还原糖含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 还原糖含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1360
Price: 369 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Reducing Sugar(RS) Assay Kit

产品货号

KTB1360

产品特点：

简单、快速、灵敏的比色法，30 min内完成检测

兼容动物组织、植物组织、细菌、细胞及血清/血浆等多类型样本

提供详细样品制备流程与结果计算公式，实验上手零门槛

微量体系设计，样本消耗少，检测范围0.05–0.6 mg/mL，灵敏度达0.025 mg/mL

选择规格

48 T/48 S

¥369

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥498

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 还原糖含量检测试剂盒（微量法）(CheKine™ Micro Reducing Sugar Assay Kit) 是一套基于DNS显色反应的比色体系，可在微量体系内快速、灵敏地定量动物组织、植物组织、细菌、细胞及血清/血浆等样本中的还原糖含量，为细胞糖代谢研究提供可靠数据。

还原糖（Reducing Sugar, RS）广泛分布于动物、植物、微生物及培养细胞中，常见的葡萄糖、果糖、麦芽糖等均属此类，是细胞呼吸作用的主要碳源与能量底物。本试剂盒利用DNS（3,5-二硝基水杨酸）与还原糖在碱性高温条件下发生氧化还原反应，生成棕红色氨基化合物，该产物在540 nm处具有特征吸收峰；吸光度与还原糖浓度在一定范围内呈线性关系，从而实现定量检测。

应用领域

本试剂盒适用于细胞代谢、糖酵解、能量代谢、植物生理、微生物发酵等研究方向，可服务于基础科研、药物筛选、功能食品开发及发酵工艺优化等场景。

产品参数

中文名称	还原糖含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Reducing Sugar(RS) Assay Kit
产品货号	KTB1360
检测类型	糖代谢
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer • DNS Reagent • Standard
检测范围	0.05-0.6 mg/mL
灵敏度	0.025 mg/mL
分子	RS
检测指标	RS
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在标准曲线测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测，结果乘以稀释倍数。 • DNS Reagent具有一定的毒性，请操作时做好防护措施。
保存建议	该试剂盒的有效期为12个月，4℃保存；试剂盒各组分的储存条件，请参考说明书。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 540 nm 处的吸光度）
96 孔板或微量玻璃比色皿，可调节式移液枪及枪头
离心机，水浴锅
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

试剂盒组分

试剂盒组分	规格	储存条件
48 T	96 T
Extraction Buffer	60 mL	120 mL	4℃
DNS Reagent	10 mL	20 mL	4℃，避光保存
Standard Powder	×1 vial	×1 vial	4℃

DNS Reagent：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

注意：Extraction Buffer和 DNS Reagent有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。

Standard：临用前加入 1 mL 去离子水溶解，配制 10 mg/mL 标准品；4℃保存 2 周。

标准曲线设置：用去离子水将 10 mg/mL 标准品稀释为 0.6，0.5，0.4，0.3，0.2，0.1，0.05 mg/mL。

注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。

样本制备

植物或动物组织样本：称取约 0.1 g 组织，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，转移到有盖离心管中（防止加热时水分蒸发），80℃水浴 40 min，每 5 min 振摇混匀 1 次，8,000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。
细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴超声波破碎细菌或细胞 5 min（功率 20%，超声 3 s，间隔 10 s，重复 30 次），转移到有盖离心管中（防止加热时水分蒸发），80℃水浴 40 min，每 5 min 振摇混匀 1 次，8,000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。
血清（浆）样本：取 0.1 mL 血清（浆），加 0.9 mL Extraction Buffer，充分混匀；转移到有盖离心管中（防止加热时水分蒸发），80℃水浴 40 min，每 5 min 振摇混匀 1 次，8,000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。

注意：1. 如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

2. Extraction Buffer中含有使蛋白变性的成分，若按蛋白浓度计算时，需要重新提取蛋白进行测定。

实验步骤

酶标仪或可见分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 540 nm，可见分光光度计用去离子水调零。
操作表：

试剂	空白管（µL）	标准管（µL）	测定管（µL）	对照管（µL）
Sample	0	0	175	175
Different concentration Std.	0	175	0	0
去离子水	175	0	0	125
DNS Reagent	125	125	125	0

混匀，沸水浴加热 5 min（盖紧，防止水分蒸发），取出后立即冷却至室温。取 200 μL 至 96 孔板或微量玻璃比色皿中，540 nm 波长处测定吸光值。计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白

注意：空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.04可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.6 mg/mL的 ΔA 标准，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

序号	10 mg/mL标准品体积（µL）	去离子水体积（µL）	浓度（mg/mL）
Std.1	60	940	0.6
Std.2	50	950	0.5
Std.3	40	960	0.4
Std.4	30	970	0.3
Std.5	20	980	0.2
Std.6	10	990	0.1
Std.7	5	995	0.05

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

标准曲线的绘制
以标准品浓度为 y 轴，ΔA 标准为 x 轴，绘制标准曲线。将 ΔA 测定带入方程计算出 y 值。
样本还原糖含量计算
1. 按样本质量计算
  还原糖 (μg/g)=1,000×y÷W×n
2. 按样本蛋白浓度计算
  还原糖 (μg/mg prot)=1,000×y÷Cpr×n
3. 按细菌或细胞数量计算
  还原糖 (μg/104)=2×y×n
4. 按血清（浆）体积计算
  还原糖 (μg/mL)=10,000×y×n
1000：单位换算系数，1 mg/mL=1,000 μg/mL；V 提取：加入 Extraction Buffer 体积，1 mL；V 液：加入血清（浆）体积，0.1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万；n：稀释倍数

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。