T 加入 2.1 mL 无水乙醇，96 T 加入 4.2 mL 无水乙醇，充分溶解待用。4℃避光保存可稳定 1 个月。

注意：Reagent I 具有强腐蚀性，请谨慎操作；Reagent III 有毒，建议在通风橱进行实验。

Standard：临用前配制；加入 1 mL 去离子水充分溶解，配制成 5 mg/mL 半乳糖醛酸标准品；4℃避光保存可稳定 1 个月。

0.5 mg/mL 半乳糖醛酸标准品制备：10 µL 10 mg/mL 半乳糖醛酸标准品用 90 µL 去离子水稀释。使用 0.5 mg/mL 半乳糖醛酸标准品，进行检测。

注意：每次实验，请使用新配制的标准品；配制好的标准品需要在 4 h 之内使用。

样本制备

注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样品解冻。

植物组织：将组织样品捣碎，称取约 0.05 g 样品，加入 1 mL Extraction BufferⅠ，置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30 min，取出冷却后 5,000 g，25℃离心 10 min，弃上清，沉淀中再加入 1 mL Extraction BufferⅠ重复操作一次，离心后去上清。沉淀中加入 1 mL 去离子水，50℃水浴 30 min，冷却后 5,000 g，25℃离心 10 min，弃上清。沉淀中再加入 1 mL Extraction Buffer II，置于 90℃恒温水浴锅中水解 1 h，取出冷却后 8,000 g，25℃离心 15 min，取上清液待测。

实验步骤

1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 530 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。

2. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP 管中操作）：

试剂	空白孔(μL)	标准孔(μL)	对照孔(μL)	测定孔(μL)
样本	0	0	30	30
Standard	0	30	0	0
ReagentⅠ	180	180	180	180
混匀，90℃水浴 10 min，取出自然冷却后再打开盖子，以防液体飞溅烧伤
Reagent II	0	0	30	0
Reagent III	30	30	0	30
混匀，25℃静置 30 min
去离子水	90	60	60	60

3. 充分混匀，取 200 μL 至 96 孔板或微量玻璃比色皿中，记录 530 nm 处吸光值，空白孔记为 A 空白，标准孔记为 A 标准，对照孔记为 A 对照，测定孔记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：空白管和标准管只需做 1-2 次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本的 ΔA 测定小于 0.01，可适当增大样本量，如果 ΔA 测定大于 0.8，样本可用 Extraction Buffer II 进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

原果胶含量的计算：

按样本鲜重计算：

原果胶(mg/g 鲜重)=(C 标准×V 标准)×ΔA 测定÷ΔA 标准÷(W×V 样÷V 样总)=0.5×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W

C 标准：标准品浓度，0.5 mg/mL；V 标准：反应体系中加入标准品体积，0.02 mL；V 样：反应体系中加入样品体积，0.02 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer II 体积，1 mL；W：样本鲜重，g。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。